为探究川藏香茶菜庚素(Pseurata H)对巨噬细胞炎症模型的抗炎作用及分子机制,利用 LPS 刺激RAW264.7 细胞建立体外炎症模型,并分别以浓度为 10、20 和 40 μmol/L的Pseurata H干预该细胞模型.利用CCK-8法检测Pseurata H对细胞增殖活性的影响;Griess法和ELISA试剂盒分别检测细胞上清液中 NO、IL-6 和TNF-α的含量;Western Blot检测COX-2、iNOS蛋白、p-NF-κB和p-ERK蛋白的表达变化;以RT-qPCR法检测药物干预前后细胞中 iNOS、TNF-α、IL-6 和 IL-1β 的 mRNA 基因表达变化.结果表明:浓度为 10、20 和 40 μmol/L 的Pseurata H对细胞没有毒性,不同浓度的Pseurata H对LPS诱导RAW264.7 细胞炎症模型中NO、IL-6 和TNF-α分泌具有很好的下调作用,对iNOS、COX-2、NF-κB、p-NF-κB、ERK和p-ERK蛋白的表达具有良好的抑制作用,且具有浓度效应.Pseurata H具有明显的抗炎作用,其作用机制可能是通过抑制 NF-κB/MAPK 信号通路而发挥抗炎作用.

目的 探究中草药提取物川藏香茶菜丙素(Iso C)对NLRP3炎症小体活化的影响以及对脂多糖(LPS)诱导的小鼠脓毒性休克是否具有缓解作用.方法 体外实验:利用LPS预刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)以及人急性单核细胞白血病(THP-1)细胞系.通过加入多种NLRP3炎症小体激动剂活化经典NLRP3炎症小体.利用胞内转染LPS活化非经典NLRP3炎症小体.利用转染聚脱氧腺苷酸(poly A:T)活化AIM2炎症小体.通过蛋白质印迹法(Western blot)检测NLRP3炎症小体活化产物caspase-1的剪切,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测上清中NLRP3依赖与非依赖的多种促炎细胞因子分泌情况.利用电感耦合等离子体发射光谱仪检测细胞内钾离子含量.体内实验:挑选SPF级C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组(Control组),脓毒性休克组(LPS组),Iso C治疗组(LPS+Iso C组).ELISA分析小鼠血清和腹腔灌洗液中促炎细胞因子白细胞介素1β(1L-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的分泌情况,并观察注射LPS后小鼠48h内生存时间,绘制小鼠生存曲线.结果 体外实验表明,在BMDM细胞中Iso C以剂量依赖的方式抑制多种激动剂引起的经典NLRP3炎症小体活化以及胞内转染LPS诱导非经典NLRP3炎症小体的活化(P<0.05),Iso C对NLRP3炎症小体非依赖的促炎细胞因子TNF-α和IL-6的分泌无显著影响(P>0.05).Iso C对AIM2炎症小体的活化无显著影响(P>0.05).Iso C不影响NLRP3炎症小体活化上游信号钾离子外流(P>0.05).在人THP-1细胞中Iso C抑制NLRP3炎症小体活化(P<0.05).体内实验结果表明,与脓毒性休克组相比,Iso C治疗组小鼠血清和腹腔灌洗液中IL-1β的水平显著下降(P<0.05)且生存时间更长(P<0.05).结论 中草药来源的Iso C可以特异性抑制NLRP3炎症小体的活化从而缓解小鼠脓毒性休克,是潜在的治疗炎症性疾病的小分子化合物.

目的 研究鄂西地区产冬凌草Isodon rubescens的化学成分.方法 采用多种柱色谱法进行分离纯化,并经波谱分析鉴定化合物的结构.结果 从湖北建始县产冬凌草的乙醇浸提物中,分离鉴定出6个对映-贝壳杉烷二萜,分别为3β,6β,14β,15β-四乙酰氧基-20-醛-对映-贝壳杉-16-烯-7-酮(1)、川藏香茶菜素O(2)、enmenin(3)、enmenin monoacetate(4)、乙酰化毛萼晶F(5)、荛花香茶菜乙素(6).结论 化合物1为1个新化合物,命名为建始冬凌草素J,为香茶菜属植物极为少见的一类型对映-贝壳杉二萜,结构特点为C-20氧化为醛基而未与C-3、C-7、C-11形成常见的环氧桥结构.化合物2和4为首次从该植物中分离得到.