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钩藤碱对甲基苯丙胺依赖SH-SY5Y细胞模型及miR-375-3p/Elavl4表达的影响
编辑人员丨2024/3/2
目的 探讨钩藤碱对甲基苯丙胺依赖人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)模型及微小RNA-375-3p(miR-375-3p)/胚胎致死异常视觉-样4蛋白(Elav14)表达的影响.方法 用最大安全剂量诱导法建立甲基苯丙胺依赖细胞模型.将细胞分成正常组(完全培养液)、对照组(完全培养液+400 μmol·L-1钩藤碱孵育48 h)、模型组(完全培养液+100 μmol·L-1甲基苯丙胺孵育48 h)、实验组(完全培养液+400 μmol·L-1的钩藤碱孵育15 min后,再加入100μmol·L-1甲基苯丙胺孵育48 h).以酶联免疫吸附法检测细胞环腺苷酸(cAMP)、5-羟色胺(5-HT)水平;以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞miR-375-3p表达情况;以蛋白质印迹法检测Elavl4蛋白表达情况.结果 正常组、对照组、模型组和实验组cAMP表达水平分别为(6.33±0.93)、(6.57±1.12)、(10.89±1.03)和(7.81±1.32)pmol·mg-1;5-HT分别为(682.46±17.32)、(690.31±15.09)、(510.11±27.67)和(649.99±21.42)pg·mL-1;miR-375-3p 表达水平分别为 1.00±0.13、1.13±0.24、3.48±0.18 和 1.58±0.19;Elavl4 表达水平分别为 1.00±0.05、0.89±0.10、0.50±0.09和0.90±0.11.模型组上述指标与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);实验组上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 本研究建立甲基苯丙胺依赖细胞模型,同时发现钩藤碱可能调控miR-375-3p/Elavl4表达拮抗甲基苯丙胺成瘾.
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编辑人员丨2024/3/2