目的:探讨含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2（ WWP2）基因的2个单核苷酸多态性位点（rs3790088、rs4247109）与急性一氧化碳中毒后迟发性脑病（DEACMP）潜在的关联性，探寻引起DEACMP的遗传易感基因。 方法:选择2006年11月至2017年12月就诊的急性一氧化碳中毒（ACMP）昏迷抢救成功患者，共235例DEACMP患者和429例ACMP患者，ACMP患者均随访90 d以上且未发生DEACMP。采用血液基因组DNA提取试剂盒进行外周血DNA提取；运用Sequenom分型检测技术分析 WWP2基因多态性与DEACMP的遗传易感性。DEACMP患者入院后每3 d评估一次《长谷川痴呆量表》（HDS）和《日常生活能力量表》（ADL），评估患者智力和生活能力受损程度。基因型分布是否符合Hardy-Weinderg平衡定律用拟合优度χ 2检验，两组患者基因关联性分析采用2×2四格表或2×3列联表χ 2检验，共显性遗传模式用2×3列联表χ 2检验。 结果:rs3790088位点包含226例DEACMP患者和414例ACMP患者，rs4247109位点包含234例DEACMP患者和428例ACMP患者。DEACMP和ACMP患者各基因型Hardy-Weinberg平衡检验差异无统计学意义（ P>0.05）。DEACMP与ACMP患者rs3790088和rs4247109位点基因型及等位基因频率分布差异均无统计学意义（ P>0.05）。按性别分组后，DEACMP与ACMP患者rs3790088和rs4247109位点基因型及等位基因频率分布差异均无统计学意义（ P>0.05）。三种遗传模式（共显性遗传、显性遗传、隐性遗传）下rs3790088和rs4247109位点基因型与DEACMP发病无关联（ P>0.05）。 结论:WWP2基因的2个单核苷酸多态性位点（rs3790088、rs4247109）和DEACMP的发病尚无法确定存在遗传相关性。

目的 探讨微小RNA-497-5p(miR-497-5p)是否通过靶向含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)调控人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖和凋亡.方法 实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)测定瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)和正常皮肤成纤维细胞(NFB)中miR-497-5p、WWP1 mRNA和蛋白表达.TargetScan预测miR-497-5p和WWP1的靶向关系,双荧光素酶报告和Western blot进一步验证.构建miR-497-5p过表达或抑制WWP1表达的细胞,Western blot检测WWP1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.共转染miR-497-5p和pcDNA-WWP1,观察WWP1过表达对miR-497-5p过表达诱导的KFB细胞增殖和凋亡的影响.结果与NFB相比,KFB内miR-497-5p表达量明显下调(P<0.05),WWP1 mRNA和蛋白表达量显著上调(P<0.05).miR-497-5p靶向调控WWP1的表达.miR-497-5p过表达明显降低KFB 48h、72h的细胞活性、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达,提高细胞凋亡率、p21、Bax蛋白水平(P<0.05),与抑制WWP1表达结果相同.WWP1过表达逆转了miR-497-5p过表达对KFB增殖、WWP1、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达的抑制作用,以及对细胞凋亡、p21、Bax蛋白表达的促进作用.结论 过表达 miR-497-5p 通过靶向调控 WWP1 抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,并诱导其凋亡.

目的 探讨含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)调控p21稳定性的潜在作用机制.方法 通过免疫共沉淀及Western blotting检测HEK 293T细胞中WWP2与p21的结合情况.用蛋白酶体抑制剂(MG132)和放线菌酮(CHX)处理过表达或敲减WWP2 HEK 293T细胞0、4、8 h,通过Western blotting检测p21的表达情况.结果 WWP2与p21间存在结合.过表达WWP2的293T细胞中,p21的表达水平明显降低,且随WWP2表达量增加逐渐降低.敲减WWP2的293T细胞中,p21表达水平增加.随着CHX作用时间延长,对照组和实验组的p21表达水平均逐渐下降.过表达组p21半衰期较对照组缩短;敲减组p21半衰期较对照组延长.随着MG132作用时间延长,对照组和实验组p21表达水平均逐渐上升.空载组较过表达组、敲减组较对照组p21积累均更显著.结论 E3泛素连接酶WWP2可与p21结合,并通过蛋白酶体途径降解p21.

WWP2是编码Nedd4家族E3连接酶的成员之一,含有E3泛素蛋白连接酶2的WW结构域,其可与目标蛋白结合从而发挥相应作用.随着近年来对WWP2研究的增多,发现WWP2不仅与干细胞自我更新及免疫系统相关,也在多种疾病尤其在肿瘤中的功能作用日渐清晰.WWP2可作为一种肿瘤进展和预后的生物标志物,为开发新的抗肿瘤药物提供潜在的治疗靶点.这篇综述主要阐明了WWP2的结构和相关功能,以及在各种疾病中所发挥的作用和扮演的角色.