目的 研究明日叶查尔酮(Angelica keiskei chalcones,AC)对胰岛素抵抗L6细胞磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶-葡萄糖转运体4(PI3 K-Akt-GLUT4)信号通路的影响.方法 采用高浓度胰岛素诱导的胰岛素抵抗L6细胞,分别加入5、10、20μmol/L终浓度的明日叶查尔酮共同培养24 h,葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖含量,逆转录聚合酶链式反应方法检测细胞PI3K和Akt的mRNA表达水平,蛋白印迹法检测GLUT4和Akt的蛋白表达水平.结果 胰岛素抵抗组细胞培养液的葡萄糖含量显著高于空白对照组(P＜0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则降低(P＜0.05);中、高剂量AC组细胞培养液葡萄糖含量均低于胰岛素抵抗组(P＜0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则升高(P＜0.05).结论 明日叶查尔酮可上调L6细胞胰岛素抵抗模型PI3K-Akt-GLUT4信号通路的表达水平,增强其对葡萄糖的摄取利用,改善胰岛素抵抗.

明日叶属伞形科当归属,是一种多年生芹科植物.研究表明其含有多种生物活性物质,如查尔酮、香豆素类化合物、多种矿物质及氨基酸等,具有抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂、增强人体免疫力、润肠通便、改善睡眠等生理功效,极具开发和应用价值[1].但是,近年来对其的研究主要集中在提取物及药用价值方面,对其毒理学安全性方面的报道甚少,为此我们选用某研究所从明日叶根茎流出的汁液物质进行一系列加工处理制成的明日叶提取物作为研究对象,在前期进行急性毒性及遗传毒性研究的基础上,进行了亚慢性毒性研究,现报告如下.

目的 黄当归醇(xanthoangelol,XAG)是一种从日本草药明日叶中分离出来的查耳酮类物质,具有抗肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的特性,然而其抗肿瘤的内在分子基质仍未知,因此,在本研究中,我们旨在探究其抗肿瘤的靶标分子.方法 以人肝癌细胞系SMMC-7721和Huh7细胞为体外模型,使用细胞计数试剂盒(CCK-8)测量细胞活性,同时分别用Annexin V-FITC和碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色之后,使用流式细胞术对细胞凋亡和细胞周期分布进行定量.采用Western blotting和免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)分析HCC细胞和组织中靶标基因的相对蛋白表达水平.采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测mRNA水平的相对表达.蛋白质组学技术分析可能的靶标蛋白.使用HCC异种移植模型来证实XAG在体内的抗肿瘤作用.结果 XAG给药可以抑制HCC的细胞活性,并呈剂量依赖性诱导HCC的细胞凋亡和细胞周期停滞.此外,使用蛋白质组学分析显示了 XAG治疗组与对照组中10个基因(CC-NB1,CCNB2,CDC20,MCM2,MCM3,MCM4,MCM5,MCM6,MCM7和 PLK1)的表达存在差异.由TCGA数据库的数据表明,与癌旁组织相比,这10个基因在肿瘤组织中高表达,并且与HCC患者的存活时间呈负相关.体外和体内实验均表明XAG可以抑制HCC的生长并降低这10个基因的表达水平.结论 XAG可能有效地治疗HCC患者,并且还提供了 XAG在HCC治疗中的潜在靶标分子.

目的 建立一种明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的快速检测方法,测定不同产地、不同部位明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的含量.方法 采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA),硅胶色谱柱Thermo NO.30005-254630(4.6 mm×250 mm,5μm),0.1％甲酸溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱;流速1.0 ml/min,柱温40℃,检测波长370 nm,进样量5μl.结果 4-羟基德里辛在4.95～495μg/ml范围内线性关系良好,r2=0.9993;平均回收率为98.4％;最低检出限为2μg/g.黄当归醇在5.65～565μg/ml范围内线性关系良好,r2=0.99988;平均回收率为102.3％,最低检出限为2μg/g.对6个地区18份明日叶样品中功效成分4-羟基德里辛和黄当归醇进行检测.结论 此法样品前处理简单,适于明日叶功效组分快速检测.从不同地域看,南方地区明日叶中4-羟基德里辛含量和黄当归醇含量明显较高,但江苏的样品含量明显低.4-羟基德里辛、黄色当归醇主要分布在茎部和根部,以根部含量最高,叶部最低.该研究对明日叶中功效成分提取产业化发展提供了参考依据.

目的 探究明日叶的中药药性,为其在我国中医临床及产业化应用奠定理论基础.方法 选用中国知网、万方数据知识服务平台、维普网、CiNii、Web of Science、PubMed及Scopus科技期刊文献数据库进行检索,对所得文献进行纳入、排除、分类及统计,结合中医药理论分析明日叶的中药药性.结果 明日叶为伞形科当归属植物明日叶(Angelica keiskei Koidzmi)的茎和叶,干品、鲜品均可使用.其主产于日本、韩国,在我国山东等地亦有引种.明日叶味甘、咸、微苦,性凉,归脾、肾、肝经,具有化浊降脂、补益肝肾、解酒毒的功效,可用于抑制肥胖,治疗高脂血症、糖尿病,并适用于骨密度下降、免疫力低下、饮酒过度等人群.干品3～10 g,鲜品15～50 g,水煎服,亦可直接泡水饮用,外用适量敷于患处.结论 本研究开展药性理论探析,赋予明日叶中药药性以丰富中药资源,为进一步实验及临床使用奠定理论基础,对中医药资源"引进来"和"走出去"的全球化研究具有重要意义.

目的:研究明日叶查尔酮(AC)对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用.方法:将60只BALB/c雄性小鼠随机分为正常对照组,酒精模型组,AC低(5 mg/kg)、中(15 mg/kg)、高(30 mg/kg)剂量组,每组12只.灌胃给予受试物,体积为10 μL/g,每天1次,连续30 d,正常对照组与酒精模型组给予等体积生理盐水.末次给药12 h后,除正常对照组外,其余4组小鼠均一次性灌胃50％酒精,灌胃量为12 mL/kg.灌胃12 h后,眼球取血,分离血清,分别测定肝脏损伤指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),脂质代谢指标低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和细胞凋亡相关指标,并进行肝脏组织病理学观察.结果:与正常对照组相比,酒精模型组小鼠肝脏系数显著升高(P<0.05),肝脏出现明显的炎性细胞浸润;血清转氨酶活性、TC、TG和LDL-C含量均显著升高(P<0.05),而HDL-C水平明显降低(P<0.05);血清SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.05);肝细胞凋亡率明显升高(P<0.05).与酒精模型组相比,中、高剂量AC组小鼠的肝脏系数显著降低(P<0.05),肝细胞炎性细胞浸润明显改善;血清转氨酶活性、TC、TG和LDL-C含量均显著降低(P<0.05),而HDL-C水平明显升高(P<0.05);血清SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05);肝细胞凋亡率明显降低(P<0.05).结论:AC对酒精引发的急性肝损伤具有良好的防护作用,其机制可能与抑制脂质代谢紊乱,减轻氧化损伤,抑制细胞凋亡有关.