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周期型马来丝虫复合表位基因的构建及在真核细胞中的表达
编辑人员丨1天前
目的:构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂/3-磷酸甘油醛脱氢酶复合表位基因（CPI502/GAPDH720）真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720，并观察其在人宫颈癌细胞（Hela细胞）中的蛋白表达。方法:根据T细胞表位预测的基因序列设计引物，以质粒pGEM-T-CPI621为模版，利用反转录PCR（RT-PCR）扩增目的基因片段，将该片段克隆至原核表达质粒pET-28a（+）中，构建原核表达质粒pET28a（+）-BmCPI502。根据软件设计合适引物，RT-PCR分别扩增BmCPI502基因和BmGAPDH720基因，pcDNA3.1（+）、BmCPI502、BmGAPDH720分别进行双酶切后进行连接，构建复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720。将复合表位基因重组质粒转染至Hela细胞后，进行RT-PCR验证，获得与预期相符目的条带；将表达产物利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行检测。结果:获得了原核表达重组质粒pET28a（+）-BmCPI502，经酶切鉴定得到502 bp特异性片段，与预期值符合；成功构建了复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720，酶切鉴定所产生的片段大小与预期符合；复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720转染Hela细胞后得到稳定表达，SDS-PAGE鉴定分析显示重组蛋白相对分子质量（ Mr × 10 3）约为50。 结论:成功构建了周期型马来丝虫复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720，并在真核细胞中获得相应的重组蛋白，为进一步研究重组蛋白纯化和测定其生物学活性奠定了基础。
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编辑人员丨1天前
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周期型马来丝虫经皮下人工感染长爪沙鼠的实验观察（摘要）
编辑人员丨2023/8/6
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编辑人员丨2023/8/6
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志愿者感染周期型马来丝虫的临床观察
编辑人员丨2023/8/6
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编辑人员丨2023/8/6
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长爪沙鼠体内周期型马来丝虫微丝蚴周期性观察
编辑人员丨2023/8/6
我们自1973年进行长爪沙鼠－马来丝虫实验模型工作以来，至今经皮下注射接种的长爪沙鼠微丝蚴血症率最高达93％；经腹腔注射接种出现微丝蚴腹腔液症的最高达86％，微丝蚴腹腔液症沙鼠合并出现微丝蚴血症的达47％。为了解微丝蚴血症鼠外周血内微丝蚴出现的规律，以供防治丝虫病的实验研究之用，我们进行了沙鼠眶窦血内微丝蚴周期性的观察。
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编辑人员丨2023/8/6
