目的:观察凉血散瘀法清心通脉饮含药血清对乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low density lipoprotein,ac-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7凋亡率及A型清道夫受体(type A scavenger receptor,SR-A),B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax),肌醇需要酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)表达的影响,探讨清心通脉饮治疗动脉粥样硬化可能的作用机制.方法:8只新西兰兔采用随机数字法分为阿托伐他汀组(2.6 g·kg-1),清心通脉饮低、中、高剂量组(3.33,6.66,13.32 mg·kg-1),灌胃7d后颈动脉采血收集含药血清.各组用2.5,5,10,20％体积分数的含药血清培养液分别刺激RAW264.7细胞系6,12,24 h,采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法观察细胞增殖率.体外培养RAW264.7细胞系,分为空白组、模型组、阿托伐他汀组、清心通脉饮低、中、高剂量组.空白组用牛血清白蛋白(BSA)培养细胞,模型组用BSA+ 50 mg·L-ac-LDL刺激细胞24 h,其他组用BSA +50 mg·L-1 ac-LDL+ 10％含药血清刺激细胞24 h.流式细胞技术检测每组RAW264.7细胞系凋亡率和SR-A的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bax,IRE1α蛋白的表达.结果:与空白组比较,模型组可显著增加RAW264.7细胞凋亡率(P＜0.01),并增加Bax,SR-A蛋白表达(P＜0.01),减少Bcl-2蛋白表达(P＜0.05).与模型组比较,清心通脉饮低、中、高剂量组均可降低RAW264.7细胞系凋亡率(P＜0.05),减少SR-A和IRE1α表达(P ＜0.05,P＜0.01).清心通脉饮低、高剂量组可降低Bax表达(P ＜0.05,P＜0.01);清心通脉饮中、高剂量组可降低Bcl-2表达(P＜0.05).结论:清心通脉饮可降低巨噬细胞凋亡率,其治疗动脉粥样硬化机制可能与调控相关凋促亡蛋白Bax,IREα,SR-A和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关.

本研究根据“火热灼脉”学说,提出了急性冠脉综合征(ACS)以气血脉络失和为根基,心脉痹阻为机转,痰瘀日久化生火热毒邪,灼伤心脉为病机关键;强调了冠心病稳定时以痰瘀为“常”,ACS发作时以火热毒邪灼伤心脉为“变”,并总结了火热毒邪除了痰瘀久蕴之外,还与膏脂饮食、五志过极、外感六淫等因素息息相关.笔者团队基于临床实践经验,以清心解毒、活血通脉,并灵活配以散结消窠、调气和中等法,随证变化,取得良好临床疗效.

目的:观察清心通脉饮对动脉粥样硬化(AS)兔模型的治疗作用,并探索其可能的机制.方法:新西兰兔采用股动脉球囊扩张术建立AS模型,造模成功后随机分为模型组、阿托伐他汀组和清心通脉饮低、中、高剂量[3.33,6.66,13.32?g/(kg·d)]组,每组10只,另取10只兔作为正常组.各组均灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,连续4周.末次给药后麻醉采血,全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,酶联免疫吸附测定(Elisa)法检测血清C反应蛋白(CRP)、白介素-1(IL-1)、干扰素-β(IFN-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.取腹主动脉,苏木精-伊红染色法(HE)观察腹主动脉病理学变化,蛋白免疫印迹法(WB)检测腹主动脉组织中p38丝裂原活化蛋白酶(p38?MAPK)、核转录因子kappa?B?p65(NF-κB?p65)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、调节蛋白激酶(ERK)蛋白及磷酸化p38?MAPK、NF-κB?p65、JNK、ERK(p-p38?MAPK、p-NF-κB?p65、p-JNK、p-ERK)蛋白表达情况.结果:与正常组比较,模型组兔血脂水平和TNF-α、IL-1、CRP、IFN-β含量均显著升高(P<0.01),腹主动脉p-p38?MAPK、p-NF-κB、p-JNK、p-ERK蛋白表达明显升高(P<0.01).与模型组比较,清心通脉饮中、高剂量组和阿托伐他汀组血清TC、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.01,P<0.05);清心通脉饮高剂量组和阿托伐他汀组HDL-C水平明显升高(P<0.01,P<0.05);清心通脉饮各剂量组和阿托伐他汀组TNF-α、IL-1、CRP、IFN-β含量明显降低(P<0.01),腹主动脉p-p38?MAPK、p-NF-κB?p65、p-JNK、p-ERK蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05).模型组腹主动脉内膜破坏,结缔组织增生,泡沫细胞形成,纤维斑块钙化,坏死;清心通脉饮高剂量组和阿托伐他汀组动脉壁规整,平滑,未见明显脂质沉积,动脉内皮增生不明显.结论:清心通脉饮可改善动脉粥样硬化进展,其治疗动脉粥样硬化的机制可能与调节血脂代谢,下调p-p38?MAPK、p-NF-κB?p65、p-JNk、p-ERK蛋白表达,抑制炎症反应,降低炎症因子的表达有关.