目的:探讨IL-21/IL-21R介导的CD4 ＋T细胞在沙眼衣原体呼吸道感染中的作用。 方法:利用C57BL/6小鼠(WT小鼠)和IL-21R －/－小鼠，鼻腔吸入沙眼衣原体小鼠肺炎菌株( Chlamydia muridarum, Cm)建立小鼠沙眼衣原体呼吸道感染模型。流式细胞术检测小鼠 Cm呼吸道感染后0、3、7、14 d小鼠肺、脾组织中CD4 ＋T细胞数量、活化程度和功能，ELISA分析脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的含量。监测过继转移WT-CD4 ＋T细胞和IL-21R －/－-CD4 ＋T细胞的na?ve WT小鼠 Cm呼吸道感染后的体重变化，并分析感染后14 d的肺部细菌载量和病理情况，流式细胞术检测肺中性粒细胞(CD45 ＋CD11b ＋Gr-1 high)、肺泡巨噬细胞(CD45 ＋F4/80 ＋CD11c high)、Th1(IFN-γ ＋CD4 ＋)和Th2(IL-4 ＋CD4 ＋)细胞的比例，ELISA分析脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的含量。 结果:Cm呼吸道感染后，与WT小鼠相比，IL-21R －/－小鼠脾、肺组织CD4 ＋T细胞数量和活化程度以及Th1细胞比例均升高，Th2细胞比例下降，脾细胞培养上清中IFN-γ含量升高，IL-4含量下降。过继转移IL-21R －/－-CD4 ＋T细胞的受体小鼠在 Cm呼吸道感染后体重下降幅度减小，肺组织细菌载量和病理情况减轻，肺Th1细胞比例升高，脾细胞培养上清中IFN-γ含量增加。 结论:IL-21/IL-21R介导的CD4 ＋T细胞通过抑制Th1细胞免疫应答加重 Cm呼吸道感染。

目的:探讨沙眼衣原体呼吸道感染对肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages, AMs)和肺间质巨噬细胞(interstitial macrophages, IMs)浸润并向M1型或M2型极化的影响。方法:C57BL/6小鼠以鼻腔吸入沙眼衣原体小鼠肺炎菌株( Chlamydia muridarum, Cm)建立小鼠沙眼衣原体呼吸道感染模型。采用流式细胞术检测 Cm呼吸道感染后0 d、3 d、7 d、14 d肺组织中AMs (CD45 ＋F4/80 ＋CD11c ＋)和IMs (CD45 ＋F4/80 ＋CD11c －)比例并分析细胞数目，同时检测AMs和IMs中M1型巨噬细胞(CD80 ＋、CD86 ＋、MHCⅡ ＋、iNOS ＋细胞)比例和M2型巨噬细胞(CD206 ＋、Arg1 ＋细胞)比例。 结果:(1) Cm呼吸道感染诱导AMs和IMs浸润，与未感染组(0 d)比较，感染后3 d AMs和IMs比例和数目显著增加( P<0.05和 P<0.01)，感染后7 d AMs和IMs数目均达峰值( P<0.001)。(2)与未感染组比较，感染后3 d AMs中CD80 ＋和CD86 ＋细胞比例明显升高( P<0.05和 P<0.01)；AMs中MHCⅡ ＋细胞比例在感染后持续升高，于14 d达峰值( P<0.05)，CD206 ＋细胞比例在感染后持续降低( P<0.05)。(3)与未感染组比较，感染后3 d IMs中CD80 ＋和CD86 ＋细胞比例显著升高( P<0.05和 P<0.001)，感染后14 d MHCⅡ ＋细胞比例明显升高( P<0.01)，CD206 ＋细胞比例变化差异无统计学意义。(4)AMs中iNOS ＋细胞比例在感染后持续升高( P<0.01)；AMs中Arg1 ＋细胞比例在感染后持续降低，与未感染组比较，感染后7 d和14 d显著降低( P<0.05)。IMs中iNOS ＋细胞比例于感染后7 d达峰值( P<0.001)，IMs中Arg1 ＋细胞比例变化差异无统计学意义。 结论:Cm呼吸道感染诱导AMs和IMs浸润并刺激AMs和IMs向M1型巨噬细胞极化，减弱AMs中M2型巨噬细胞极化水平，而对IMs中M2型巨噬细胞极化无显著影响。

目的:探讨沙眼衣原体小鼠肺炎株( Chlamydia muridarum, Cm)呼吸道感染对巨噬细胞浸润及向M1/M2极化的影响。 方法:经鼻腔给予C57BL/6小鼠1×10 3包涵体形成单位(inclusion-forming units, IFU) Cm建立小鼠沙眼衣原体呼吸道感染模型。流式细胞术检测肺组织中F4/80 +总巨噬细胞及CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex Ⅱ，MHCⅡ)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)、CD206表达情况；实时荧光定量聚合酶链反应检测肺组织中iNOS、CD206、CCL2 mRNA表达。 结果:Cm呼吸道感染诱导小鼠肺组织中巨噬细胞增加，与未感染组比较，感染后第3天F4/80 +巨噬细胞显著增加，并且持续到第7天； Cm感染后，M1型巨噬细胞表面标志CD86、MHCⅡ及M1型巨噬细胞相关趋化因子CCL2表达增加，巨噬细胞向M1型极化；M2型巨噬细胞表面标志CD206逐渐降低。进一步研究发现，M1型巨噬细胞活化指标iNOS在感染后增加，第7天达到高峰。 结论:Cm呼吸道感染后可诱导巨噬细胞在肺组织大量浸润，且向M1型巨噬细胞极化。

目的:探讨树突状细胞(dendritic cells, DC)在沙眼衣原体小鼠肺炎株( Chlamydia muridarum， Cm)呼吸道感染中的作用以及对适应性免疫应答的影响。 方法:C57BL/6小鼠经鼻腔吸入1×10 3包涵体形成单位(inclusion-forming units, IFU) Cm建立小鼠呼吸道感染模型。流式细胞术检测感染后0、3、7 d脾组织中总CD11c +MHCⅡ +DC比例和共刺激分子(CD40、CD80和CD86)表达情况；qPCR检测小鼠脾组织中DC细胞因子IL-12p40、IL-10和IL-6 mRNA的表达；磁珠分选出 Cm感染后7 d的小鼠脾组织DC并过继转移给受体小鼠，于感染后14 d利用细胞内细胞因子染色检测受体小鼠Th1应答水平。 结果:Cm感染诱导小鼠脾组织DC大量浸润并且共刺激分子表达增加；脾组织DC细胞因子IL-12和IL-10 mRNA的表达在感染后3 d达到高峰；将 Cm感染小鼠脾组织DC过继转移给受体小鼠，受体小鼠感染 Cm后疾病减轻，肺组织衣原体繁殖降低，且肺和脾组织中的Th1细胞比例显著升高。 结论:DC在 Cm感染后成熟、活化并促进Th1细胞免疫应答，在衣原体呼吸道感染中发挥免疫保护作用。

目的:探讨沙眼衣原体呼吸道感染过程中C3H/HeN(C3H)小鼠过度炎症反应的机制.方法:C3H与C57BL/6(C57)小鼠鼻腔吸入1×103IFU沙眼衣原体小鼠肺炎菌株(Cm),建立沙眼衣原体小鼠肺炎模型,使用RT-PCR检测感染后不同时间点小鼠肺组织Toll样受体TLR2、TLR4及转导蛋白MyD88 mRNA的表达.结果:使用1×103IFU的Cm呼吸道感染C3H与C57BL/6(C57)诱导小鼠衣原体肺炎,Cm感染在高易感性的C3H小鼠及低易感的C57小鼠均诱导Toll样受体的表达,但在感染后第7天及第14天,高易感的C3H小鼠肺组织中TLR2和TLR4 mRNA的表达均显著高于C57小鼠,尤其TLR2(P<0.001或P<0.05),进一步研究发现Cm呼吸道感染C3H小鼠肺组织MyD88mRNA的表达也显著高于C57小鼠,并在感染后第14天仍维持高表达.结论:Cm呼吸道感染诱导TLR2、TLR4及MyD88在高易感的C3H小鼠肺组织高表达,可能与C3H小鼠肺组织过度炎症反应相关.

目的 探讨巨噬细胞炎症蛋白-1(MIP-1α)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在沙眼衣原体肺感染小鼠中的表达及意义.方法 选取6～8周健康C57BL/6小鼠30只,应用沙眼衣原体小鼠肺炎株通过鼻腔感染小鼠,分别于感染前、感染后7 d和14 d随机处死10只小鼠,采用HE染色观察肺组织,采用Western blot和RT-PCR检测肺组织MIP-1α和MCP-1 mRNA和蛋白表达,采用ELISA法检测肺组织匀浆中IFN-γ和IL-12水平.结果 感染后7 d小鼠肺组织单核-巨噬细胞比例明显高于感染前(P<0.05),感染后10 d小鼠肺组织单核-巨噬细胞比例较感染后7 d有所下降(P<0.05);感染后7 d小鼠肺组织MIP-1α、MCP-1 mRNA和蛋白相对表达量、IFN-γ和IL-12明显高于感染前(P<0.05),而感染后10 d小鼠肺组织MIP-1α、MCP-1 mRNA和蛋白相对表达量、IFN-γ和IL-12较感染后7 d有所下降(P<0.05);MIP-1α、MCP-1 mRNA和蛋白相对表达量与单核-巨噬细胞比例、IFN-γ、IL-12呈正相关(r值分别为0.402、0.387、0.311、0.304、0.305、0.361、0.391、0.380、0.402、0.376、0.378、0.316,P<0.05).结论 MIP-1α 及MCP-1在沙眼衣原体肺感染小鼠中表达增强,在细胞免疫及Th1/Th2免疫应答中有一定作用.