目的 探讨四味土木香散(siwei tumuxiang powder,STP)对机械牵张诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大模型的保护作用及作用机制.方法 制备STP含药血清及细胞肥大模型,并筛选STP含药血清最适剂量与作用时间;检测H9c2心肌细胞中心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、miR-34a-5p 及 Notch 1 等因子的表达,验证STP是否通过调控miR-34a-5p/Notch1通路对H9c2心肌细胞起保护作用.结果 STP含药血清干预模型细胞最适剂量为低剂量(0.972g/kg),作用时间为24h.STP降低了模型细胞中ANP、BNP、miR-34a-5p的表达(P＜0.05).转染miR-34a-5p mimic逆转了 STP降低ANP、BNP表达的作用(P＜0.05).用siRNA法敲低Notch1逆转了 STP降低ANP、BNP的表达(P＜0.05).Notch1 为 miR-34a-5p 直接靶基因,miR-34a-5p 降低了 Notch1 的表达(P＜0.05).STP 干预后,Notch1、NICD1、Hes1蛋白表达降低(P＜0.05);转染miR-34a-5p mimic逆转了 STP降低Notch1、NICD1、Hes1蛋白表达的作用(P＜0.05).结论 STP可能是通过影响miR-34a-5p表达负调控Notch1信号通路对机械牵张诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大发挥保护作用.

目的 探究高血压性心肌肥厚(hypertensive cardiac hypertrophy,HCH)发病机制与四味土木香散(siwei tumuxiang powder,STP)的治疗机制.方法 采用腹主动脉缩窄术(abdominal aortic coarctation surgery,AAC)诱导大鼠模型高血压性心肌肥厚,将SD大鼠按随机数表法分为假手术(Sham)组、模型(Mod)组、四味土木香散(STP)组、阳性药卡托普利(Cap)组,12周后对各组大鼠进行尾动脉压检测、超声心动图检测、HE、Masson染色和代谢组学检测.结果 与Sham组相比,Mod组大鼠血压升高、心室壁增厚、心功能减弱,心肌组织出现病理性损伤和纤维化,在给予STP后有所缓解,且STP药效与阳性药Cap之间无明显差异;代谢组学结果显示,初步鉴定有12种代谢标志物与HCH的发生发展和STP的治疗相关;KEGG分析结果显示HCH的发病与Fc epsilon RI信号通路、组氨酸代谢、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、血清素能突触、脂肪酸生物合成这5种代谢通路有有关,且在STP干预后可通过不饱和脂肪酸的生物合成、脂肪酸生物合成、胆汁分泌这3种代谢通路治疗HCH.结论 HCH的发病机制可能与脂肪酸代谢和氨基酸代谢相关,且STP可以通过影响脂肪酸代谢与胆汁分泌治疗HCH.

目的 探讨四味土木香散(STP)对压力超负荷性心肌肥厚大鼠的保护作用及机制.方法 第一部分:将Wistar大鼠按随机数表法分为假手术(sham)组,模型(Mod)组,Mod+STP高、中、低剂量(STP-H、STP-M、STP-L)组,Mod+阳性药卡托普利(CAP)组,检测血压、超声心动图、HE及Masson染色.第二部分:将Wistar大鼠按随机数表法分为sham组、Mod组、Mod+STP-H组、Mod+STP-H+miR-34a-5p激动剂(agomir)组、Mod+STP-H+Notch1抑制剂(DAPT)组,观察HE及Masson染色,RT-qPCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、核因子κB(NF-κB)、miR-34a-5p表达量,Western Blot检测Notch1、NICD1、hes1蛋白表达量.结果 第一部分:STP各剂量组均对压力超负荷心肌肥厚具有改善作用,其中高剂量治疗效果最佳.与Mod组比,STP-H组在8周、10周时血压降低,心功能提高,细胞短轴直径及心肌纤维化降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).第二部分:与Mod组比,STP-H组TNF-α、IL-6、NF-κB、miR-34a-5p表达水平降低,Notch1、NICDI、hes1表达量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与STP-H组相比,agomir组、DAPT组细胞短轴直径及心肌纤维化增加,TNF-α、IL-6、NF-κB、miR-34a-5p表达水平升高,Notch1、NICDI、hes1表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 STP可抑制miR-34a-5p的表达,同时靶向激活Notch1通路而改善压力超负荷性心肌肥厚,发挥心肌保护作用.

目的:运用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS/MS),快速表征和识别四味土木香散中的成分.方法:采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相5 mmol·L-1乙酸铵+0.1％甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱.依据ChemSpider和ChemicalBook数据库检索及化学成分分离与结构鉴定等方法,建立组方药材化学成分的分子式、相对分子质量、结构式以及二级质谱信息的本地数据库;建立HPLC-Q-Exactive-MS/MS分析方法,结合Xcalibur 3.0软件、对照品比对及裂解规律研究,对四味土木香散中的化学成分进行快速的结构鉴定.结果:利用HPLC-Q-Exactive-MS/MS技术从四味土木香散中共鉴定了110个成分,包括来源于土木香的倍半萜内脂3个,来源于苦参的生物碱16个及异戊二烯黄酮38个,来源于悬钩子木的三萜皂苷12个、儿茶素类1个及黄酮苷类4个,并总结了主要类型化合物的质谱裂解规律,其中31个成分为首次报道质谱信息.结论:该研究可系统、准确、快速鉴定四味土木香散中目标化合物及非目标化合物,为该复方的体内分析以及药代动力学研究奠定基础.

目的 建立四味土木香散挥发油的β-环糊精包合工艺.方法 饱和水溶液法制备包合物.以β-环糊精与挥发油比例、包合温度、搅拌时间为影响因素,包合率、收率、包封率为评价指标,正交实验优化包合工艺.TLC、差示扫描量热(DSC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、扫描电镜(SEM)进行表征.考察包合物在强光[(4 500±500)lx]、高湿(RH 90％,25℃)、高温(60℃)条件下的稳定性.结果 最佳条件为β-环糊精与挥发油比例4∶1,包合温度50℃,搅拌时间2h,包合率、收率、包封率分别为74.12％、83.12％、78.16％.挥发油包入β-环糊精空腔中,表明包合物制备成功.包合物在上述条件下的稳定性良好.结论 该方法稳定可行,可用于包合四味土木香散挥发油.