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目的 研究程序性死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)/程序性死亡蛋白配体1(programmed death ligand-1,PD-L1)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)归巢修复慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)中的影响.方法 分离纯化骨髓来源MSCs,流式细胞术检测细胞表面分子表达,油红O染色、碱性磷酸酶染色分别观察MSCs成脂及成骨分化情况.采用烟气暴露法构建COPD大鼠模型,造模完成后将绿色荧光蛋白(GFP)标记的MSCs经尾静脉分别注射入正常及COPD大鼠模型中,通过观察肺部荧光评价MSCs的归巢效果;经尾静脉向COPD模型大鼠注射MSCs作为MSCs治疗组,模型组和正常对照组注射等体积生理盐水,HE染色观察各组大鼠肺脏组织病理改变,qRT-PCR比较各组大鼠肺脏组织PD-1的表达情况;体外qRT-PCR检测PD-L1在MSCs的表达,Transwell实验法观察PD-1及PD-L1抗体对MSCs定向迁移(归巢)的影响.结果 大鼠骨髓来源 MSCs 提取分离后,细胞贴壁生长,呈长梭形,流式细胞术结果显示 MSCs上CD29、CD44 呈阳性表达,CD34、CD45 阴性表达,油红O染色可见呈深橙红色的脂滴,碱性磷酸酶染色可见典型的成骨表现;GFP标记的MSCs能够有效到达正常及COPD损伤肺组织中,荧光信号在COPD肺组织中明显强于正常肺组织,且PD-1在COPD肺组

作者:林志凤;王志红;陈燕辉;施佳恒;王宇潇;徐忠敏;石永斌;林丹婕

来源:中国组织化学与细胞化学杂志 2023 年 32卷 4期

知识库介绍

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作者:
林志凤;王志红;陈燕辉;施佳恒;王宇潇;徐忠敏;石永斌;林丹婕
来源:
中国组织化学与细胞化学杂志 2023 年 32卷 4期
标签:
慢性阻塞性肺疾病 间充质干细胞 程序性死亡蛋白1 程序性死亡蛋白配体1 归巢 Chronic obstructive pulmonary disease mesenchymal stem cells programmed death-1 programmed death-ligand 1 homing
目的 研究程序性死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)/程序性死亡蛋白配体1(programmed death ligand-1,PD-L1)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)归巢修复慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)中的影响.方法 分离纯化骨髓来源MSCs,流式细胞术检测细胞表面分子表达,油红O染色、碱性磷酸酶染色分别观察MSCs成脂及成骨分化情况.采用烟气暴露法构建COPD大鼠模型,造模完成后将绿色荧光蛋白(GFP)标记的MSCs经尾静脉分别注射入正常及COPD大鼠模型中,通过观察肺部荧光评价MSCs的归巢效果;经尾静脉向COPD模型大鼠注射MSCs作为MSCs治疗组,模型组和正常对照组注射等体积生理盐水,HE染色观察各组大鼠肺脏组织病理改变,qRT-PCR比较各组大鼠肺脏组织PD-1的表达情况;体外qRT-PCR检测PD-L1在MSCs的表达,Transwell实验法观察PD-1及PD-L1抗体对MSCs定向迁移(归巢)的影响.结果 大鼠骨髓来源 MSCs 提取分离后,细胞贴壁生长,呈长梭形,流式细胞术结果显示 MSCs上CD29、CD44 呈阳性表达,CD34、CD45 阴性表达,油红O染色可见呈深橙红色的脂滴,碱性磷酸酶染色可见典型的成骨表现;GFP标记的MSCs能够有效到达正常及COPD损伤肺组织中,荧光信号在COPD肺组织中明显强于正常肺组织,且PD-1在COPD肺组

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