目的:探究DNA甲基转移酶1(DNMT1)对前列腺癌细胞增殖和迁移侵袭的影响。方法:采用小干扰RNA(siRNA)沉默前列腺癌细胞株(PC3和DU145)中DNMT1表达,通过定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测沉默效率。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的体外增殖能力;TransWell检测细胞体外迁移和侵袭能力;Western blot检测si-DNMT1细胞后上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达。组间比较采用
t检验。
结果:qPCR和Western blot实验结果显示DNMT1在前列腺癌细胞中高表达,并成功构建siDNMT1 PC3和DU145细胞系。4 d后,CCK-8结果显示,siDNMT1细胞增殖能力低于相应对照组[PC3:1.27±0.71和1.44±0.48比1.66±0.58,
t=7.268、5.108,
P<0.01;DU145:1.43±0.12和1.27±0.10比1.80±0.06,
t=4.841、7.493、
P<0.01]。Transwell显示,与对照组细胞比较,siDNMT1细胞迁移和侵袭能力降低(
P<0.05)。Western blot结果显示,沉默DNMT1后E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达升高,而N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平下降。
结论:DNMT1在前列腺癌中高表达,沉默DNMT1后可有效抑制前列腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力。
作者:刘刚;万子衿;王杰;周凯辰;陆浩森;毛立军
来源:中华实验外科杂志 2023 年 40卷 11期