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抑制成纤维细胞生长因子受体2-卷曲螺旋结构域蛋白6融合基因表达在人胆管癌异种移植小鼠的作用
编辑人员丨1周前
目的:探究抑制成纤维细胞生长因子受体2-卷曲螺旋结构域蛋白6(FGFR2-CCDC6)表达在人胆管癌异种移植小鼠的抗肿瘤作用。方法:选择购自美国模式培养物集存库(ATCC)的人正常肝内胆管上皮细胞HIBEC和稳定转染FGFR2-CCDC6表达质粒的人肝内胆管癌细胞系Hucct1，分组为沉默FGFR2-CCDC6阴性对照(si-NC)组和沉默FGFR2-CCDC6(si-FGFR2-CCDC6)组。利用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测融合基因表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测FGFR2、成纤维细胞生长因子2(FGF2)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)蛋白表达。噻唑蓝(MTT)检测抑制FGFR2对细胞增殖的抑制作用。小鼠荷瘤模型探究抑制FGFR2表达对移植瘤体积的抑制作用。应用SPSS 21.0软件进行分析。结果:Hucct1中的FGFR2-CCDC6表达显著高于HIBEC(1.00±0.05比1.92±0.09， t＝15.480， P<0.05)；FGFR2、FGF2和p-ERK1/2的蛋白表达均明显高于HIBEC(FGFR2：0.54±0.03比1.29±0.05， t＝20.360，FGF2：1.32±0.06比1.87±0.09， t＝9.207，p-ERK1：0.84±0.05比1.54±0.07， t＝14.920，p-ERK2：1.42±0.06比2.11±0.11， t＝9.391，均 P<0.05)。si-FGFR2-CCDC6组的FGFR2-CCDC6的mRNA表达水平显著低于si-NC组(1.00±0.06比0.39±0.03， t＝19.540， P<0.05)；FGFR2、FGF2和p-ERK1/2的蛋白表达均显著低于si-NC组(FGFR2：1.32±0.05比0.77±0.04， t＝13.080，FGF2：1.93±0.08比1.23±0.07， t＝11.12，p-ERK1：1.48±0.07比0.73±0.06， t＝15.260，p-ERK2：2.03±0.12比1.44±0.07， t＝7.488，均 P<0.05)；转染后24 h和48 h细胞增殖率明显低于si-NC组(24 h：0.74±0.06比0.48±0.04， t＝6.245，48 h：0.97±0.07比0.65±0.06， t＝6.012，均 P<0.05)。小鼠荷瘤模型发现，si-FGFR2-CCDC6转染荷瘤组移植瘤体积明显小于si-NC参照组(598.00±50.00比476.00±39.00， F＝12.530， P<0.05)。 结论:抑制FGFR2-CCDC6融合基因表达可抑制FGF2/FGFR2/p-ERK1/2通路的激活，抑制细胞增殖和肿瘤生长，进而发挥抑癌作用。
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编辑人员丨1周前
