目的:通过网络药理学结合实验验证海蓬子抗氧化、抗炎的作用机制.方法:使用PubMed、TCMID、CNKI等数据库,对海蓬子关键活性成分及其相关目标靶点进行筛选.利用疾病数据库GeneCards、OMIM搜索与抗氧化、抗炎相关的疾病靶点.通过在线软件Venn2.1.0得到潜在靶点,绘制韦恩图,然后利用Cytoscape3.9.1、STRING技术平台,建立"疾病-植物-成分-靶点-信号通路"和蛋白-蛋白互作网络图,将靶点输入David6.8数据库进行富集分析,并通过检测谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)等含量指标进行海蓬子抗氧化作用的动物实验验证.结果:研究获得20个海蓬子活性成分,与这些成分相关对应靶点308个;与抗氧化、抗炎相关靶点分别为1 222、1 868个,海蓬子与抗氧化、抗炎的交集靶点为207个.对PPI网络拓扑分析,得出5-羟色胺受体1A(HTR1A)、多巴胺受体D2(DRD2)、钠依赖性多巴胺转运体(SLC6A3)等多个抗氧化和抗炎的潜在靶点基因.GO功能富集分析总共得到989个候选基因,通过对KEGG信号通路富集分析显示主要与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、脂质和动脉粥样硬化及蛋白聚糖有关.海蓬子提取物各剂量组体重显著降低(F=3.85,P＜0.01);与模型组比较,各给药组的MDA含量显著降低(F=7.84,P＜0.001),GSH含量显著升高(Z=-5.24,P＜0.001).结论:海蓬子可以通过多个靶点、多个成分发挥抗氧化、抗炎症的作用.

目的 研究海蓬子提取物(SE)对四氧嘧啶诱导的糖尿病模型小鼠血糖、血脂以及胰腺组织的影响.方法 尾静脉注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,正常小鼠随机分为空白组、正常高剂量组,造模成功小鼠分为模型组、阳性对照组、SE组(0.9,1.35,1.8 9·kg-1).灌胃30d,观察灌胃期间小鼠的体征状态、摄食量、饮水量及体质量;测定小鼠的空腹血糖值、口服糖耐量;测定小鼠血清的TC、TG;胰腺病理切片的形态学考察.结果 SE可减少糖尿病小鼠的摄食量、饮水量,抑制小鼠体质量的减轻;降低糖尿病小鼠的空腹血糖且改善糖耐量异常;降低糖尿病小鼠血清中TC、TG含量;不同程度改善了糖尿病小鼠胰岛数目减少、组织排列紊乱的情况.结论 SE能明显改善糖尿病小鼠“三多一少”症状,显著降低糖尿病小鼠空腹血糖,并调节其糖耐量异常,纠正糖尿病造成的脂代谢紊乱,修复糖尿病造成的胰岛损伤.

目的 研究海蓬子皂苷甲(BA)诱导细胞自噬的作用及其机制.方法 采用倒置荧光显微镜法、流式细胞仪法和Western blot法从3个不同角度检测细胞自噬;免疫印迹法检测mTOR信号通路;MTT法检测BA单独或联合3-MA作用后细胞的存活率.结果 BA可诱导MCF7细胞发生自噬,具有剂量依赖性.BA可抑制mTOR磷酸化激活,抑制mTOR下游p70S6K蛋白丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)的磷酸化以及4EBP1的磷酸化.且随着BA浓度升高,Akt和p-ERK表达降低.3-MA与10 μmol·L-1 BA联合用药时,细胞存活率明显低于单独使用BA处理的细胞.结论 海蓬子皂苷甲通过抑制Akt和p-ERK蛋白表达,进而抑制mTOR激活,最终诱导人乳腺癌MCF7细胞发生自噬.

目的 利用网络药理学技术预测海蓬子抗糖尿病有效成分、潜在靶点及通路,探讨其“多成分-多靶点-多通路”的抗糖尿病作用机制.方法 通过查阅大量文献获取海蓬子内15种具有相关活性的化学成分信息,利用Pharm-Mapper和DrugBank数据库筛选海蓬子抗糖尿病的潜在靶点,采用MAS 3.0生物分子功能软件获取潜在靶点和通路的相关信息,最后采用Cytoscape软件构建海蓬子治疗糖尿病的“成分-靶点-通路”网络模型.结果 海蓬子的15个成分可能是通过MAP2K1、MAPK、GSK3B、AKT等30个糖尿病相关靶点调控胰岛素、血管内皮生长因子、T细胞受体、FcεRI信号通路等72条信号通路,从而参与调节免疫、炎症反应、脂质代谢、细胞凋亡等过程来发挥治疗糖尿病及其并发症的作用,呈现出海蓬子“多成分-多靶点-多通路”的抗糖尿病作用机制.结论 本研究为解析海蓬子复杂体系、阐释其抗糖尿病作用的科学内涵提供了新的思路和方法,为下一步其作用靶点及机制的验证实验指明了方向.

目的 研究海蓬子皂苷甲(bigelovii A,BA)诱导细胞凋亡的作用及其机制.方法 使用MTT实验检测BA对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析BA对细胞凋亡的影响;Western blot分析p-STAT3、STAT3、p-STAT5、STAT5、SHP-1、SHP-2的表达.结果 20和40μmol·L-1 BA可诱导HepG2细胞发生凋亡,具有剂量依赖性.10、20和40μmol·L-1 BA可抑制IL6诱导的STAT3和STAT5磷酸化,但酪氨酸磷酸酶抑制剂过钒酸钠可逆转该抑制作用,且20μmol·L-1 BA能激活蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1和SHP-2.结论 BA可能通过SHP-1/SHP-2和STAT3/STAT5通路诱导HepG2细胞凋亡.