目的 利用化学发光免疫分析快速法定量检测人血清中NT-proBNP.方法 将生物素和吖啶酯衍生物分别标记识别NT-proBNP抗原的2个抗体,当抗原与试剂混合后形成的双抗体夹心复合物被链霉亲和素磁珠抓捕分离,复合物在激发液的作用下发光,该相对发光强度(RLU)与样本中的NT-proBNP浓度呈正相关.结果 性能分析显示,这种检测方法的线性范围是8 pg/ml ～2 0000 pg/ml,线性相关系数(r)≥0.999,检测下限(LOB) ≤6 pg/ml,其批内精密度≤5％,批间精密度≤8％,添加回收率在88.3％ ～ 106.1％,稀释回收率在93.4％ ～ 106.8％.与罗氏ProBNPⅡ试剂盒比对,检测临床样本的浓度相关性为r2=0.979 7.结论 该试剂盒的优良性能为临床检测人血清中NT-proBNP含量提供了坚实的基础.

目的 探讨1-(4-甲氧基)苯基-9-丁基-β-咔啉(DH-004)对秀丽隐杆线虫(简称线虫)的神经毒性.方法 采用野生型线虫为模式生物,分别以DH-0040.0(溶剂对照组),12.5,25.0,50.0,100.0和200.0μmol·L-1连续培养,分别于不同时间显微镜下观察线虫的存活率、头部摆动频次、有效产卵总数、趋向和趋避行为及摄食行为.吖啶橙染色荧光显微镜下观察细胞凋亡;试剂盒检测虫体组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.结果 与溶剂对照组相比,不同浓度DH-004染毒处理5 d后,线虫存活率随药物浓度的增加而显著降低(R 2=0.949,P<0.01).DH-00425.0μmol·L-1处理3 d(P<0.01)、50.0μmol·L-1处理1～3 d(P<0.05,P<0.01)及100.0和200.0μmol·L-1处理1～3 d(P<0.01)组线虫头部摆动频次均显著降低.与溶剂对照组相比,DH-00425.0,50.0,100.0和200.0μmol·L-1组有效虫卵总数明显减少(P<0.01),趋向系数显著下降(P<0.05,P<0.01),趋避系数显著上升(P<0.01);DH-00412.5μmol·L-1组处理2～3 d(P<0.01)及25.0,50.0,100.0和200.0μmol·L-1组处理1～3 d(P<0.01)线虫咽部收缩次数均显著减少.吖啶橙染色结果显示,与溶剂对照组相比,DH-00450.0,100.0和200.0μmol·L-1组细胞凋亡水平显著升高(P<0.01).与溶剂对照组相比,DH-004浓度依赖性增高线虫体内AChE活性抑制率(R 2=0.851,P<0.01),IC50为(94.7±3.7)μmol·L-1.结论 DH-004对线虫具有一定的神经毒性效应,其作用机制可能与促进细胞凋亡和抑制AChE活性有关.

目的 设计合成具有良好抗肿瘤活性的吖啶酮类衍生物,并进行体外细胞毒活性研究.方法 以吖啶酮为起始原料,根据药物设计的结构拼合原理,设计合成了7个吖啶酮乙酸酯类衍生物,通过1 H-NMR、13C-NMR和HR-MS谱对目标化合物的结构进行了确证,并采用MTT法测试了目标化合物对胃癌细胞的体外细胞毒活性.结果 与结论设计合成的7个目标化合物均未见文献报道,其中化合物4c和4e对人胃癌细胞(SCG)表现出良好的细胞毒活性,IC50值分别为18.46、11.85 μmol· L-,具有进一步开发为新型抗肿瘤药物的潜力.

目的 设计合成含吡咯侧链的吖啶衍生物,并测试其体外抗肿瘤活性.方法 以2-氨基-4-羟基-5-甲氧基苯甲酸甲酯(1)和1-(3-羟丙基)四氢吡咯(2)为原料,依次经过Mitsunobu反应、Buchwald-Hartwig偶联反应、水解反应、Friedel-Crafts酰基化及氯代反应合成得到目标化合物9-氯-2-甲氧基-3-(3-(吡咯烷-1-基)丙氧基)吖啶(6a),6a分别与8种亲核试剂(水、乙醇、甲胺、异丙胺、2-氨基-丁烷盐酸盐、2-甲氧基丙-1-胺盐酸盐、2-甲基正丁胺、2-氨基-4,6-二甲基烟腈)反应,得到系列目标化合物6b～6i.产物及中间体结构均经ESI-MS、1H-NMR谱确证.并分别讨论了中间体(4和5)、目标化合物6a的合成反应影响因素.结果 体外抗肿瘤活性研究显示,目标化合物6a～6i对HepG2、A549、MCF-7和PC-3这四种细胞株均展现出了一定的活性,尤其是目标化合物6d对MCF-7细胞的增殖有较明显的抑制作用(IC50=12.3 μmol·L-1).结论 含吡咯侧链的吖啶衍生物具有一定的抗肿瘤活性,其中衍生物6d的抗肿瘤活性最强,可作为先导化合物进行更深入的研究.