目的:探讨S100A7通过细胞内外作用影响宫颈癌细胞迁移和侵袭的作用机制。方法:收集2007年5月至2007年12月在青岛大学附属医院妇科行手术治疗的5例宫颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)和3例腺癌组织标本,采用免疫组化SP法检测其S100A7蛋白的表达。通过慢病毒包装系统构建过表达S100A7的宫颈癌细胞HeLa和C33A,作为实验组,采用免疫荧光实验观察过表达S100A7宫颈癌细胞的形态变化,Transwell实验检测S100A7对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测宫颈癌细胞上皮-间质转化标志分子E-cadherin、N-cadherin、vimentin和fibronectin mRNA的表达。收集宫颈癌细胞条件培养基,采用Western blot法检测细胞外S100A7蛋白的表达。将收集的细胞条件培养基加入Transwell下层小室,检测细胞外S100A7对宫颈癌细胞运动能力的影响。分离纯化C33A细胞培养上清的外泌体,采用Western blot法检测S100A7、CD81和肿瘤易感基因101的表达。将外泌体和宫颈癌细胞共孵育进行Transwell实验,检测实验组和对照组外泌体对宫颈癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:S100A7蛋白在宫颈鳞癌组织中呈阳性表达,在宫颈腺癌组织中不表达。成功构建稳定过表达S100A7的HeLa和C33A细胞。实验组C33A细胞呈梭形间叶性细胞形态
作者:田甜;华震;孔琰;王灵芝;刘翔宇;韩毅;周学敏;崔竹梅
来源:中华肿瘤杂志 2023 年 45卷 5期