目的:观察不同浓度密蒙花滴眼液对去势雄兔泪腺细胞炎症因子TNF-α、IL-1β的影响,探讨不同浓度密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼症模型的疗效.方法:将密蒙花原药材制备成低、中、高3种浓度滴眼液.将42只健康成年新西兰长耳白兔(雄性),随机分为A:空白组;B:模型组;C:低浓度密蒙花滴眼液组;D:中浓度密蒙花滴眼液组;E:高浓度密蒙花滴眼液组;F:安慰剂滴眼液组;G:睾酮组等7组,每组6只.除A组外其余6组实验用兔行双侧睾丸及附睾切除术.从术后第3天开始C、D、E、F组分别予相应滴眼液滴双眼.各组实验用兔,分别于术前和术后第4wk各进行一次Schirmer I试验(SIT)和泪膜破裂时间(BUT)测定.采用免疫组化法对泪腺细胞炎症因子TNF-α和IL-1β的表达进行检测.结果:1)SIT与BUT值比较:术后C组与D、E、G组比较,有统计学意义(P<0.01);D、E、G组间相比较,无统计学意义(P>0.05);2)术后各组炎症因子TNF-α、IL-1β比较:C组与D、E、G组比较,有统计学意义(P<0.05);D、E、G组间相比较,无统计学意义(P>0.05).结论:1)密蒙花滴眼液具有与雄激素相似的抑制细胞炎症因子表达的作用,但其作用弱于雄激素;2)中、高浓度密蒙花滴眼液对TNF-α和IL-1β的抑制作用要强于低浓度密蒙花滴眼液,但中、高浓度密蒙花滴眼液的抑制作用差别不明显.

目的 观察不同浓度密蒙花滴眼液对雄兔干眼泪腺组织中炎性细胞因子:细胞间黏附因子-1(intercellular cell adhe-sion molecule-1,ICAM-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)表达的影响,从而探讨其疗效.方法 将36只成年新西兰雄兔随机分为空白组(A),模型组(B),密蒙花滴眼液低(C)、中(D)、高(E)浓度组,睾酮组(F)组,每组6只.除A组外,其余各组均切除双侧睾丸及附睾,造模成功后,C、D、E组开始双眼滴用滴眼液,F组注射丙酸睾酮注射液.术前及治疗后第4周各组雄兔均测定1次泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)和泪液分泌功能(SchirmerⅠtest,SIT).治疗后第4周处死实验用兔,并摘取其双侧泪腺,采用免疫组化的方法检测ICAM-1、IL-6与IL-17的表达.结果 (1)SIT和BUT:B组自身前后对比,治疗后第4周:B组与C、D、E、F组相比,E组与C、D组相比,F组与C、D、E组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(2)ICAM-1、IL-6与IL-17电镜下表达的结果:A、F组未见明显表达;B组可以见到大量棕黄色颗粒存在细胞浆与细胞膜中;C、D、E组可见散在的表达;(3)治疗后第4周,组间ICAM-1、IL-6与IL-17的表达相比较:B组与其余各组相比,E组与C、D组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 密蒙花滴眼液具有拟雄激素的作用,可以抑制炎性细胞因子ICAM-1、IL-6与IL-17的表达,疗效弱于雄激素.不同浓度的密蒙花滴眼液中,高浓度的疗效最佳.

目的 通过建立去势兔干眼模型,观察密蒙花滴眼液对其泪腺细胞凋亡相关因子Caspase-3、Caspase名的干预作用.方法 将35只新西兰白兔随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、0.3、0.5、1.0 mg/mL、1.5、3.0 mg/mL密蒙花滴眼液(C、D、E、F、G组).A、B组不予处理,C、D、E、F、G组分别予以相应密蒙花滴眼液局部滴眼,3次/日.疗程为4周.造模前、用药前及用药后检测各组基础泪液分泌试验(Schirmer's test Ⅰ,SIT)水平,免疫组化检测各组泪腺组织中Caspase-3、Caspase名的表达情况,Real-time PCR法检测各组泪腺组织中Caspase-3、Caspase-8 mRNA的相对表达情况.结果 与A比较,用药前及用药后B组SIT值降低(P＜0.01);与B组比较,各治疗组用药后SIT值升高(P＜0.01);各治疗组用药后与本组用药前比较,SIT值升高(P＜0.01).与A组比较,B组Caspase-3、Caspase-8表达及mRNA相对表达量升高(P＜0.01).与B组比较,D、F、G组Caspase-3及C、D、E、F、G组Caspase-8表达降低(P＜0.01);C、D、E、F、G组Caspase-3及D、E、F、G组Caspase-8 mRNA相对表达量降低(P＜0.01).与C组比较,Caspase-3表达降低(P＜0.05);D、E、F、G组Caspase-8 mRNA相对表达量降低(P＜0.01).除D与G组比较外,其他各浓度组间Caspase-3 mRNA相对表达量比较均有统计学意义(P＜0.01).结论 密蒙花滴眼液可以通过下调去势兔干眼模型泪腺细胞凋亡因子Caspase-3和Caspase-8的表达,达到维持泪腺基础分泌量和保护泪腺的作用.

目的:观察不同浓度的密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼结膜炎性因子IL-1β、黏蛋白5AC(MUC5AC)及P38MAPK表达的影响,从而探讨密蒙花滴眼液对干眼的疗效.方法:将36只雄兔随机分为:空白组、模型组、密蒙花滴眼液低浓度组(1mg/mL)、中浓度组(1.5mg/mL)、高浓度组(3mg/mL)、睾酮组.除空白组外各组均行睾丸及附睾切除建立干眼动物模型,造模成功后,空白组和模型组不予以处理,密蒙花滴眼液低浓度组(1mg/mL)、中浓度组(1.5mg/mL)、高浓度组(3mg/mL)给予密蒙花不同浓度滴眼液,3次/d,睾酮组按0.5mL/kg剂量在大腿肌肉处注射丙酸睾酮,每3d 1次,各组分别于造模前和用药4wk后在全身麻醉下检测荧光素染色、SchirmerⅠ试验(SⅠt)和泪膜破裂时间(BUT).用药4wk后处死兔子,取其双眼球结膜组织,采用免疫组织化学染色法检测结膜中IL-1β、MUC5AC、P38MAPK的表达.结果:密蒙花滴眼液低浓度组、中浓度组、高浓度组用药4wk后,SⅠt值明显高于模型组,BUT值明显长于模型组,角膜荧光素染色阳性较模型组有明显改善(均P<0.01).密蒙花滴眼液低浓度组、中浓度组、高浓度组结膜IL-1β、P38MAPK的阳性表达低于模型组,MUC5AC的表达高于模型组(P<0.01),密蒙花滴眼液高浓度组优于低浓度、中浓度组.结论:密蒙花滴眼液具有类雄激素效果,对于去势雄兔干眼可以下调干眼结膜组织中IL-1β、P38MAPK的表达,增加MUC5AC的表达,从而减少干眼结膜组织的炎症浸润,维持泪膜稳定性,但其作用弱于雄激素.密蒙花滴眼液中、高浓度组对于干眼治疗作用强于低浓度组,高浓度组优于中浓度组.