目的:观察吡咯并喹啉醌(PQQ)在氧化应激条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)线粒体功能和细胞存活的影响，并探讨其作用机制。方法:体外用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基(下称正常培养基)培养大鼠BMSC，选取对数生长期的第3～5代细胞进行实验。(1)取细胞，分为正常对照组、正常对照＋PQQ组、单纯过氧化氢组、过氧化氢＋PQQ组。正常对照组细胞用正常培养基培养24 h；正常对照＋PQQ组细胞用含终物质的量浓度为100 μmol/L PQQ的正常培养基培养24 h；单纯过氧化氢组细胞用含有终物质的量浓度为200 μmol/L过氧化氢的正常培养基培养24 h；过氧化氢＋PQQ组细胞用含有终物质的量浓度为100 μmol/L PQQ的正常培养基培养2 h后，加入终物质的量浓度为200 μmol/L的过氧化氢培养24 h。于倒置相差显微镜下观察各组细胞形态，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞存活率。(2)取5个批次细胞，均分为正常对照组、单纯过氧化氢组、过氧化氢＋PQQ组，各组细胞处理同实验(1)中相应各组。培养24 h后，采用流式细胞术对1个批次细胞进行细胞凋亡检测，计算细胞凋亡率；采用JC-1线粒体膜电位检测试剂盒和倒置相差荧光显微镜对1个批次细胞分别进行线粒体膜电位检测和JC-1荧光染色观察；采用透射电镜观察1个批次细胞线粒体形态；采用过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒对1个批次细胞分别进行CAT和SOD活性检测；采用蛋白质印迹法对1个批次细胞环磷酸腺苷活化交换蛋白1(Epac1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-3蛋白表达进行检测，计算AMPK磷酸化水平、剪切型caspase-3/caspase-3比值。除形态观察外，其余各指标每组样本数均为6。对数据行单因素方差分析、独立样本等方差 t检验。 结果:(1)培养24 h后，单纯过氧化氢组细胞出现空泡且数量较正常对照组减少，细胞存活率为(74.3±2.9)%，较正常对照组的100.0%明显降低( t＝6.39， P<0.01)；与单纯过氧化氢组比较，过氧化氢＋PQQ组细胞形态明显改善，细胞存活率明显升高至(116.9±4.2)%( t＝6.92， P<0.01)；正常对照＋PQQ组细胞存活率为(101.2±1.1)%，与正常对照组相近( t＝1.06， P>0.05)。(2)培养24 h后，与正常对照组的(13.6±1.0)%比较，单纯过氧化氢组细胞凋亡率明显增加[(37.1±2.0)%， t＝10.57， P<0.01]；与单纯过氧化氢组比较，过氧化氢＋PQQ组细胞凋亡率明显降低[(17.0±0.7)%， t＝9.49， P<0.01]。(3)培养24 h后，与正常对照组比较，单纯过氧化氢组细胞线粒体膜电位出现去极化，JC-1荧光染料主要以单体形式存在于细胞质中，发出绿色荧光，表现为膜电位明显降低( t＝4.18， P<0.01)；与单纯过氧化氢组比较，过氧化氢＋PQQ组细胞线粒体膜电位升高至正常水平( t＝4.43， P<0.01)，JC-1荧光染料顺着极化线粒体膜电位进入线粒体聚集，发出红色荧光。(4)培养24 h后，与正常对照组的规则形态比较，单纯过氧化氢组细胞线粒体结构紊乱，线粒体嵴消失，线粒体基质密度降低；与单纯过氧化氢组比较，过氧化氢＋PQQ组细胞线粒体结构规则完整，线粒体嵴清晰可见，线粒体基质密度增加。(5)培养24 h后，与正常对照组比较，单纯过氧化氢组细胞CAT活性明显升高( t＝4.54， P<0.05)，SOD活性明显降低( t＝3.93， P<0.05)；与单纯过氧化氢组比较，过氧化氢＋PQQ组细胞CAT活性明显上升( t＝8.65， P<0.01)，SOD活性无明显变化( t＝0.72， P>0.05)。(6)培养24 h后，与正常对照组比较，单纯过氧化氢组细胞Epac1蛋白表达明显降低( t＝4.67， P<0.01)，AMPK磷酸化水平、剪切型caspase-3/caspase-3比值明显升高( t＝7.88、3.62， P<0.01)；与单纯过氧化氢组比较，过氧化氢＋PQQ组细胞Epac1蛋白表达、AMPK磷酸化水平均明显升高( t＝4.34、16.37， P<0.01)，剪切型caspase-3/caspase-3比值明显降低( t＝3.17， P<0.05)。 结论:PQQ预处理能够改善氧化应激条件下大鼠BMSC的线粒体功能，降低细胞凋亡率，提高细胞存活率，且可能与Epac1蛋白表达上调、AMPK信号通路激活和剪切型caspase-3蛋白水平降低有关。

目的:分析布鲁菌病患者 18F-氟代脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层成像( 18F-fluorodeoxyglucose positron emission tomography-computed tomography， 18F-FDG PET-CT)检查的表现特点及其应用价值。 方法:纳入2012年12月至2022年5月河南省人民医院和河南省胸科医院确诊的15例布鲁菌病患者。回顾性分析患者的临床资料，并观察全身各组织器官 18F-FDG PET-CT表现，测量各特定部位病变区的病灶大小、形态、密度及氟代脱氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose，FDG)的最大标准摄取值，将最大标准摄取值≥肝脏FDG摄取值视为阳性摄取。 结果:15例布鲁菌病患者的年龄范围为28~64岁，7例有牛羊接触史或食用过牛羊肉，3例有疫区生活史，既往均无肝炎、肝硬化及肝脏肿瘤等病史。临床呈急性或亚急性起病，主要表现为发热、多汗、无力，5例有腰痛，2例有咳嗽、胸闷，病程为15 d至2个月。所有患者 18F-FDG PET-CT检查均发现全身多脏器受累改变，11例患者的躯干骨髓腔和6例患者的脾脏呈轻度弥漫性阳性摄取，5例患者的胸部或腰椎、8例的肝脏、3例的肺部、3例的前列腺、1例的附睾、1例的脾脏、2例的脊髓、8例的多发淋巴结、1例的腰大肌、1例的股骨头韧带分别可见局灶性FDG摄取值增高。 结论:18F-FDG PET-CT检查可见布鲁菌病患者全身骨关节及软组织脏器感染播散状态，尤其对检出脊柱外脏器组织病变具有优势。

目的:探讨巯基聚乙二醇（polyethylene glycol-thiol，PEG-SH）修饰的GNPs/miR-29纳米微粒诱导神经干细胞增殖、分化的作用。方法:采用氧化还原法制备PEG-SH修饰的GNPs/miR-29纳米微粒，检测紫外吸收光谱、粒径分布及Zeta电位。选取15只成年雄性SD大鼠，以改良Allen法构建脊髓损伤模型；在脊髓损伤区域分别植入人工合成的miR-29和PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒，采用凝胶电泳法分析miR-29表达的稳定性。取SPF级SD乳鼠10只，分离培养神经干细胞，使用Nestin、GFAP及NSE抗体鉴定细胞。以CCK-8法检测人工合成的miR-29、PEG-SH GNPs及PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒对神经干细胞活性、增殖的影响。将人工合成的miR-29、PEG-SH GNPs及PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒与神经干细胞共培养1周，观察神经元突起的密度、长度及数量。结果:PEG-SH修饰的纳米金呈棕红色；透射电镜下为均匀分布的球形；紫外吸收光谱呈现单峰波，在523 nm附近出现吸收峰值；Zeta电位随PEG-SH含量增加而逐渐增大，峰值为（22.5±5.2） mV；粒径随PEG-SH含量增加早期迅速达峰值后下降维持至稳定水平。脊髓损伤区域植入miR-29及PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒0~6 h，人工合成的miR-29组可见清晰的表达条带，但12~24 h表达条带迅速消失；PEG-SH GNPs/miR-29微粒组，始终能观察到清晰的表达条带。接种细胞第1、3、5、7天，miR-29组OD值分别为0.34±0.17、0.78±0.31、1.28±0.68、1.64±0.38，与DMEM组相比差异无统计学意义；GNPs组、PEG-SH GNPs组以及PEG-SH GNPs/miR-29组的OD值与DMEM组相比差异均无统计学意义。PEG-SH GNPs/miR-29纳米微粒组神经元突起的密度为（56.38±3.65） μm 2、长度为（78.25±3.72） μm、数量为（356±34.52）个/1 000倍视野，均大于miR-29组[分别为（12.53±3.26） μm 2、（11.35±3.36） μm、（158±32.85）个/1 000倍视野]、PEG-SH GNPs组[分别为（14.12±3.45） μm 2、（12.56±3.57） μm、（160±32.52）个/1 000倍视野]和生理盐水组[分别为（10.25±3.52） μm 2、（9.35±3.28） μm、（152±32.28）个/1 000倍视野]，但与胎牛血清组[分别为（56.48±3.56） μm 2、（76.85±3.65） μm、（350±35.26）个/1 000倍视野]比较差异无统计学意义。 结论:PEG-SH修饰的GNPs/miR-29纳米微粒具备良好的生物学性能，可诱导神经干细胞增殖、分化，对miR-29有一定程度的保护效应。

目的:分析明胶海绵、牛跟腱提取胶原及聚酯尿烷纤维3种常用硬膜外覆盖物预防大鼠椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的作用及其机制。方法:48只成年Wistar大鼠切除L 2~5椎板制作椎板切除模型，根据不同覆盖材料随机数字表法分为4组（每周12只）：空白组（A组）、明胶海绵组（可吸收，B组）、聚酯尿烷纤维组（不可吸收，C组）和牛跟腱提取胶原组（可吸收，D组）。于术后4周及12周取手术区域脊柱组织行大体观察（Rydell瘢痕粘连程度评级标准）、组织学观察（Nussbaum标准）；并检测硬膜周围组织中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）等3种瘢痕增生相关细胞因子的表达情况。分析比较各组各指标间的差异。 结果:48只大鼠全部存活。4周和12周大体观察和组织学结果显示明胶海绵和牛跟腱提取胶原组不存在硬膜粘连，聚酯尿烷纤维组硬膜存在粘连，空白对照组粘连程度较重且存在脊髓受压。可吸收材料组与不可吸收组Rydell评级和Nussbaum组织学评分间差异具有统计学意义（均 P<0.05）。在4周和12周可吸收材料组的bFGF、TGF-β1、VEGF等3种细胞因子的表达水平均较不可吸收组低，差异均有统计学意义（均 P<0.01），12周时免疫荧光实验证实bFGF、TGF-β1、VEGF表达在明胶海绵组（9.81±0.81、12.42±2.35、8.63±1.76）和牛跟腱提取胶原组（12.70±2.02、8.23±1.03、10.19±2.67）均较聚酯尿烷纤维组（33.94±2.03、30.29±2.76、25.79±1.21）低，组间差异均有统计学意义（均 P<0.01）。 结论:牛跟腱提取胶原和明胶海绵可有效减轻脊柱术后瘢痕的增生及硬脊膜粘连。

目的:研究脑脊液二代测序(Next-generation sequencing，NGS)在中枢神经系统布鲁菌感染诊断中的应用价值。方法:对2018年1至6月郑州大学人民医院住院并临床疑诊为中枢神经系统布鲁菌感染的3例患者的临床资料进行回顾性分析，3例患者均行常规脑脊液及NGS检测，并进行病原分析。结果:3例患者中2例有牛羊接触史，1例有饮用生羊奶史，急性起病，主要症状为头痛、发热。影像学表现为柔脑膜、腰髓或脑室旁受累。脑脊液常规白细胞计数升高，以单核细胞为主，蛋白质水平增加，葡萄糖水平降低。脑脊液NGS检出布鲁菌的核酸序列数为(47～16 411)条，覆盖度为(0.092～4.340)%。结论:脑脊液NGS能够辅助中枢神经系统布鲁菌感染的临床诊断。

总结艾儒棣教授从"皮积"论治原发性皮肤淀粉样变(PCA)的临证经验.PCA的皮损形态、病理特点与中医积病具有相似性,据此提出"皮积"的概念,认为正虚邪犯、痰瘀锢表为PCA的核心病机,多属本虚标实证,其中正气虚馁、腠理空疏为发病之本,邪留肌表、津血失布、痰瘀胶结为致病之标.治疗上以固本清源为核心,内治以健脾补肾、祛痰化瘀、软坚散结为法,自拟二仙四参汤、桂枝茯苓丸合化坚二陈丸、加味消瘰丸加减治疗;外治以驱邪消积、疏通津血为要,予自拟润肌膏热烘促进皮损软化剥脱、猪胆汁药浴开腠驱邪、牛脊髓封包濡养肌肤.

3.本刊常用但可能引起歧义的以下词汇,仅需写出中文全称,在括弧内注明英文缩写(以字母顺序排列)AAOS:美国骨科医师学会ACFAS:美国足踝外科医师学会ALP:碱性磷酸酶AO/ASIF:国际内固定研究学会AOFAS:美国足踝外科协会ARDS:急性呼吸窘迫综合征ASIA:美国脊髓损伤协会AUC:曲线下面积BMP:骨形成蛋白DRG:疾病诊断相关分组ECM:细胞外基质FAST:创伤超声重点评估eFAST:扩展创伤超声重点评估FBS:胎牛血清FIB:血浆纤维蛋白原

背景:牛磺熊去氧胆酸是一种亲水性胆汁酸衍生物,在多种神经系统疾病模型中均有神经保护作用,但目前鲜有报道研究牛磺熊去氧胆酸对脊髓损伤的作用.目的:观察缺糖缺氧条件下牛磺熊去氧胆酸对脊髓神经元凋亡的作用,以及对脊髓损伤后小鼠运动功能恢复的影响.方法:①体外实验:从孕13.5 d的C57 BL/6小鼠胚胎中分离提取原代脊髓神经元,培养72 h后,分3组处理:正常组加入Neurobasal完全培养基,置于CO2培养箱(体积分数5%CO2+95%空气)内培养24 h;氧糖剥夺组加入无糖的Neurobasal培养基,置于三气培养箱(体积分数94%N2+5%CO2+1%O2)培养12 h,更换为Neurobasal完全培养基后置于CO2培养箱内培养12 h;实验组处理过程大致同氧糖剥夺组,其中在加入无糖Neurobasal培养基的同时加入牛磺熊去氧胆酸.采用TUNEL染色检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞活性,免疫荧光染色检测细胞βⅢ微管蛋白表达.②动物实验:采用随机数字表法将60只C57 BL/6小鼠分为假手术组、脊髓损伤组与实验组,每组20只,脊髓损伤组与实验组采用Allen打击法建立T9-T10脊髓损伤模型,造模后第1天开始,实验组灌胃给予牛磺熊去氧胆酸溶液,假手术组与脊髓损伤组灌胃给予生理盐水,1次/d.连续给药14 d后,采用行为学和组织学方法评估脊髓组织修复情况.结果与结论:①体外实验:TUNEL染色、CCK-8与免疫荧光染色检测显示,氧糖剥夺组细胞凋亡数量高于正常组(P<0.01),细胞活性与βⅢ微管蛋白表达低于正常组(P<0.01);实验组细胞凋亡数量低于氧糖剥夺组(P<0.01),细胞活性与βⅢ微管蛋白表达高于氧糖剥夺组(P<0.01).②动物实验:旷场实验BBB评分与后肢足迹实验显示,实验组小鼠行走与运动功能恢复程度好于脊髓损伤组.苏木精-伊红染色显示,脊髓损伤组小鼠脊髓损伤部位可见明显畸形和空洞,神经细胞数量明显减少;与脊髓损伤组比较,实验组脊髓损伤病变面积显著减小,脊髓畸形程度更小、空洞更少,神经细胞数量增加.免疫荧光染色显示,脊髓损伤组神经元胞核标记神经元细胞数量少于假手术组(P<0.01),实验组神经元胞核标记神经元细胞数量高于脊髓损伤组(P<0.01).③结果表明:牛磺熊去氧胆酸能减少缺糖缺氧引起的脊髓神经元凋亡、轴突的丢失,促进脊髓损伤小鼠运动功能的恢复.

目的 对治疗脊髓损伤的中药复方进行数据挖掘并分析用药规律.方法 检索中国知网(CNKI)、万方数据知识服务平台(Wanfang Data)、维普中文期刊服务平台(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、PubMed、Cochrane Library、Web of Science建库至2023年2月10日收录的中药复方治疗脊髓损伤的临床研究文献,对文献进行筛选后建立中药复方治疗脊髓损伤处方数据库,应用Excel365、SPSS18.0、SPSS Modeler 18.0软件对药物进行频次统计、关联规则分析、聚类分析,探究处方用药规律.结果 共纳入164篇相关文献,涉及185首中药处方、201味中药,中药累计使用2 322次,其中当归、黄芪、红花、川芎、牛膝、桃仁等32味药为治疗脊髓损伤的高频用药.高频药物聚类分析得出5个聚类方.结论 中药治疗脊髓损伤以活血化瘀通络、续断疗伤、补脾益肝肾等为主,体现了脊髓损伤的临床治疗原则.本研究梳理了中药复方治疗脊髓损伤的用药规律,可为临床实践提供参考.

目的 建立牛多抗对兔多抗夹心ELISA方法检测Sabin株脊灰病毒灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV)D抗原含量,并对建立的方法进行验证.方法 分别采用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV疫苗原液作为抗原制备兔多抗,并通过间接ELISA法检测其效价及特异性.以牛多抗为包被抗体、兔多抗为显示抗体建立检测D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,并对方法的准确度、精密度及D抗原专属性进行验证.用建立的方法检测国内5家企业sIPV疫苗样品.结果 制备获得型别特异性好、效价高的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型兔多抗,并成功建立了双抗体夹心ELISA方法.采用四参数拟合,3型别标准曲线均具有良好的线性关系,R2均＞0.99.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型各试验加标回收率均为80％～120％,各浓度平均回收率分别为98.11％、97.41％、98.66％;重复性与中间精密度CV均＜10％;能够对D/C抗原进行区分.建立的方法对5家企业生产的sIPV疫苗均能够进行D抗原定量检测.结论 成功建立了检测sIPV疫苗D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,该方法准确度、精密度良好,具有一定的D抗原特异性,能够对不同厂家生产的疫苗进行检测.