以ε-聚赖氨酸产量为1.60g/L的Streptomyces albulus M-Z18为出发菌株,利用核糖体工程技术选育具有双重抗生素抗性的ε-聚赖氨酸高产菌株,并对高产菌株和出发菌株的生理生化性能进行比较.通过链霉素诱变成功选育出了1株遗传稳定的ε-聚赖氨酸产生菌S.albulus S-7,ε-聚赖氨酸产量为2.03g/L;对S.albulus S-7叠加巴龙霉素,获得1株遗传稳定的具有双重抗性的ε-聚赖氨酸产生菌S.albulus SP-14,ε-聚赖氨酸产量为2.37g/L,比出发菌株S.albulus M-Z1 8的ε-聚赖氨酸产量增加了48.10％.使用链霉素和巴龙霉素选育具有双重抗生素抗性的ε-聚赖氨酸高产菌株是一种有效的手段.

[背景]沙门菌的多重耐药现象日渐严重,对其耐药机理的研究尤为迫切,双组分系统与细菌耐药性密切相关.[目的]构建鼠伤寒沙门菌baeSR基因缺失株及回补株,探究双组分系统BaeSR对鼠伤寒沙门菌耐药性的影响.[方法]以鼠伤寒沙门菌体外诱导耐药株CR为研究对象,通过自杀质粒pLP12介导的同源重组方法,以氯霉素抗性标记和阿拉伯糖诱导的致死基因vmt进行正、反向双重筛选,获得基因缺失株CR△baeSR,并将重组表达质粒pBAD-baeSR转化于CR△baeSR构建回补株CR C△baeSR.采用微量肉汤稀释法测定11种常见代表药物对野生株、缺失株及回补株的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC),并测定3株菌的生长曲线、运动性及生物膜形成能力.[结果]与野生株相比,环丙沙星(CIP)、恩诺沙星(ENR)、沙拉沙星(SAR)、头孢噻呋(CEF)、庆大霉素(GEN)、阿米卡星(AMK)、安普霉素(APR)对缺失株的MIC值有所下降;缺失株的生长速率稍显缓慢,且最终浓度也相对较低,但并无统计学上的显著差异(P＞0.05);缺失株的运动性(P＜0.05)及生物膜形成能力(P＜O.01)均显著下降.[结论]鼠伤寒沙门菌baeSR基因缺失后,可通过影响其运动性及生物膜形成能力而对抗生素的敏感性产生影响.

为了解海口市白沙门污水处理厂活性污泥中细菌抗生素耐性情况,采用平板分离技术分离、纯化细菌,并通过BIOLOG微生物鉴定系统对筛选到的细菌进行鉴定,同时采用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法进行药敏试验并进行抗生素耐性分析.本研究共分离到18株细菌,分属8个属,14个种,其中G+和G-均为9株.抗生素药敏性试验结果表明,所有菌株均耐药,菌株单重耐药率、双重耐药性及多重耐药性分别为50％、38.9％、和11.1％.菌株对9种常用抗生素:头孢他啶、环丙沙星、庆大霉素、链霉素、氨苄西林、红霉素、氯霉素、四环素、卡那霉素的耐药率分别为61.1％、0％、5.6％、16.7％、50％、16.7％、11.1％、0％、5.6％.综上所述,白沙门污水处理厂活性污泥中的细菌耐药性比较严重,存在潜在的环境生态和人畜健康风险.本研究揭示了当前白沙门污水处理厂活性污泥中细菌对常见抗生素耐药的严重现状,为建议污水处理厂加强出水及污泥中抗生素耐药性及耐药基因的检测并评估其生态影响提供基础,避免出水及污泥中的抗性菌和耐药基因可能带来的风险问题.

目的 利用等离子体诱变,结合抗生素抗性筛选,获得西索米星高产菌株.方法 首先通过链霉素抗性筛选,获得一株比出发菌株产抗能力高的S4;随后以S4为出发菌株,经等离子体处理40s,借助巴龙霉素抗性筛选,得到双重抗性菌株.最后对突变株进行再次诱变,并结合高浓度链霉素抗性筛选.结果 获得一株高产突变株M inyoensis SAAP22,比出发菌株效价提高了38.18％,具有稳定的遗传性能.结论 通过等离子体诱变,结合抗生素抗性筛选,可有效提升伊尼奥小单孢菌的西索米星合成能力,所得高产菌株具有潜在应用价值.