目的:探讨结核分枝杆菌（MTB）蛋白Rv0309促进耻垢分枝杆菌（Ms）在巨噬细胞胞内存活的分子调节机制。方法:以Ms为研究结核分枝杆菌的模型，构建带有对照组pMV261-3*flag空载质粒和实验组pMV261-Rv0309-3*flag质粒的重组Ms并感染RAW264.7细胞。通过计数菌落形成单位（CFU），探索蛋白Rv0309对Ms胞内存活的影响。通过质谱法筛选蛋白Rv0309与宿主相互作用的蛋白，采用免疫共沉淀法（Co-IP）验证宿主蛋白STUB1可与蛋白Rv0309相互作用。敲减RAW264.7细胞
STUB1基因后感染Ms，计数CFU，探索
STUB1基因敲减后，蛋白Rv0309对Ms胞内存活的影响。敲减RAW264.7细胞
STUB1基因后感染Ms，收样后进行Western blot实验，探索
STUB1基因敲减后，蛋白Rv0309对巨噬细胞自噬功能的影响。使用GraphPad Prism 8 软件进行统计分析，本实验选择
t检验进行分析，以
P<0.05为差异有统计学意义。
结果:Western blot显示蛋白Rv0309表达于耻垢分枝杆菌体内并分泌到胞外。感染THP-1巨噬细胞实验在24 h时实验组Ms-Rv0309的CFU高于对照组Ms-pMV261，差异有统计学意义（
P<0.05）。感染RAW264.7巨噬细胞实验结果趋势与感染THP-1巨噬细胞相同。免疫共沉淀（Co-IP）结果显示免疫沉淀（IP）
作者：李璐；刘原园；袁金锋；彭逍；逄宇；鲁洁；唐神结
来源：中华结核和呼吸杂志 2023 年 46卷 4期
