目的:研究九味楮实方对中枢性性早熟（central precocious puberty，CPP）模型大鼠血清性激素水平及下丘脑Kisspeptin蛋白表达的影响。方法:以SD大鼠配种得到雌性仔鼠60只，按随机数字表法分为正常对照组、模型组、戈那瑞林组及九味楮实方高、中、低剂量组，每组10只。除正常对照组外，其余大鼠均皮下注射N-甲基-DL-天冬氨酸建立CPP模型，戈那瑞林组皮下注射戈那瑞林100 μg/（kg·d），九味楮实方高、中、低剂量组分别灌胃九味楮实方浸膏剂5.75、2.87、1.43 ml/（kg·d）。采用ELISA法检测大鼠血清LH、FSH、雌二醇（E 2）水平，Western blot法检测下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）、Kisspeptin蛋白表达情况。 结果:与模型组比较，九味楮实方低、中、高剂量组LH、E 2水平降低（ P<0.05），FSH水平升高（ P<0.05），九味楮实方中、高剂量组GnRH［（0.657±0.110）、（0.536±0.152）比（0.912±0.219）］、Kisspeptin［（0.508±0.035）、（0.347±0.073）比（0.659±0.030）］蛋白表达降低（ P<0.05）。 结论:九味楮实方可干预CPP模型大鼠下丘脑Kisspeptin蛋白表达，抑制下丘脑GnRH表达，降低血清LH、E 2水平。

目的 研究九味楮实颗粒在治疗雌性中枢性性早熟过程中对大鼠甲状腺激素水平及甲状腺组织形态的影响.方法 48只23日龄雌性SD大鼠,按照随机表法分成对照组、模型组、西药组和中药低、中、高剂量组,每组8只.采用N-甲基-DL-天冬氨酸(NMDA)建立大鼠性早熟模型,中药低、中、高剂量组分别选用3种倍增剂量(17.37 g/kg、34.74 g/kg和69.48 g/kg)的九味楮实颗粒干预;西药组用戈那瑞林干预.观察大鼠的饮水、进食和活动情况以及甲状腺滤泡细胞形态;采用ELISA试剂盒法检测大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、游离甲状腺素(FT3、FT4)及促甲状腺激素(TSH)水平.结果 与对照组比较,模型组大鼠血清LH、FSH、E2水平升高,TSH水平降低,FT3、FT4水平升高(P＜0.05).与模型组比较,西药组、中药中、高剂量组大鼠血清LH、FSH、E2水平降低,TSH水平升高,FT4水平降低,FT3水平轻度降低(P＜0.05);中药低剂量组较模型组FSH水平降低,FT4水平降低(P＜0.05).结论 九味楮实颗粒在治疗性早熟过程中可能影响FT3、FT4、TSH的水平.

目的 应用N-甲基-DL-天冬氨酸(NMA)构建SD雌性大鼠中枢性性早熟模型,并探讨九味楮实颗粒对雌性真性性早熟大鼠体质量及垂体分泌的卵泡刺激素(follicule-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estra-diol,E2)水平的影响.方法 选取48只26日龄SD雌鼠随机分对照组、模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组8只.除对照组外,其余组均采用NMA方法建立性早熟动物模型,中药组、西药组分别予九味楮实颗粒、戈那瑞林干预,对照组和模型组给予等体积的生理盐水干预,每日观察阴道口开放情况,每间隔2d测一次体质量,计算各组大鼠脏器系数(子宫、卵巢及双侧乳腺),采用ELISA检测血清FSH、LH、E2水平.结果 与对照组比较,模型组大鼠阴道口开放时间提前(P<0.05);大鼠在出生后26、29、32 d体质量无明显变化(P>0.05);子宫系数升高(P<0.05);血清LH、FSH水平明显增加(P<0.05).与模型组比较,西药组、中药各剂量组大鼠阴道口开放时间明显延迟(P<0.05);中药高剂量组大鼠在出生后35、38 d体质量明显降低(P<0.05);西药组、中药中剂量组大鼠子宫系数降低(P<0.05);西药组、中药中剂量组大鼠卵巢系数及双侧乳腺系数无明显变化(P>0.05);西药组、中药高剂量组、中剂量组的血清LH、FSH、E2水平明显降低(P<0.05).与中药低剂量组比较,中药高中剂量组的血清LH、FSH、E2水平明显降低(P<0.05).结论 九味楮实颗粒可抑制NMA诱发雌鼠性早熟的发生,同时能降低性早熟模型大鼠的血清LH、FSH、E2的水平,推测九味楮实颗粒可能通过调节下丘脑-垂体-性腺轴起到抑制性早熟的作用.

目的 观察九味楮实颗粒对雌性中枢性性早熟(CPP)大鼠下丘脑GnRHmRNA及KISS-1表达水平的影响,探讨该方的作用机制.方法 选用SPF级26日龄SD雌鼠48只,完全随机分为6组:对照组、性早熟模型组、注射用戈那瑞林组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组8只,除对照组外,其余五组均采用N-甲基-DL-天冬氨酸(NMA)方法建立性早熟动物模型.对照组及模型组给予生理盐水1.0 mL/只灌胃,中药高、中、低剂量组分别予九味楮实颗粒69.48,34.74,17.37 g/kg灌胃,西药组予注射用戈那瑞林100μg/kg肌肉注射,用实时荧光定量-PCR的方法检测各组大鼠下丘脑KISS-1、GnRHmRNA表达水平.结果 各造模组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量均高于正常对照组(P＜0.05).戈那瑞林组及九味楮实颗粒高、中、低剂量组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量均低于模型组(P＜0.05),模型组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量分别是九味楮实颗粒中剂量组的3.92倍、3.3倍;中药高、中、低剂量组与戈那瑞林组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05);中药高、中、低剂量组组间KISS-1 mRNA相对表达量两两比较均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 通过荧光定量PCR技术发现九味楮实颗粒可能通过下调性早熟模型大鼠下丘脑Kiss-1及GnRH mRNA的表达,抑制GnRH的释放,延缓性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonad axis,HPGA)的启动.

目的 研究九味楮实方对性早熟模型大鼠的治疗作用,探索中药复方调节KISS1/KISS1R系统对性早熟大鼠的机制研究.方法 选取26日龄SPF级雌性SD大鼠60只,随机分为对照组,模型组,低、中、高剂量九味楮实方组、西药组.除对照组外,每组给予N-甲基-DL-天冬氨酸(NMA)诱导性早熟模型,同时按照分组,中药组予九味楮实方灌胃,西药组予戈那瑞林皮下注射,造模给药后每日观察大鼠阴道开放时间以及第一个动情周期.在模型组出现第一个动情周期时,造模以及给药结束.ELISA实验检测各组血清中LH、FSH、E2表达水平;q-PCR检测KISS1、KISS1R、SIRT1、GnRH在下丘脑中的基因表达水平.结果 跟对照组相比,模型组大鼠阴道开放时间提前(P＜0.05);LH、E2表达水平升高(P＜0.05);KISS1、GPR54、GnRH基因相对表达量也显著升高;SIRT1蛋白表达水平明显降低(均P＜0.05);与模型组比较,西药组及中药各剂量组大鼠LH、E2表达水平均显著下降(P＜0.05);西药组、中药高、中剂量组KISS1、GPR54、GnRH基因表达水平均显著下降;SIRT1基因表达水平显著升高(均P＜0.05).结论 CPP模型大鼠下丘脑KISS1、GPR54、GnRH基因表达增多,SIRT1表达降低,伴性激素水平升高,九味楮实方可以通过影响下丘脑KISS1、GPR54、SIRT1基因,从而抑制性激素GnRH的合成与释放,调控下丘脑-垂体-性腺轴,对CPP模型大鼠发挥治疗作用.