目的 观察益气健脾化瘀方协同5-氟尿嘧啶(5-Fu)对小鼠胃癌肺转移的抑制作用,并通过肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)表型转化探讨其可能的作用机制.方法 30只615小鼠随机分为空白对照组、模型组、5-Fu组、益气健脾化瘀方(YQJPHY)组、5-Fu+益气健脾化瘀方(5-Fu-+-YQJPHY)组.除空白对照组外各组小鼠尾静脉注射MFC细胞建立小鼠胃癌肺转移模型.给药2周后取材,观察肿瘤浸润肺组织情况,计算肺转移抑制率,流式细胞术测定TAMs及M1、M2比例,免疫组化观察M2的表达,qPCR与Western blot检测N-cadherin、snail、slug的表达.结果 5-Fu+ YQJPHY组肺转移灶结节及肿瘤浸润最少,抑制率最高(68.42％),明显高于其它组(P＜0.05);较5-Fu组,5-Fu+ YQJPHY组M1表达上升,M2表达明显下降,CD206表达减弱(P＜0.05),N-cadharin、snail、slug表达水平最低(P＜0.05).结论 益气健脾化瘀方与5-Fu联用有明显的协同抑制小鼠胃癌肺转移瘤的效果,其机制可能与促进诱导M2型TAMs向M1型转变,从而抑制肿瘤细胞的上皮间质转化(EMT)有关.

目的:观察益气健脾化瘀方协同5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对615小鼠胃癌生长的抑制作用,并通过肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)极化方向,探讨其可能的作用机制.方法:40只615小鼠随机分为正常组,益气健脾化瘀方(25 g·kg-1)组,5-FU(25 mg· kg-)组,联合(益气健脾化瘀方25 9·kg-1+ 5-FU 25 mg· kg-1)组,每组10只.腋下接种MFC胃癌细胞建立小鼠胃癌移植瘤模型.苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色法观察各组小鼠肿瘤病理的改变;流式细胞仪测定肿瘤组织中M1,M2型TAMs含量;免疫组化观察腋下移植瘤中CD206的表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测瘤组织中TAMs相关基因白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β),白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),精氨酸酶1(arginase-1,Arg1),几丁质酶3蛋白3(chitinase 3-like 3,Ym1)的mRNA表达水平.Real-time PCR,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测瘤组织中上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)相关上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin),神经性钙黏附蛋白(N-cadherin),锌指转录因子Slug,Snail,波形蛋白(Vimentin) mRNA及蛋白的表达.结果:各组小鼠胃癌细胞排列呈巢状及片状,细胞间质见促纤维结缔组织反应及少量炎症细胞浸润.各药物组可见明显肿瘤凝固性坏死,残留肿瘤细胞量正常组＞益气健脾化瘀方组＞5-FU组＞联合组.免疫组化表明,各给药组均能减少瘤体CD206的表达,以联合组最明显.流式细胞仪检测证实,与正常组比较,各给药组均能减少M2型TAMs的含量(P ＜0.05,P＜0.01),联合组减少M2型TAMs的含量最明显;益气健脾化瘀方组、联合组均能增加M1型TAMs的含量(P＜0.05,P＜0.01),以益气健脾化瘀方组最为明显.与正常组比较,益气健脾化瘀方组、联合组均能下调Arg1,Ym1 mRNA,上调IL-1β,TNF-α,IL-12 mRNA表达(P＜0.05).与5-FU组比较,联合组能明显升高IL-1β,IL-12,TNF-α mRNA,下调Arg1,Ym1 mRNA表达(P＜0.05).与正常组比较,益气健脾化瘀方组能上调E-cadherin mRNA及蛋白表达(P＜0.05),下调N-cadherin,Vimentin mRNA表达(P＜0.05);联合组能上调E-cadherin,下调N-cadherin,Slug,Snail,Vimentin mRNA表达(P＜0.05),上调E-cadherin,下调N-cadherin,Slug蛋白表达(P＜0.01).与5-FU组比较,联合组能上调肿瘤组织中E-cadherin,下调N-cadherin,Slug,Vimentin mRNA及蛋白表达(P＜0.05).结论:益气健脾化瘀方对胃癌生长有一定的抑制作用,与5-FU联用有较好的协同抑制胃癌生长、改善胃癌上皮间质转化,机制可能与促进胃癌中TAMs从M2表型向M1表型转化有关.

目的:初步研究美洲大蠊提取物CⅡ-3对上皮肿瘤细胞MFC荷瘤小鼠的抑瘤机制.方法:将Balb/c小鼠随机分为模型组(生理盐水20 mL/kg)和CⅡ-3组(200 mg/kg),每组6只.在小鼠右侧腋下注射MFC细胞悬液0.2 mL后,于次日灌胃相应药物,每日1次,连续10 d.末次给药24 h后,在测量瘤体大小的基础上,采用氢-1核磁共振技术(1H-NMR)并结合非监督型主成分分析(PCA)、监督型偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),比较两组荷瘤小鼠肝组织的代谢谱并分析差异性代谢物,探索CⅡ-3抑瘤作用的潜在机制.结果:与模型组比较,CⅡ-3组荷瘤小鼠的瘤体明显减小;两组小鼠的1H-NMR图谱存有差异;结合非监督型PCA、监督型PLS-DA、OPLS-DA结果,共确定了肝组织潜在差异性代谢物6个,分别为糖原(升高)、丙酮酸(降低)、精氨酸(降低)、羟脯氨酸(升高)、肌苷(升高)、烟酰胺(升高),主要归属于精氨酸代谢、能量代谢和核酸代谢.结论:CⅡ-3对MFC荷瘤小鼠的抑瘤作用可能与调节精氨酸代谢、能量代谢和核酸代谢有关.