当前检索词：“叠氮溴化丙锭-微液滴数字聚合酶链反应”。为您检索到约 1 条结果
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PMA-ddPCR法检测活的非可培养状态高产乙醇肺炎克雷伯菌
编辑人员丨2天前
目的:建立活的非可培养（VBNC）状态高产乙醇肺炎克雷伯菌的绝对定量方法。方法:诱导高产乙醇肺炎克雷伯菌进入VBNC状态，评价乙醇产量。建立PMA-ddPCR方法通过单拷贝基因来计数高产乙醇肺炎克雷伯菌VBNC状态的活细胞基因拷贝数。进一步在VBNC状态粪便模拟中，评价ddPCR对低浓度样品检测的灵敏度和适应性。结果:对高产乙醇肺炎克雷伯菌梯度稀释液进行定量时ddPCR的检测下限是qPCR的10倍。在低温、低营养状态，高产乙醇肺炎克雷伯菌第45天进入VBNC状态，通过PMA-ddPCR对VBNC状态细胞进行定量结果为（5.46±0.05）log 10 DNA 拷贝数/ml。VBNC状态的乙醇产量为<2.2 mmol/L，复苏后恢复产乙醇能力。VBNC状态粪便模拟样品中ddPCR最低检测下限为3.2 log 10 DNA拷贝数/ml。 结论:建立VBNC状态高产乙醇肺炎克雷伯菌的ddPCR检测方法灵敏度和适应性良好，可用于临床样品中VBNC状态细胞的检测。
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编辑人员丨2天前
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