目的 基于肾素-血管紧张素系统(RAS)探讨柴黄清胰活血颗粒(柴胡、生大黄、赤芍、白芍、厚朴等)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠的作用机制.方法 将 64 只SD大鼠随机分为 4 组:假手术组、模型组、柴黄清胰活血颗粒组(4.42 g·kg-1)、卡托普利组(5 mg·kg-1),各组再分为 12、24 h两个亚组,每组 8 只.采用经胰胆管逆行注射 3.5%牛磺胆酸钠复制SAP大鼠模型.卡托普利组腹腔注射给药;柴黄清胰活血颗粒组灌胃给药,每 6 h灌胃 1 次.术后 12、24 h采集标本,采用生化法检测血清淀粉酶(AMY)活性;HE染色法观察胰腺组织病理变化;化学发光法检测血清醛固酮(ALD)含量;ELISA 法检测血清肾素(Renin)、血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)含量;Western Blot法检测胰腺组织AT1R蛋白表达.结果 在 12、24 h同一亚组中,与假手术组比较,模型组大鼠的血清AMY活性均明显升高(P＜0.05),胰腺组织病理评分明显升高(P＜0.05),血清ALD、Renin、Ang-Ⅱ、ACE水平均明显上升(P＜0.05),胰腺组织AT1R蛋白表达明显上调(P＜0.05).与模型组比较,柴黄清胰活血颗粒组、卡托普利组大鼠的血清AMY活性均明显下降(P＜0.05),胰腺组织病理评分明显降低(P＜0.05),血清ALD、Renin、Ang-Ⅱ、ACE水平均明显下降(P＜0.05),胰腺组织AT1R蛋白表达明显下调(P＜0.05).与卡托普利组比较,柴黄清胰活血颗粒组大鼠的血清AMY活性均明显降低(P＜0.05),胰腺组织病理评分明显降低(P＜0.05),血清ALD、Renin、Ang-Ⅱ、ACE水平均明显下降(P＜0.05).结论 柴黄清胰活血颗粒可能通过下调ACE-Ang-Ⅱ-AT1R经典轴的表达,抑制Renin、ALD的生成,从而发挥对SAP大鼠的保护作用.

目的:观察中药柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠的治疗作用.方法:将144只成年健康雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组、重症急性胰腺炎模型组、柴黄清胰活血颗粒0.8、1.6、3.2g/kg组,阳性对照清胰利胆颗粒2g/kg组,每组24只.采用经十二指肠乳头逆行胰胆管注射3.5％牛磺胆酸钠1ml/kg的方法制备大鼠SAP模型.术后12h、24h、48h每个组分别各处死大鼠8只,开腹大体解剖观察后,收集腹水,腹主动脉采血,用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶、血清脂肪酶;取胰腺组织,计算胰腺干湿比,并行苏木素-伊红染色,并对胰腺病理组织进行评分.结果:柴黄清胰活血颗粒三个剂量组和清胰利胆颗粒组较模型组均能减轻胰腺水肿,改善胰腺组织病理评分,降低血清AMY、LIP活性,与清胰利胆颗粒组比较,柴黄清胰活血颗粒3.2g/kg组显著降低腹水量,改善胰腺组织病理评分.结论:柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠有明显治疗作用,且其疗效呈剂量依赖性.

目的 探讨柴黄清胰活血颗粒联合乌司他丁治疗急性胰腺炎(AP)的临床疗效.方法 选取河北省三河市燕郊人民医院2014年6月至2017年11月收治的AP患者103例,按随机数字表法分为观察组(52例)和对照组(51例).两组患者均给予常规治疗,及微量泵泵入注射用乌司他丁,观察组在此基础上给予柴黄清胰活血颗粒冲服,感染严重者微量泵泵入注射用生长抑素,均治疗1周.结果 观察组总有效率为94.23％,明显高于对照组的76.47％(χ2=6.527,P=0.010<0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清淀粉酶和血清脂肪酶水平均明显降低,且观察组明显低于对照组(P<0.01);两组患者白细胞介素10(IL-10)、γ-干扰素(IFN-γ)、对氧磷酶-1水平均明显升高,且观察组明显高于对照组(P<0.01);观察组患者的腹胀、腹痛、恶心呕吐、腹膜刺激征等症状消失时间均明显短于对照组(P<0.01),两组患者不良反应发生率相当(9.62％比11.76％,χ2=0.125,P>0.05).结论 柴黄清胰活血颗粒联合乌司他丁可用于治疗AP,其机制与减少胰酶分泌和炎性介质释放,促进组织功能恢复有关,且安全性较高.

目的 探讨柴黄清胰活血颗粒的质量控制方法.方法 采用薄层色谱法对柴黄清胰活血颗粒中大黄、黄芪、栀子、黄芩和延胡索进行定性鉴别,采用高效液相色谱法同时测定柴黄清胰活血颗粒中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量.结果 薄层色谱斑点清晰,分离效果较好,且阴性无干扰;5种有效成分在一定范围内线性关系良好(R2>0.999),平均回收率为99.66％ ～102.90％,RSD均低于3％(n=9).结论 该方法准确可靠、专属性强、重复性好,可作为控制柴黄清胰活血颗粒质量的有效方法.

目的:通过JNK/P38MAPK信号通路探讨柴黄清胰活血颗粒治疗重症急性胰腺炎的作用机制.方法:将实验大鼠分为假手术组、模型对照组、柴黄清胰活血颗粒1.6g/kg组,每组16只,以3.5％牛磺胆酸钠制备重症急性胰腺炎(SAP)模型.各组灌胃相应药物或生理盐水.每4h给药1次.术后12 h及24h分别采集各组8只大鼠动脉血与胰腺组织并检测相关指标.结果:与假手术组比较,模型组血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)活性均升高,胰腺组织中IL-1β、TNF-α的阳性量明显升高、MKK4、MKK7、JNK、MKK3、MKK6、P38蛋白的表达均上调,IL-1β mRNA、TNF-α mRNA表达亦明显上调;与模型组相比,柴黄清胰活血颗粒血清中AMY、LIP的活性均明显下降,24h比12 h活性更低,胰腺组织12 h、24 h IL-1β、TNF-α的蛋白表达均明显下调,MKK4、MKK7、JNK、MKK3、MKK6、P38蛋白表达均明显下调,IL-1β mRNA、TNFα mRNA表达明显下调.结论:柴黄清胰活血颗粒可能通过JNK/P38MAPK信号通路作用于重症急性胰腺炎模型大鼠.

目的 优选柴黄清胰活血颗粒的水提工艺.方法 以栀子苷的转移率为评价指标,采用L9(34)正交试验法,考察煎煮时间、浸泡时间、煎煮次数、加水量4个因素对水提工艺的影响,并进行验证试验.结果 最佳水提工艺为加10倍量水,浸泡30 min,煎煮3次,每次1.0 h.结论 优选的提取工艺合理可行,稳定客观.

目的:基于IKK/IκB/NF-κB信号通路探讨柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎的作用机制.方法:将实验大鼠用随机法分为模型对照组、柴黄清胰活血颗粒8 g/kg组,每组16只,以3.5％牛磺胆酸钠制备大鼠重症急性胰腺炎(SAP)模型,另设正常对照组,各组灌胃相应药物或生理盐水,每4h给药1次.术后12 h及24 h分别采集各组8只大鼠动脉血与胰腺组织.生化法检测各组大鼠血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(UP);实时定量PCR技术检测胰腺组织NF-κB抑制物激酶(IKKβ)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA;蛋白免疫印迹法检测IKK/IκB/NF-κB通路相关蛋白;免疫组化法检测核因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型对照组血清AMY和LIP活性均明显升高(P＜0.05);12 h、24 h胰腺匀浆液中IKKβ、IKBα mRNA明显上调(P＜0.05),p-IκBα蛋白在12h和24h均明显上调,IKBα蛋白两个时间均明显下调(P＜0.05).与模型对照组比较,柴黄清胰活血颗粒血清12 h(1.6 g/kgx3次)、24 h(1.6 g/kgx5次)AMY和LIP活性、胰腺匀浆液中IKKβ mRNA、IKKβ和p-IKBα蛋白表达量均下降,NF-κB p65阳性表达量及评分均降低,24 h较12 h表达更低,IκBα mRNA及IκBα蛋白表达量升高(P＜0.05).结论:柴黄清胰活血颗粒治疗SAP的机制可能与抑制IKK/IκB/NF-κB信号通路,减少炎症介质释放有关.

目的 探讨柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及其可能机制.方法 将96只大鼠随机分为假手术组、模型组、柴黄组(1.2 g·kg-1),每组32只.经胰胆管注射5％牛磺胆酸钠复制大鼠重症急性胰腺炎模型,模型复制成功后,假手术组、模型组灌胃生理盐水,柴黄组灌胃柴黄清胰活血颗粒,每6 h1次;观察每组大鼠术后一般情况,并于每组术后6、12、24、48 h分别处死8只大鼠取材,检测血清淀粉酶(Amylase,AMY);检测动脉血二氧化碳分压(Arterial partial pressure of Carbon Dioxide,PaCO2)、动脉血氧分压(Arterial partial pressure of Oxygen,PaO2)并计算氧合指数(Oxygenation Index,OI);HE染色观察各组大鼠肺脏病理改变并进行病理学评分;测各组大鼠肺组织湿干质量比(Wet/Dry weight ratio,W/D);ELISA法检测肺组织分泌型磷脂酶A2(Secreted phospholipase A2,sPLA2)、TOLL 样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4);免疫组化法检测肺组织核因子κB p65(Nuclear factor κB p65,NF-κB p65).结果 与假手术组比较,模型组大鼠一般情况差;AMY升高(P＜0.05);PaCO2升高,PaO2、OI降低(P＜0.05);HE染色可见肺组织水肿,出血,炎性细胞浸润以及肺实变,肺组织病理评分升高(P＜0.05);肺组织W/D以及sPLA2、TLR4、NF-κB p65表达升高(P＜0.05).与模型组比较,柴黄组大鼠一般情况有所好转;AMY降低(P＜0.05);PaCO2降低,PaO2、OI升高(P＜0.05);HE染色改善,肺组织病理评分降低(P＜0.05);肺组织W/D以及sPLA2、TLR4、NF-κB p65表达降低(P＜0.05).结论 柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠急性肺损伤有保护作用,其机制可能与抑制sPLA2表达及TLR4-NF-κB信号通路活化有关.

目的 优化柴黄清胰活血颗粒的提取工艺.方法 分别采用传统水煎、粉碎-渗漉-水煎、渗漉-水煎3种提取工艺提取柴黄清胰活血颗粒中14味中药材的有效成分;采用高效液相色谱法同时测定不同提取工艺制得的柴黄清胰活血颗粒中大黄的指标性成分芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量,优选提取工艺,并比较3种提取工艺的各有效成分的含量和转移率.结果 采用渗漉-水煎提取工艺制得的颗粒中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的总含量为0.8357 mg/g,上述成分的转移率分别为74.59％,74.61％,73.88％,52.86％,53.95％,均高于传统水煎提取工艺.结论 渗漉-水煎提取工艺客观可行,稳定合理,可为工业化生产提供理论依据.

目的 观察柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠炎症反应、病理损伤以及JAK2/STAT3信号通路的影响,为柴黄清胰活血颗粒的临床应用提供理论依据.方法 将64只大鼠随机分为假手术组16只、模型复制组48只.模型复制组采用胰胆管注射5％牛磺胆酸钠进行模型复制.将模型复制成功的大鼠随机分为模型组、柴黄清胰活血颗粒组及阳性对照(AG-490)组,每组16只.假手术组、模型组、阳性对照组予以生理盐水灌胃,柴黄清胰活血颗粒组大鼠予以1.6 g·kg-1柴黄清胰活血颗粒溶液灌胃,每8 h 1次.阳性对照组大鼠术前30 min腹部皮下注射8 mg·kg1的AG-490注射液.术后各组按照术后12、24 h的时间点分别取8只大鼠,暴露腹主动脉并采血、剪取胰腺组织.HE染色观察胰腺组织病理变化并进行病理评分;生化法检测血清淀粉酶、脂肪酶活性;ELISA法检测血清白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫组化法检测胰腺组织p-JAK2、p-STAT3的活性;Western Blot法检测胰腺组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白的表达水平.结果 与相应时点的假手术组比较,模型组胰腺组织HE染色可见胰腺腺泡结构被明显破坏,有明显充血、水肿、白细胞浸润,病理评分升高,血清淀粉酶、脂肪酶含量增加,血清IL-6、IL-8、TNF-α水平升高,p-JAK2、p-STAT3免疫组化阳性表达量升高,JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达量上升(均P＜0.05).与相应时点的模型组比较,柴黄清胰活血颗粒组胰腺组织HE染色改善,病理评分下降,血清淀粉酶、脂肪酶活性下降,血清IL-6、IL-8、TNF-α水平下降,p-JAK2、p-STAT3免疫组化阳性表达量下降,JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达量下降(均P＜0.05).与柴黄清胰活血颗粒组比较,阳性对照组胰腺组织HE染色无明显变化,且病理评分、血清淀粉酶、脂肪酶、IL-6、IL-8、TNF-α 及 p-JAK2、p-STAT3 免疫组化阳性表达量,JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达量的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 柴黄清胰活血颗粒可减轻重症急性胰腺炎模型大鼠炎症反应,其机制可能是通过抑制JAK2/STAT3信号通路,从而发挥对重症急性胰腺炎的治疗作用.