子痫前期是一种妊娠特异性疾病,临床以妊娠20周后出现高血压、蛋白尿等症状为主要特征,子痫前期严重危害母婴生命健康,是导致孕产妇和围产儿死亡率增高的重要因素之一.近年来,采用中药汤剂、活血化瘀类中药注射液等治疗子痫前期的研究增多,取得了良好的临床疗效.现代药理学研究发现,葛根素、天麻素、钩藤碱、人参皂苷、白术内酯、丹参素、川芎嗪、黄芪甲苷等成分能够促进滋养细胞增殖和侵袭,改善实验动物妊娠过程,对子痫前期的治疗起到积极作用.梳理相关文献,通过结合临床疗效与机制研究,分析中药临床用药合理性,为中药防治子痫前期的临床应用与开发提供参考.

目的:观察钩藤碱固体脂质纳米粒(rhynchophylline solid lipid nanoparticles, Rhy-SLN)对小鼠气道平滑肌细胞增殖及TGF-β1/ERK/P38信号通路的影响。方法:小鼠气道平滑肌细胞体外分离培养，按随机数字表法分为空白组、TGF-β1组、Rhy-SLN组、抑制剂组。除空白组外，其余各组气道平滑肌细胞以0.2% BSA/DMEM无血清培养基培养，使细胞处于增殖停滞状态。TGF-β1组加入5 μg/L的TGF-β1进行干预；Rhy-SLN组加入5 μg/L的TGF-β1及10 μmol/L的Rhy-SLN进行干预；抑制剂组加入5 μg/L的TGF-β1及10 μmol/L SB431542进行干预。干预后24 h，采用MTT法检测小鼠气道平滑肌细胞增殖情况；采用Western blot法检测小鼠气道平滑肌细胞的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、ERK1/2、p-ERK1/2、p38、p-p38蛋白表达水平。结果:与TGF-β1组比较，Rhy-SLN组和抑制剂组吸光度值[(1.352±0.14)、(1.139±0.12)比(1.780±0.18)]降低( P<0.05)，PCNA蛋白[(0.25±0.03)、(0.24±0.02)比(0.49±0.05)]、p-ERK1/2[(1.01±0.11)、(0.97±0.09)比(1.86±0.17)]、p-p38蛋白[(0.26±0.03)、(0.22±0.02)比(0.41±0.04)]表达降低( P<0.05)。 结论:Rhy-SLN可抑制小鼠气道平滑肌细胞增殖，其机制可能与调节TGF-β1/ERK1/2信号通路有关。

目的:研究异钩藤碱（isorhynchophylline, IRN）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ）诱导的心肌细胞肥大的作用及机制。方法:H9c2细胞与Ang Ⅱ、不同浓度的IRN（0、5、10、25、50 μmol/L）共培养，检测细胞表面积及心肌肥大标志物心房利钠肽（atrial natriuretic peptide, ANP）、脑利钠肽（brain natriuretic peptide, BNP）、β-肌球蛋白重链（β-myosin heavy chain, β-MHC）mRNA水平来阐述IRN对心肌肥厚的作用及最有效浓度。H9c2细胞与Ang Ⅱ和IRN（25 μmol/L）在不同时间（0 h、6 h、12 h、24 h）共培养，研究抑制的最有效时间。检测信号通路的磷酸化水平，然后使用IRN和Akt抑制剂MK2206对信号通路磷酸化水平的影响来进一步研究潜在的作用机制。结果:与control组相比，Ang Ⅱ组H9c2细胞表面积显著增加（均 P<0.05），心肌肥大标志物ANP、BNP和β-MHC mRNA表达显著增加（均 P<0.05）；不同浓度的IRN（5、10、25、50 μmol/L）预处理均可抑制Ang Ⅱ引起的细胞表面积增加（均 P<0.05），尤其是在浓度为25 μmol/L时（ P<0.01）；IRN可以时间依赖性的抑制Ang Ⅱ诱导的ANP、BNP、β-MHC mRNA激活（均 P<0.05）。Ang Ⅱ引起Akt、GSK3β、mTOR、FOXO3a的磷酸化水平升高；IRN可以阻断Ang Ⅱ诱导的Akt信号通路磷酸化。 结论:IRN通过抑制Akt信号通路减轻Ang Ⅱ诱导的心肌细胞肥大。

阿尔茨海默病(AD)是一种常发于老年人的神经退行性疾病,发病机制复杂,且治疗药物有限,给社会造成了巨大负担.钩藤碱是从中药钩藤中分离得到的一种吲哚类生物碱,具有显著的神经药理作用,可通过多种机制发挥抗AD治疗作用.本文首先对AD可能的发病机制进行总结,深化对AD发病机制的认识,为AD药物开发提供潜在的治疗靶点;同时,也对钩藤碱的神经药理作用进行综述,为以钩藤碱为先导化合物的抗AD药物开发提供新思路.

目的 探讨异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及相应机制.方法 将144只SD大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、急性脑梗死组、异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组、异钩藤碱高剂量+干扰素基因刺激蛋白(STING)激动剂(ADU-S100)组,每组24只.除假手术组外,其他各组大鼠均采用线栓闭塞大脑中动脉法构建急性脑梗死大鼠模型,假手术组仅游离右侧颈外动脉、颈总动脉和颈内动脉,不做插入线栓处理.建模成功后立即给药,异钩藤碱低剂量组和异钩藤碱高剂量组大鼠分别灌胃5mg/kg、20mg/kg异钩藤碱,且均需腹腔注射等量的等渗盐水;尼莫地平组大鼠需灌胃30 mg/kg尼莫地平,且还需腹腔注射等量的等渗盐水;异钩藤碱高剂量+ADU-S100组大鼠需灌胃20 mg/kg异钩藤碱且腹腔注射20 mg/kg ADU-S100;假手术组、急性脑梗死组大鼠均需灌胃10ml/kg与腹腔注射10ml/kg的等渗盐水.给药1次/d,持续2周.末次给药处理24 h后,采用Zela-Longa法对所有大鼠进行神经功能评分,并进行Morris水迷宫实验,记录大鼠的逃避潜伏期及原平台象限停留次数.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;检测各组大鼠脑组织含水量;采用2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定各组大鼠脑梗死体积;采用伊文思蓝检测各组大鼠血-脑屏障通透性;采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠脑组织中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)信使核糖核酸(mRNA)表达;采用免疫印迹检测大鼠脑组织中STING、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)蛋白表达,并进行组间比较.结果 (1)与假手术组相比,急性脑梗死组末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.96±0.32)分比0分]、脑组织含水量[(86.9±3.2)％比(71.8±3.1)％]、血清 TNF-α[(86.7±3.5)ng/L 比(35.6±1.7)ng/L]、IL-6[(167.8±6.1)ng/L 比(50.2±2.2)ng/L]、脑梗死体积[(28.6±1.3)mm3 比 0 mm3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.57±0.13)g/L 比(0.96±0.08)g/L]及 STING[(1.83±0.16)比(0.86±0.08)]、p-TBK1[(0.89±0.07)比(0.41±0.03)]、p-IRF3[(0.67±0.05)比(0.13±0.01)]蛋白表达均升高,脑组织中 ZO-1 mRNA[(0.45±0.04)比(1.00±0.00)occludin mRNA[(0.23±0.02)比(1.00±0.00)]表达均降低,逃避潜伏期延长[(33.6±1.6)s比(12.3±0.5)s],原平台象限停留次数减少[(5.9±0.2)次比(15.7±0.4)次],组间差异均有统计学意义(均P＜0.05).(2)与急性脑梗死组比较,异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组大鼠末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.37±0.21)、(1.14±0.17)、(1.18±0.13)分比(2.96±0.32)分]、脑组织含水量[(81.8±3.0)％、(74.9±3.0)％、(74.3±2.9)％比(86.9±3.2)％]、血清 TNF-α[(71.1±1.4)、(43.4±2.0)、(41.5±1.9)ng/L 比(86.7±3.5)ng/L]、IL-6[(129.8±5.4)、(81.2±3.8)、(80.0±3.6)ng/L 比(167.8±6.1)ng/L]、脑梗死体积[(21.7±1.0)、(10.5±0.5)、(10.7±0.5)mm3 比(28.6±1.3)mm3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.39±0.12)、(1.16±0.10)、(1.18±0.19)g/L 比(1.57±0.13)g/L]及 STING[(1.50±0.14)、(1.02±0.11)、(1.01±0.09)比(1.83±0.16)]、p-TBK1[(0.75±0.05)、(0.54±0.04)、(0.52±0.05)比(0.89±0.07)]、p-IRF3[(0.51±0.05)、(0.25±0.02)、(0.27±0.02)比(0.67±0.05)]蛋白表达均降低,脑组织中 ZO-1 mRNA[(0.58±0.05)、(0.87±0.07)、(0.89±0.09)比(0.45±0.04)]、occludin mRNA[(0.36±0.03)、(0.71±0.06)、(0.69±0.05)比(0.23±0.02)]表达均升高,逃避潜伏期缩短[(28.6±1.0)、(16.5±0.7)、(16.4±0.7)s 比(33.6±1.6)s],原平台象限停留次数增加[(8.2±0.3)、(12.8±0.5)、(12.9±0.5)次比(5.9±0.2)次],组间差异均有统计学意义(均P＜0.05)o(3)与异钩藤碱高剂量组比较,异钩藤碱高剂量+ADU-S100组末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.12±0.14)分比(1.14±0.17)分]、脑组织含水量[(78.7±3.2)％比(74.9±3.0)％]、血清 TNF-α[(59.7±2.1)ng/L比(43.4±2.0)ng/L]、IL-6[(118.9±4.6)ng/L 比(81.2±3.8)ng/L]、脑梗死体积[(16.6±0.4)mm3比(10.5±0.5)mm3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.36±0.10)g/L 比(1.16±0.10)g/L]及STING[(1.37±0.12)比(1.02±0.11)]、p-TBK1[(0.67±0.05)比(0.54±0.04)]、p-IRF3[(0.39±0.03)比(0.25±0.02)]蛋白表达均升高,脑组织中 ZO-1 mRNA[(0.63±0.05)比(0.87±0.07)]、occludin mRNA[(0.46±0.05)比(0.71±0.06)]表达均降低,逃避潜伏期延长[(23.4±1.0)s比(16.5±0.7)s],原平台象限停留次数减少[(9.6±0.3)次比(12.8±0.5)次],组间差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 异钩藤碱可抑制急性脑梗死大鼠炎症、减少血-脑屏障损伤、降低脑水肿程度,改善认知障碍,其机制可能与抑制STING/TBK1/IRF3通路有关.

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路在动静脉内瘘术后内膜增生部位血管组织中的表达及意义,初步探索抑制MAPK/ERK通路对肌成纤维细胞自噬及增殖过程的影响.方法 选取 2023年 1月至 3月期间在海南医学院第一附属医院肾内科行动静脉内瘘重建术的患者6例,观察组收集动静脉内瘘重建术患者内膜增生严重部位的静脉血管组织,对照组为重建术中需结扎的侧支正常静脉组织.术前收集患者的一般资料,超声测量拟切取部位血管内径及内膜厚度,蛋白质印迹法检测血管组织中磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylation-extracellular regulat-ed protein kinases 1/2,p-ERK1/2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白相互作用蛋白 1(myosin-like B cell lymphoma/lewkmia-2 interacting protein1,Beclin-1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白的表达水平,并分析其与静脉内膜厚度的相关性.以肌成纤维细胞为研究对象,尿毒症血清培养,并予ERK1/2抑制剂去氢钩藤碱(Corynoxeine)干预,提取细胞总蛋白及RNA,蛋白质印迹法及实时定量PCR检测Beclin-1及PCNA的表达变化.结果 入组患者透析过程中均存在血流量不足,灰阶超声提示动静脉内瘘狭窄处静脉内膜明显增厚[(0.143±0.014)cm比(0.097±0.016)cm],血管腔内径为(0.166±0.028)cm.蛋白质印迹法结果显示,与正常侧支部位血管组织相比较,内膜严重增生部位血管组织中p-ERK1/2、Beclin-1、PCNA蛋白的表达明显增加,差异有统计学意义(均P＜0.05).观察组静脉内膜厚度与p-ERK1/2、Beclin-1、PCNA蛋白的表达水平均呈正相关(R2=0.929、0.702、0.789,均P＜0.05).在细胞模型上,与正常对照组相比较,尿毒症血清组自噬相关指标Beclin-1及增殖相关指标PCNA的表达明显升高,差异有统计学意义(均P＜0.05).而加入ERK特异性抑制剂 Corynoxeine后,Beclin-1及 PCNA的表达均明显减低,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 MAPK/ERK通路参与了动静脉内瘘内膜增生过程,促进细胞自噬及增殖过程,抑制该通路活性,或可减低细胞自噬及增殖,从而减轻内膜增生.

目的:探究柯诺辛碱(Cor)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠的治疗作用及其对线粒体自噬的影响.方法:将80只大鼠随机分为假手术组(n=10)、造模组(n=70).假手术组大鼠仅切开皮肤,不进行造模;造模组大鼠建立TBI大鼠模型.将58只造模成功大鼠随机分为模型组(n=12)、低剂量组(n=12)、中剂量组(n=12)、高剂量组(n=11)、抑制剂组(n=11).低、中、高剂量组大鼠分别予低[5 mg/(kg·d)]、中[10mg/(kg·d)]、高[20mg/(kg·d)]剂量柯诺辛碱治疗,抑制剂组大鼠予柯诺辛碱[20mg/(kg·d)]和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)[15mg/(kg·d)]治疗.给药14 d后,采用改良神经功能缺损评分法进行神经功能评分,采用Morris水迷宫实验评价认知功能,采用蔗糖偏好实验和旷场实验评价行为学.通过苏木素-伊红(HE)染色和TUNEL染色评价脑组织损伤和神经元凋亡.检测脑组织含水量、脑组织氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)]水平.采用Western blotting检测脑组织Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、LC3B、p62和Beclin-1蛋白表达.结果:低、中、高剂量组大鼠的神经功能评分、逃避潜伏期、脑组织含水量、TUNEL阳性率、MDA水平,以及Bax、cleaved Caspase-3、p62蛋白表达水平均低于模型组(P＜0.05);低、中、高剂量组大鼠穿越平台次数、蔗糖偏好率、水平活动分数、垂直活动分数,SOD、CAT和GSH-Px水平,以及Bcl-2、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平均高于模型组(P＜0.05).抑制剂组大鼠的神经功能评分、逃避潜伏期、脑组织含水量、TUNEL阳性率、MDA水平,以及Bax、cleaved Caspase-3、p62蛋白表达水平均高于高剂量组(P＜0.05);抑制剂组大鼠穿越平台次数、蔗糖偏好率、水平活动分数、垂直活动分数,SOD、CAT和GSH-Px水平,以及Bcl-2、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平均低于高剂量组(P＜0.05).结论:柯诺辛碱可有效减轻TBI后的继发性损伤,抑制神经元凋亡和氧化应激,其机制可能与激活线粒体自噬有关.

目的:建立清脑降压片一测多评测定方法,同时测定其中11种成分含量,并构建其OPLS-DA、EM-TOPSIS法综合质量评价模型.方法:以Agilent Extend C18柱为色谱柱,乙腈-0.1％甲酸为流动相,同时测定18批清脑降压片中β-蜕皮甾酮、异钩藤碱、钩藤碱、黄芩苷、汉黄苓苷、红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷C、橙黄决明素、丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA的含量,采用主成分分析(PCA)法和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)其整体质量进行综合评价.结果:11种成分分别在各自范围内线性关系良好(r≥0.999),精密度、重复性、稳定性、准确度良好(RSD＜2.0％).以汉黄芩苷为参照物,β-蜕皮甾酮、异钩藤碱、钩藤碱、黄芩苷、红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷、决明子苷C、橙黄决明素、丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA的平均相对校正因子分别为1.648 9、0.925 7、1.434 6、1.299 1、0.751 6、0.836 9、1.129 5、1.573 0、0.788 5 和 1.256 9;ESM 法与 QAMS 法测定结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05).PCA结果显示不同批次清脑降压片质量存在差异;OPLS-DA筛选出黄芩苷、汉黄芩苷、丹酚酸B、红镰霉素-6-0-β-龙胆二糖苷和β-蜕皮甾酮等5种引起清脑降压片质量差异的主要因素.结论:所建立的方法对清脑降压片的质量控制和整体评价具有重要意义.

目的 探讨天麻钩藤饮加减辅助帕利哌酮缓释片、重复经颅磁刺激(Repeat transcranial magnetic stimulation,rTMS)治疗肝郁痰结证精神分裂症患者的疗效及安全性.方法 选取2021年1月-2022年9月期间重庆市大足区人民医院收治的107例肝郁痰结证精神分裂症患者,采用随机数字表法分为对照组53例和试验组54例.对照组给予帕利哌酮缓释片、rTMS治疗,试验组在对照组基础上给予天麻钩藤饮加减.治疗4周后,观察比较两组患者临床疗效、安全性及治疗前后中医证候积分、阳性与阴性症状量表(Positive and Negative Syndrome,PANSS)评分、神经递质全脑相对功率[5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、谷氨酸(Glutamic acid,Glu)、乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)]水平.结果 (1)临床疗效:治疗后试验组总有效率94.44％(51/54)明显高于对照组80.77％(42/52),差异有统计学意义(P＜0.05).(2)中医证候积分:治疗后两组患者中医证候积分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且试验组中医证候积分明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)PANSS评分:治疗后两组患者精神症状PANSS评分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且试验组精神症状PANSS评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)神经递质:治疗后两组患者神经递质5-HT、Glu、Ach水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且试验组神经递质5-HT、Glu、Ach水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(5)安全性:治疗期间,两组患者均未发生严重或影响治疗不良反应,仅对照组出现1例刺痛感,调整频率后,刺痛感消失.结论 天麻钩藤饮加减辅助帕利哌酮缓释片、rTMS治疗肝郁痰结证精神分裂症效果显著,安全性高,有利于精神症状控制,且可能与调节神经递质表达有关.

目的 揭示轻度无症状钩虫感染对中老年人群肠道菌群与代谢的影响,为蠕虫-肠道菌群相互作用的研究提供参考.方法 以2022年10月-11月安徽省黄山市祁门县、黄山区乡村土源性线虫病监测点居民检出钩虫感染者(改良加藤厚涂片法钩虫虫卵阳性)为感染组,以钩虫虫卵阴性者为对照组.采集受检者新鲜粪样,提取肠道菌群DNA,扩增16S rRNA基因并测序.计算基于丰度的覆盖估计值(ACE)、PD-wholetree、Chao指数和Shannon指数等多样性指数,采用主坐标分析(PCoA)和不加权算术平均对方法(UPGMA)层次聚类分析的β多样性分析,比较感染组和对照组肠道菌群分布的差异,通过指示值分析筛选两组的指示性菌群.用甲醇-水萃取粪样中的代谢物,进行气相色谱-质谱(GC-MS)和液相色谱-质谱(LC-MS)双平台非靶向测序的代谢组学分析,用正交偏最小二乘方判别分析(OPLS-DA)建立筛选感染组与对照组差异代谢物的模型,制作火山图.根据P值、变量权重值和差异倍数筛选差异代谢产物.通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库检索差异代谢物的相关代谢通路,对差异代谢物进行富集分析.两个代谢物之间的线性相关程度采用Pearson相关分析.结果 研究对象共22人,其中感染组11人,对照组11人.感染组平均年龄72.2岁,均为轻度无症状带虫者;对照组平均年龄53.1岁.测序共获得1 755 649条16SrRNA序列,经序列质控和拼接后聚类为1 245条扩增序列变体.共鉴定出15个门22个纲58个目94个科191个属389个菌种.多样性指数分析结果显示,感染组肠道菌群多样性的ACE、PD-wholetree、Chao和 Shannon指数分别为 188.768、16.533、192.667 和 5.195,对照组分别为 167.829、15.294、157.371 和 4.898,两组间差异均无统计学意义(t=1.266、0.952、1.266、0.962,均P＞0.05).PcoA分析结果显示,感染组与对照组的肠道菌群有不同程度的重叠,但仍可分为两个不同的类群.UPGMA层次聚类分析结果显示,感染组和对照组均先在本组中聚类,再与另一组聚类,两组间仅有1例重叠.多元变量统计分析显示,感染组的优势菌群有7个,分别为普雷沃菌、普氏粪杆菌、变栖克雷伯菌、Parasutteralla、粪球菌、梭菌UCG-014和肠杆菌;对照组的优势菌仅1种,为普通拟杆菌.指示值分析结果显示,感染组指示值居前的菌群依次是普雷沃菌、克雷伯菌、拟杆菌、小杆菌、肠杆菌、粪球菌、UCG-002、粪杆菌;对照组则依次为变形菌门的Clade_Ⅰ a和Clade_Ⅲ、布劳特菌、另枝菌、Lachnoclostridium、嗜胆菌和苏黎世杆菌.建立的OPLS-DA模型能有效区分感染组和对照组的粪样代谢物,共鉴定出400个有差异粪样代谢物,其中156个显著上升,244个显著下降.KEGG富集分析结果显示,差异粪样代谢物显著富集在蛋白质的消化与吸收(P=0.000)、中心碳代谢(P=0.000)、矿物质吸收(P=0.000)、氨酰基-tRNA合成(P=0.000)、神经活性的配体-受体相互作用(P=0.003)等代谢通路上.粪样代谢物中delta 2-三己胺与(22E)-3β-经基-5α-胆甾-7,22-二烯酸(r=0.935,P＜0.01)等15对代谢物呈正相关关系,棕榈酰溶血磷脂酰乙醇胺与氨基戊酸甜菜碱(r=-0.500,P＜0.05)等9对代谢物呈负相关关系.结论 安徽省黄山市乡村中老年人群无症状钩虫感染可影响肠道菌群的组成和代谢,有利于营造有益菌的共生和定植环境.