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目的 探究微小RNA-155(miR-155)在结肠炎相关结肠癌发生过程中的作用并初步筛选其下游的靶基因.方法 联合应用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关结肠癌,得到从结肠炎到结肠癌的3个不同阶段的小鼠模型(分别命名为AD1、AD2和AD3),同时设立无任何处理的对照组和只给予DSS来模拟慢性炎症的DSS组,取各组小鼠的结肠组织提取总RNA,逆转录成cDNA后应用实时荧光定量PCR检测miR-155的表达.结合前期的全基因组表达谱芯片数据和miRNA靶基因预测软件TargetScan和PicTar预测出来的潜在靶基因,初步筛选miR-155的下游靶基因,并用PCR进一步验证潜在靶基因的表达变化.结果 ADM和DSS联合使用能有效地模拟人类结肠炎相关结肠癌,结肠炎相关结肠癌的演变顺序为正常、轻度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生和腺癌.DSS组小鼠结肠miR-155的表达水平(0.005 6±0.003 7)与对照组(0.0120±0.005 1)比较,差异无统计学意义(P>0.05),而AD3组小鼠的miR-155表达水平(0.054 4±0.027 0)高于DSS组(0.005 6±0.003 7),差异有统计学意义(P<0.01).结合全基因组表达谱芯片和miRNA靶基因预测软件,初步筛选出miR-155可能的下游靶基因为Tie4、Kcna1、Itk、Bcorl1、Cacna1c、Rspo2和Foxo3,其中Kcna1和C

作者:李伟伟;韩文晓;赵新华;汪红英

来源:中华肿瘤杂志 2014 年 36卷 4期

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作者:
李伟伟;韩文晓;赵新华;汪红英
来源:
中华肿瘤杂志 2014 年 36卷 4期
标签:
微RNAs 结肠炎 结肠肿瘤 氧化偶氮甲烷 葡聚糖硫酸钠 小鼠 MicroRNAs Colitis Colonic neoplasms Azoxymethane Dextran sulfate sodium Mice
目的 探究微小RNA-155(miR-155)在结肠炎相关结肠癌发生过程中的作用并初步筛选其下游的靶基因.方法 联合应用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关结肠癌,得到从结肠炎到结肠癌的3个不同阶段的小鼠模型(分别命名为AD1、AD2和AD3),同时设立无任何处理的对照组和只给予DSS来模拟慢性炎症的DSS组,取各组小鼠的结肠组织提取总RNA,逆转录成cDNA后应用实时荧光定量PCR检测miR-155的表达.结合前期的全基因组表达谱芯片数据和miRNA靶基因预测软件TargetScan和PicTar预测出来的潜在靶基因,初步筛选miR-155的下游靶基因,并用PCR进一步验证潜在靶基因的表达变化.结果 ADM和DSS联合使用能有效地模拟人类结肠炎相关结肠癌,结肠炎相关结肠癌的演变顺序为正常、轻度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生和腺癌.DSS组小鼠结肠miR-155的表达水平(0.005 6±0.003 7)与对照组(0.0120±0.005 1)比较,差异无统计学意义(P>0.05),而AD3组小鼠的miR-155表达水平(0.054 4±0.027 0)高于DSS组(0.005 6±0.003 7),差异有统计学意义(P<0.01).结合全基因组表达谱芯片和miRNA靶基因预测软件,初步筛选出miR-155可能的下游靶基因为Tie4、Kcna1、Itk、Bcorl1、Cacna1c、Rspo2和Foxo3,其中Kcna1和C

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