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基于网络药理学和动物体内试验验证云实感冒合剂对呼吸道合胞病毒作用
编辑人员丨5天前
目的:基于网络药理学和体内试验探讨云实感冒合剂抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的作用机制。方法:网络药理学预测:运用TCMSP、GeneCards等数据库预测云实感冒合剂干预RSV的活性成分及作用靶点。利用Cytoscape 3.2.1软件构建中药成分-疾病靶点网络图。通过STRING数据库分析蛋白质相互作用关系。借助Metascape数据库进行富集分析。采用分子对接技术分析验证网络药理学结果。云实感冒合剂干预RSV感染验证试验:滴鼻法建立RSV小鼠模型,灌胃合剂后检测血常规、肺指数,观察肺组织病理变化,流式细胞术检测外周血T细胞亚群,ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量,RT-PCR检测肺组织中TLR4、NF-κB和RSV-N基因mRNA相对水平。结果:分析获得云实感冒合剂有效活性成分41个,抗RSV靶点111个,富集得到167条信号通路,主要是PI3K/AKT、MAPK、Toll-like等信号通路。分子对接结果显示,云实感冒合剂活性成分木犀草素、山奈酚、槲皮素与RSV-G、RSV-F、PI3K、AKT1、Bcl-2结合能均小于0 kcal/mol。体内试验结果显示,与RSV组相比,云实感冒合剂高剂量组白细胞、淋巴细胞计数升高、肺指数降低,差异有统计学意义( P<0.05)。HE染色显示RSV组肺组织增生,肺泡壁变厚,间质内有炎性细胞浸润,利巴韦林组和云实感冒合剂低、中、高剂量组中肺泡大小趋向均匀,肺泡壁厚度均一。与RSV组相比,云实感冒合剂低、中、高剂量组的CD3 +、CD4 +、CD8 + T淋巴细胞数量明显升高,CD4 +/CD8 +T细胞数量比值降低,血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量下降,肺组织中病毒载量和TLR4、NF-κB mRNA水平降低,差异均具有统计学意义( P<0.05)。 结论:云实感冒合剂通过多成分、多靶点、多通路发挥调控RSV感染,主要通过缓解肺组织病理损伤,减轻炎症反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路激活有关。
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编辑人员丨5天前
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基于HPLC特征图谱及化学计量学的苗药云实感冒合剂质量评价研究
编辑人员丨2023/8/5
目的:建立特征性图谱和多指标定量与化学计量学相结合的云实感冒合剂质量评价方法.方法:采用WondasilTM C18-superb色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为10μl,流速为1.0 ml·min-1,对没食子酸、原苏木素B、鞣花酸3种成分进行含量测定和特征图谱研究,并结合药材的图谱进行化学成分归属,结合化学计量学方法对云实感冒合剂的质量进行评价研究.结果:含量测定表明没食子酸0.3270~1.3640 mg·ml-1、原苏木素B 0.1640~0.6200 mg·ml-1、鞣花酸0.0160~0.0810 mg·ml-1.17批云实感冒合剂的HPLC特征图谱共有模式确定了25个共有峰,其中没食子酸和鞣花酸来自于云实皮和蓝布正,原苏木素B来自于云实皮,供试品分别与云实皮、蓝布正、马鞭草、生姜药材呈现9,7,11,3个相对应的色谱峰,并且17批云实感冒合剂的特征图谱相似度大于0.97,聚类分析及主成分分析均将17批云实感冒合剂聚为3类.结论:本文建立了云实感冒合剂HPLC特征性图谱,灵敏度高,重复性好,简单方便,易操作,通过对比云实感冒合剂待测样品与云实感冒合剂HPLC特征图谱共有峰的相似度,并结合化学计量学方法,可对云实感冒合剂的质量进行整体描述和评价,并确保产品质量的均一性.
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编辑人员丨2023/8/5
