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浙贝母提取液在大鼠尿液、粪便中的原型成分及代谢产物分析
编辑人员丨2024/3/16
目的 分析浙贝母提取液在大鼠尿液、粪便中的原型成分及代谢产物.方法 UPLC-Q-TOF-MS 分析采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相 0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温 30℃;电喷雾离子源;正负离子扫描.结果 在大鼠尿液中共检测出化学成分 28 种,其中原型成分 19 种,代谢产物9 种;在大鼠粪便中共检测出化学成分53 种,其中原型成分37 种,代谢产物16 种,去除重复后,共检测出化学成分 66 种,其中原型成分 45 种,代谢产物 21 种;粪便、尿液中共有原型成分 24 种,粪便中独有成分15 种,尿液中独有成分 6 种;粪便、尿液中共有代谢成分 6 种,粪便中独有成分 11 种,尿液中独有成分 4 种.浙贝母主要活性成分贝母素甲、贝母素乙代谢途径包括Ι相代谢(羟基化、氧化脱氢、还原加氢)、Ⅱ相代谢(硫酸化).结论 该方法快速准确,简单可行,可用于解析浙贝母体内过程,阐明其药效物质基础.
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编辑人员丨2024/3/16
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浙贝母中多菌灵残留量测定及急性膳食摄入风险评估
编辑人员丨2023/8/6
目的 测定浙贝母Fritillaria thunbergii Mig.中多菌灵的残留量,并评估急性膳食摄入风险.方法 浙贝母乙腈提取液的HPLC-UV分析采用Agilent SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水(20∶80);检测波长220 nm;柱温30℃.采用点评估方法,对20批样品膳食暴露水平进行初步评估.结果 多菌灵在0.982 4 ～ 196.48ng范围内呈良好的线性关系(r=1.000 0),平均加样回收率110.3％,RSD 5.5％,急性膳食摄入风险(％aRfD)为0.02％.结论 20批浙贝母中多菌灵的残留风险在可接受范围内.
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编辑人员丨2023/8/6
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茄病镰刀菌单克隆抗体的制备及胶体金免疫层析试纸条的研发
编辑人员丨2023/8/5
目的:利用浙贝母(Fritillaria thunbergii)根腐病病原菌之一的茄病镰刀菌(Fusarium solani)为抗原制备分泌特异性单克隆抗体(单抗)的细胞株,开发基于单抗的胶体金免疫层析试纸条,为检测浙贝母根腐病提供技术支撑.方法:以茄病镰刀菌全菌体蛋白质提取液为抗原,利用杂交瘤技术制备能分泌针对茄病镰刀菌特异性单抗的细胞株;间接ELISA和Western blot检测单抗的特异性、效价、灵敏度、结合蛋白等特性;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒并标记单抗,制备胶体金免疫层析试纸条.结果:获得3株能分泌针对茄病镰刀菌的特异性单抗的细胞株,分别命名为FsA3、FsG6、FsD4.其中FsA3检测灵敏度为24.41 ng/mL,FsG6、FsD4检测灵敏度均为12.21 ng/mL.FsA3、FsG6、FsD4均针对茄病镰刀菌强烈反应,且不与细极链格孢(Alterniaria tenuissima)、交链格孢(A.alternata)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、木贼镰刀菌(F.equiseti)、变红镰刀菌(F.incarnatum)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、茎点霉属真菌(Phoma sp.)、Phomopsis oblonga等抗原发生交叉反应.基于FsG6的胶体金免疫层析试纸条检测浙贝母无菌组培苗提取液时只出现质控线,加入 100 ng茄病镰刀菌抗原或浙贝母根腐病病株样品时,均出现肉眼可见的质控线和检测线.结论:制备的单抗和试纸条具有简单、快速、特异性和灵敏度高的优点,可用于检测浙贝母病株中分离到的茄病镰刀菌,这为浙贝母根腐病田间快速准确检测提供了技术支撑.
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编辑人员丨2023/8/5
