目的 建立人尿中1,1,2,2-四氯乙烷的自动顶空-气相色谱检测方法.方法 准确移取5.00 mL待检尿样于20 mL顶空瓶中,加入2.0 g无水亚硫酸钠后立刻密封顶空瓶盖,置于自动顶空仪中80℃加热平衡50 min.在加热条件下,同时加入无水亚硫酸钠使得尿中1,1,2,2-四氯乙烷发生完全消去反应生成三氯乙烯,顶空瓶上方三氯乙烯蒸气经DB-624毛细管色谱柱分离,火焰离子化检测器检测,以三氯乙烯的峰面积对1,1,2,2-四氯乙烷的质量浓度绘制标准曲线进行定量.结果 实验结果表明,尿中1,1,2,2-四氯乙烷在质量浓度为0.008 3～32.000 mg/L范围内线性关系良好,相关系数＞0.999 4,方法检出限为2.5 μg/L,定量下限为8.3 μg/L.批内相对标准偏差为4.79％～5.28％,批间相对标准偏差为4.61％～6.44％.加标回收率为87.53％～101.17％.结论 自动顶空-气相色谱法测定尿中1,1,2,2-四氯乙烷灵敏度高、线性关系好、干扰少、精密度好、样品前处理简单,可用于人尿中1,1,2,2-四氯乙烷质量浓度的测定.

以兰州百合为原料,采用PBS缓冲溶液提取兰州百合糖蛋白,经Sephadex G-200和DEAE-Cellulose 52柱层析纯化得到2个组分:LGP-1和LGP-2.以LGP-2为研究对象,对其进行结构表征研究.傅里叶红外光谱表现出糖和蛋白质的特征吸收峰,糖链中存在吡喃糖构型和β-糖苷键;体积排阻色谱测定其重均分子量为9.311×104;β-消去反应结果则说明LGP-2含有O-连接的糖肽键;圆二色性光谱结果表明其主链二级结构以β-折叠为主.

目的:观察用通窍醒神方、头针联合经皮穴位电刺激治疗脑卒中单侧空间忽略的临床效果.方法:选择脑卒中单侧空间忽略患者116例,将其随机分为对照例和观察组各58例.两组患者均给予常规康复训练,对照组患者在此基础上给予经皮穴位电刺激疗法,观察组在对照组基础上加用通窍醒神方、头针联合治疗,两组均连续治疗8周.评价患者的忽略程度、日常生活能力、认知功能、焦虑、生活质量变化,测定血液流变学指标、血清中相关因子含量变化.结果:治疗后,两组患者的数字消去试验、画钟试验、平分直线试验评分均有所降低(均P<0.05),组间比较,观察组显著低于对照组(均P<0.05);与对照组相比,观察组患者治疗后的日常生活能力ADL、认知能力MMSE评分均显著升高(均P<0.05);观察组患者治疗后8周、随访8周、随访12周的焦虑SAS评分均显著降低(均P<0.05),生活质量评分显著升高(t=8.002,8.155,5.697,P<0.05);与对照组相比,观察组患者的全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度均显著降低(均P<0.05);观察组的治疗后血清中TNF-α、sICAM-1水平均显著降低,IL-2水平则显著升高(均P<0.05).结论:通窍醒神方、头针联合经皮穴位电刺激更利于减轻脑卒中单侧空间忽略患者的病情,提高日常生活能力、认知功能,缓解焦虑,提高生活质量,远期效果确切,其起效可能与改变血液流变、调控TNF-α、sICAM-1、IL-2水平以调节免疫稳态、抑制炎症反应有关.

目的 研究远志糖蛋白的结构特征及其对小鼠学习记忆障碍功能的影响.方法 采用苯酚-硫酸法、BCA法、液相色谱分析、氨基酸分析、SDS-PAGE、UV、IR、β-消去反应、圆二色性(CD)光谱分析、液质分析等分析方法对远志糖蛋白进行结构表征.采用腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(2 mg·kg-1)建立学习记忆障碍模型,通过旷场、新物体识别、Morris水迷宫等实验手段考察小鼠行为能力;ELISA检测小鼠脑组织中GSH、GSH-PX、GLU、ROS、CAMKⅡ等指标.结果 分离的远志糖蛋白PG-2具有蛋白质与糖类的特征吸收峰,其蛋白质、糖类质量分数分别为56.9％、26.8％,相对分子质量约为26 kDa;含有16种氨基酸;含有葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖等单糖;蛋白质主链二级结构以α-螺旋为主;PG-2中筛选出的5条多肽为(EVIADIAK、ISSLESLR、NLSADIISK、PRVKMADK、LYPAVPVDAK).动物实验表明,与空白组相比,模型组小鼠自主活动水平与垂直得分均显著性降低(P＜0.01,P＜0.01);新物体识别指数显著减小(P＜0.01);穿越平台次数与平台区域停留时间均显著减少(P＜0.01,P＜0.01);GSH、GSH-PX、CAMKII含量均显著降低(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01),GLU、ROS含量显著增加(P＜0.01,P＜0.01).与模型组动物相比,低剂量组小鼠的自主活动水平与垂直得分均增加(P＜0.05,P＜0.05);新物体识别指数显著增加(P＜0.05);GSH、GSH-PX、CAMKII含量均显著增加(P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05),GLU、ROS含量显著增加(P＜0.01,P＜0.01);高剂量组小鼠的自主活动水平与垂直得分均增加(P＜0.01,P＜0.01);新物体识别指数显著增加(P＜0.01);穿越平台次数增加与平台区域停留时间显著增加(P＜0.05,P＜0.05);GSH、GSH-PX、CAMKⅡ含量均显著增加(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),GLU、ROS含量显著降低(P＜0.01,P＜0.01).结论 PG-2含大量人体所需氨基酸,为优质植物蛋白,远志糖蛋白可对学习记忆障碍小鼠的学习记忆能力起到改善作用,为远志的进一步研究提供参考.