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TRV介导的溪荪VIGS转化体系的构建与鉴定
编辑人员丨2024/2/3
病毒诱导基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术为缺乏稳定遗传转化体系的植物进行基因功能分析提供了可能,为解决缺少稳定遗传转化体系的植物进行基因功能验证的需求,以单子叶植物溪荪(Iris sanguinea)为材料,克隆IsPDS基因的特异性片段并构建其VIGS重组载体pTRV2-IsPDS,通过注射法侵染溪荪叶片,结果显示:pTRV1和pTRV2-IsPDS的菌液OD600调至1.8～2.0后重悬,重悬液OD600调至0.8～1.0,通过注射器叶脉注射方式侵染溪荪叶片效果最佳.在室外温度为15～20℃的下午6～8时进行,用1 mL注射器针头扎伤溪荪叶片外表皮,沿着平行脉缓慢注射重悬液1 mL至溪荪叶片维管束中,14 d左右会出现明显的白化表型.在出现表型变化的植株和空载组中均检测到TRV1和TRV2的病毒载体,白化植株的IsPDS表达量显著低于对照组.侵染液配制中通过提高携带病毒载体的农杆菌的浓度提高侵染效率,且接种后无需遮光.
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编辑人员丨2024/2/3
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射干叶绿体基因组结构、序列特征与系统发育分析
编辑人员丨2023/8/5
目的 以射干Belamcanda chinensis为材料,在测序、组装获得叶绿体基因组的基础上,明确其结构、序列特征及系统发育关系.方法 利用PE150双末端策略进行建库测序,用NOVOPlasty组装完整的叶绿体基因组,经PCR验证边界,借助生物信息学工具进行序列分析和系统发育研究.结果 射干的叶绿体基因组全长为153 816 bp,大单拷贝区、反向重复区和小单拷贝区的长度分别为83 143、26 214、18 245 bp.射干叶绿体基因组共有133个基因,编码基因、tRNA和rRNA的数量分别为92、38和8;ycf1有2个拷贝,其中一个为假基因.系统发育分析结果表明,7种植物叶绿体基因组在发育树上可分为4组,射干与同为鸢尾科的溪荪聚为一组,支持率达100％.结论 射干叶绿体基因组的组装、序列分析和系统发育分析,为该药用植物的遗传结构和遗传多样性研究奠定了基础.
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编辑人员丨2023/8/5
