目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA） DIO3OS对氯胺酮诱导的小鼠海马神经元细胞毒性的影响及其作用机制。方法:（1）分离并培养原代小鼠海马神经元，应用CCK-8法检测不同浓度（0、25、50、100、200 μmol/L）氯胺酮对细胞活力的影响，qPCR法检测 DIO3OS mRNA的表达。（2）将海马神经元分为对照组、氯胺酮组（50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+pc组（转染pcDNA3.1质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+DIO3OS组（转染pcDNA3.1-DIO3OS质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h），应用CCK-8法检测各组细胞活力，乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性检测试剂盒检测LDH释放量，流式细胞术检测细胞凋亡情况，qPCR法检测 DIO3OS、脑源性神经营养因子（ BDNF） mRNA的表达，Western blotting实验检测多聚嘧啶区结合蛋白1（PTBP1）、BDNF蛋白的表达。（3）提取正常海马神经元的总蛋白，应用RNA沉降实验检测 DIO3OS mRNA及 BDNF mRNA与PTBP1蛋白的结合能力。（4）将海马神经元分为氯胺酮+DIO3OS+si-NC组（同时转染pcDNA3.1-DIO3OS和si-NC质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+DIO3OS+si-PTBP1组（同时转染pcDNA3.1-DIO3OS和si-PTBP1质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24

作者：张琳；刘跃丹；李伟；唐富东

来源：中华神经医学杂志 2023 年 22卷 10期