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长链非编码RNA RP11-497E19.1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及机制实验研究
编辑人员丨2024/7/6
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-497E19.1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制.方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌HS-746T、BGC823、NCI-N87、SGC7901、AGS细胞和永生化胃上皮细胞GES-1中RP11-497E19.1表达水平,筛选表达最高的细胞进行后续实验.将HS-746T细胞分为si-NC组和si-RP11-497E19.1组,分别转染阴性对照寡核苷酸或RP11-497E19.1小干扰RNA.集落形成实验和Transwell实验分析转染HS-746T细胞的增殖、侵袭能力.双荧光素酶报告基因实验验证RP11-497E19.1与微小RNA(miR)-545-5p的靶向关系.RT-qPCR检测转染HS-746T细胞miR-545-5p的表达.Western blot检测转染HS-746T细胞间质表皮转化因子(c-Met)/胆绿素还原酶(BVR)/活化复制因子2(ATF-2)分子通路相关蛋白的表达.结果:与GES-1 细胞比较,HS-746T、BGC823、NCI-N87、SGC7901、AGS 细胞中 RP11-497E19.1 表达水平均上升,且HS-746T细胞 RP11-497E19.1 表达水平最高(均 P＜0.05).与 si-NC 组比较,si-RP11-497E19.1 组 HS-746T 细胞活力和细胞侵袭数降低(均P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验证实RP11-497E19.1靶向结合miR-545-5p,可负向调控 miR-545-5p 表达(P＜0.05).与 si-NC 组比较,si-RP11-497E19.1 组 HS-746T 细胞 c-Met/BVR/ATF-2 分子通路蛋白c-Met、BVR、p-ATF-2、锌指蛋白1(Snail1)、锌指蛋白2(Snail2)表达降低(均P＜0.05).结论:胃癌细胞中RP11-497E19.1呈高表达,沉默RP11-497E19.1通过靶向miR-545-5p/c-Met/BVR/ATF-2分子通路抑制胃癌HS-746T细胞的增殖及侵袭.
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编辑人员丨2024/7/6
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微小RNA-423-5p在脂肪间充质干细胞外泌体治疗老龄心力衰竭大鼠的作用及机制
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-423-5p在脂肪间充质干细胞(MSC)外泌体治疗老龄心力衰竭(HF)大鼠的作用机制.方法 选择18月龄SPF级大鼠38只,随机分为治疗组24只和模型组14只,2组腹腔注射异丙肾上腺素14 d,构造HF模型.治疗组给予心肌内注射脂肪MSC外泌体后饲养2周.用Western blot鉴定其纯度;通过苏木精-伊红染色和Masson染色检测心肌损伤及纤维化程度;通过TargetScan和miRDB数据库对miR-423-5p的靶基因进行预测,并预测信号通路;用实时荧光定量PCR检测miR-423-5p、磷脂酰肌醇3激酶(P13K)和蛋白激酶B(Akt)基因表达,Western blot检测P13K和Akt蛋白表达.结果 与模型组比较,治疗组miR-423-5p表达量明显降低(P<0.05).苏木精-伊红和Masson染色显示,治疗组心肌损伤和纤维化均较模型组明显改善.Tar-getScan和miRDB数据库预测显示,miR-423-5p的靶基因分别是141个和545个,Draw Venn分析显示,2个数据库共同靶基因为52个,占总量的8.2％.预测分析显示,通路富集出4条信号通路,排在首位的为PI3K-Akt信号通路.与模型组比较,治疗组PI3K、Akt基因和蛋白表达显著下降(P<0.05).结论 脂肪MSC外泌体能治疗老龄HF大鼠,其机制可能通过miR-423-5p调节PI3K-Akt信号通路的途径产生作用.
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编辑人员丨2023/8/5
