实验以初重为(12.71±0.11)g的异育银鲫"中科5号"(Carassius gibelio var.CAS V)为研究对象,基于异育银鲫必需氨基酸需求量,探究在低蛋白饲料中补充必需氨基酸对异育银鲫生长、消化、氨基酸转运和mTOR信号通路相关基因表达的影响.实验设计3组等能饲料:CON组(35％粗蛋白)、LP组(28％粗蛋白)和LP+EAA组(28％粗蛋白+晶体氨基酸),养殖周期为50d.实验结果显示:低蛋白饲料中补充必需氨基酸显著提高异育银鲫生长性能(P＜0.05),并与CON组无显著差异(P＞0.05);LP+EAA组的肝脏谷草转氨酶活性显著高于LP组(P＜0.05),而谷丙转氨酶活性各组间无显著差异(P＞0.05);补充必需氨基酸对肠道中胰蛋白酶和淀粉酶活性有显著影响(P＜0.05),而对糜蛋白酶和脂肪酶无显著影响(P＞0.05).肠道中cat2、asct2和b0at1三种氨基酸转运蛋白显著上调(P＜0.05),LP组的b0,+at的相对表达量显著下调(P＜0.05),而pept1的表达各组间无显著差异(P＞0.05);肝脏中LP组tor相对表达量显著降低(P＜0.05),LP+EAA组的s6k1表达水平显著上调(P＜0.05),而4ebp2和eif4e的相对表达量在各组间无显著差异(P＞0.05);背肌中LP+EAA组的tor表达水平显著上调(P＜0.05),LP组的eif4e表达水平显著下调(P＜0.05),而s6k1和4ebp2的相对表达量在各组间无显著差异(P＞0.05).综上所述,向异育银鲫"中科5号"幼鱼饲料中补充必需氨基酸至需求量可以将饲料蛋白水平由35％降至28％,而不会对生长、氨基酸转运和mTOR信号通路相关基因表达等产生负面影响.

为了筛选稀有(鮈)鲫(Gobiocypris rarus)仔稚鱼期合适的饵料,将初孵仔鱼随机分为3个组:活饵组、饲料组、转食组,每组3个平行,均从3 dah(day after hatching)开始投喂相应饵料,在10、15、20、25、30、35 dah时统计生长指标和存活率,并进行35 dah仔稚鱼消化道组织学及消化酶活性研究.结果显示:(1)35 dah时,活饵组存活率最高;(2)从15 dah开始,活饵组表现出最好的生长性能,并维持这种趋势;(3)活饵组的消化道各部肌层厚度、黏液细胞数目均最高,提示该组仔稚鱼消化道发育状态较好,并具有较优的消化吸收能力;(4)转食组胰蛋白酶活性显著高于活饵组和饲料组.研究结果提示:相对于饲料和转食,一直投喂活饵更有利于稀有(鮈)鲫仔稚鱼的生长和发育.建议在标准化养殖过程中,对仔稚鱼期的稀有(鮈)鲫采取活饵投喂的方式.

目的 建立一种快速、高效、清洁的食品放射性监测预处理方法.方法 采集秦山核电站周围包心菜、鲫鱼、海虾、牛奶、猪肉各10份,每份20 kg(牛奶20 L).每种食品分成两组(传统方法组和微波方法组),每组5份,分别采用传统灰化法(干燥——炭化——马弗炉)和微波灰化法(微波灰化炉)分别进行灰化预处理,灰样采用HDEHP萃淋树脂分离β计数法测量放射性核素90 Sr,计算两种预处理方法的时间、灰鲜比及其对90 Sr分析流程的回收率,比较灰分形态、评价灰化效果.结果 传统方法组和微波方法组中包心菜的平均预处理时间分别为20和8.5h,鲫鱼为54和26 h,海虾为46和23 h,牛奶为74和30 h,猪肉为58和26 h,微波方法组所用时间比传统方法组缩短一半及以上,动物性食品预处理时间明显缩短;微波方法组中食品灰鲜比高于传统方法组;微波方法组食品中90 Sr在分析流程中的回收率均在75％以上,高于传统方法组;微波灰化组中灰分呈灰白色,均匀,无炭黑残留,灰化完全.结论 微波灰化预处理法快速、高效、清洁、损失少、灰化效果好,可满足放射性食品快速预处理的要求.

目的:本文以糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3 beta,Gsk3β)为研究对象,探讨Gsk3β基因在红鲫胚胎发育及成体组织中的表达模式,以及在镉金属胁迫下的分子应答初探.方法:采用RACE克隆技术获得红鲫Gsk3β cDNA全长,半定量RT-PCR技术和Western Blot技术分析Gsk3β在mRNA水平和蛋白水平的表达情况,最后通过特定浓度的镉处理分析Gsk3β的表达情况.结果:通过克隆发现Gsk3β基因全长为2195 bp, 5′端非编码区(UTR)共692 bp,3′非编码区有237 bp.编码含421个氨基酸的蛋白质,蛋白分子量约为46846. 40,等电点为9.05,且与斑马鱼和青鳉的亲缘关系最近.Gsk3β基因在胚胎发育和成体组织中呈现不同程度的表达,在不同组织中,Gsk3β在大脑组织表达最丰富,其次在眼睛,肌肉和精巢中表达相对较高,在卵巢、肝脏、肾脏和皮肤组织表达量相对较低.在不同发育时期,Gsk3β在两细胞期没有表达,之后在后续的不同时期呈现差异表达,出膜期表达最强,其次为肌效期、体节期、神经胚、囊胚期表达次之,在黑色素期和体色素期蛋白表达较弱.在镉处理后的红鲫肝脏中检测Gsk3β基因的表达,发现Gsk3β表达下调.结论:Gsk3β基因在红鲫胚胎发育中起着重要作用,且参与了镉金属胁迫应答,但其具体的分子机制仍有待进一步研究.

为构建鱼类生长、饲料需求和污染排放预测模型, 提高鱼类精准投喂管理水平, 通过收集大量文献中异育银鲫(Carassius auratus gibelio)生长数据(异育银鲫体重0.25-550 g),运用特定增长率(SGR)、日增长率(DGC)、日均增重(ADG-Linear)、热积温系数(TGC)和校正后的热积温系数(Rev.TGC)等生长模型计算其生长速率, 并通过计算实际观测值和预测值最小残差和法选出最适生长模型.结果发现, 在用TGC模型计算其生长率时, 异育银鲫在其生长周期中含有3个异速生长点, 根据该点的位置, 可以将异育银鲫的生长周期分为3个阶段: 0.25-13.1 g (第一阶段)、13.1-172.8 g (第二阶段)、>172.8 g (第三阶段).在这3个阶段中调整后的TGC模型比其他模型(SGR、DGC、ADG)可以更好地预测实际养殖中异育银鲫的生长性能.鱼类在不同的生长阶段对饲料的需求量由消化能决定, 通过计算鱼体储积能、基础代谢能、热增能以及尿液和鳃的代谢能, 可以估算异育银鲫的消化能, 从而确定其饲料需求量.经估算, 对于体重为0.25-506 g的异育银鲫, 每生产1 kg鱼, 其消化能需求量约为1.94×104kJ.在模型验证时, 以粗蛋白分别为43%、37%、31%的饲料投喂不同生长阶段的异育银鲫, 并利用营养物质平衡法估计废物排放量.研究发现, 实测值与模型预测值显著相关.模型可以在异育银鲫实际养殖过程中, 有效预估某个生长阶段异育银鲫的体重、所需要的饲料量以及氮、磷污染物排放量, 有望为异育银鲫差异化上市、节省饲料成本、减少饲料浪费以及养殖场的污染评价提供有效的预判工具.

为了评估网箱鱼营养价值,了解乌江渡水库养殖鱼的汞含量及脂肪酸的组成,随机采集优势鱼10种共计120个样品,测定了总汞、甲基汞以及包括长链不饱和脂肪酸(n6/n3 PUFA)和EPA、DHA等形态的脂肪酸.结果显示:乌江渡水库养殖鱼的总汞含量在3.50～185.05 ng· g-1,平均含量为23.90 ng· g-1;甲基汞含量在0.16～49.09 ng·g-1,平均含量为7.78 ng·g-1.乌江渡水库养殖鱼汞含量总体较低,均未超过我国水产品食用安全标准.同时,样品中的人体必需脂肪酸n3 PUFA中的EPA+DHA含量以鲫鱼最高,肉食性的鲶鱼最低.通过对n6/n3 PUFA比值分析发现,乌江养殖鱼除了富含EPA和DHA同时也富含较高的n6PUFA.对于乌江渡水库养殖鱼来说,武昌鱼、白鲢、草鱼、青鱼以及丁桂鱼是含有较高EPA+DHA和较低甲基汞的鱼种,具有较高的营养价值.

Lbh (Limb-bud and heart)基因是脊椎动物中高度保守的转录调控因子,在早期胚胎发育及某些人类疾病的发病过程中发挥着重要作用.我们前期在银鲫(Carassius gibelio)垂体转录组中筛选到一个在垂体中大量表达的基因lbh-b.为了进一步研究lbh基因在银鲫的表达特征,首先采用RACE方法克隆了银鲫lbh基因家族的成员lbh-b基因(Cglbh-b).Cglbh-b的cDNA全长1526 bp,开放阅读框549 bp,共编码182个氨基酸.生物信息学分析表明CgLbh-b蛋白与其他脊椎动物的Lbh蛋白同源性在68%以上,可能也是无序蛋白质家族的成员之一.成体组织RT-PCR分析表明Cglbh-b仅在银鲫的垂体、端脑、卵巢及眼睛中表达.不同胚胎发育时期的表达分析表明, 在受精卵至原肠胚中Cglbh-b转录产物是以母源形式存在的mRNA, 其合子转录起始于尾芽期.胚胎整体原位杂交结果显示从受精后2d到受精后3d, Cglbh-b大量表达于脑和眼睛.此外,随着卵子成熟Cglbh-b在银鲫垂体中的表达上调.这些结果暗示, Cglbh-b可能在调控银鲫脑和眼睛的发育以及卵子成熟过程中发挥着重要作用.

为研究饲料中不同蛋白水平对方正银鲫(Fang zheng Caucian carp)幼鱼生长、体成分、肝脏生化指标和肠道消化酶活性的影响, 配制蛋白水平为30.18%、33.13%、36.16%、39.34%、42.32%和45.46%的6种等脂等能饲料.选取初始质量为(3.10±0.01) g的方正银鲫幼鱼540尾, 随机分成6组, 每组3个重复, 每个重复30尾, 进行为期8周的饲养试验.结果表明: 随着饲料蛋白水平升高, 方正银鲫幼鱼增重率、特定生长率、饲料效率、蛋白质效率、全鱼粗蛋白含量、肝脏谷丙转氨酶和肠道胰蛋白酶活性均先升高后降低, 且在蛋白水平为36.16%时最大, 显著高于其他组(P＜0.05); 肝脏总胆固醇和甘油三酯含量均呈逐渐下降趋势, 蛋白水平为30.18%的组显著高于除33.13%组以外的其他各组(P＜0.05).方正银鲫幼鱼特定生长率、蛋白质效率与不同蛋白水平分别进行二次回归分析得, 在试验条件下, 方正银鲫幼鱼饲料中最佳蛋白质水平为35.29%—37.07%.

背景:鱼鳞因具备超轻和极好的韧性而成为研究的热点.目的:表征鱼鳞的跨尺度结构及成分.方法:取新鲜鲫鱼鱼鳞,去离子水清洗,进行光学显微镜、扫描电镜、X射线能谱、X射线衍射、傅里叶红外光谱和热分析.结果与结论:①光镜下显示,鱼鳞外表面较粗糙,整体分为遮盖区和暴露区两部分,鱼鳞整体呈现出不规则的六边形状态,以覆瓦形式排列于鱼体表面,形成微观的波纹状表面结构;②扫描电镜显示,鱼鳞截面粗略分为5层,第3,4层呈现出纤维状态,第1,2,5层为致密的层;前3层的主要元素为碳、氧、磷和钙,第4层主要有碳、氧和氮,且含有少量其他元素,第5层仅含有碳和氧;③红外光谱分析显示,鱼鳞外表面主要为无机物;内表面主要为有机物,还有少量无机成分;④X射线衍射分析显示,鱼鳞因以有机成分为主,未显示无机成分峰值,将鱼鳞适当处理后,结果显示其无机成分主要为羟基磷灰石;⑤热分析显示,鱼鳞的主要成分为有机质;⑥结果表明,鱼鳞是由有机胶原蛋白和无机羟基磷灰石组成的层状复合结构,这种复合结构赋予了鱼鳞极好的韧性,使其能有效防护内部组织受到侵袭和伤害.

目的 本文针对成体稀有鮈鲫的消化系统和神经系统进行了组织学观察和描述,配合系列的图文介绍,为脊椎动物的消化系统及神经系统的结构功能进化和其它相关的研究提供更加完整的组织学背景.方法 健康的成体稀有鮈鲫经固定、脱钙,脱水,透明,包埋蜡块制成3 μm厚度的组织切片,H.E染色制片,于光学显微镜下观察拍摄组织学照片,进而对其相应组织器官进行描述.结果 稀有鮈鲫的口咽部可由咽齿与后续肠道分界,稀有鮈鲫的肠道前端呈“Z”字型膨大,但其后续肠道基本呈直线形.稀有鮈鲫的肝脏虽有清晰的中央静脉等结构,但不成典型的分叶状.胆囊独立存在,位于胸腔前端,与心脏毗邻.胰腺或肝胰腺未能在稀有鮈鲫中被发现.作为稀有鮈鲫神经中枢的脑部,其各部分结构较为完全,可见清晰的端脑、间脑、中脑、后脑和脑脊髓.并有脑神经从脑的背侧、腹侧发出.位于背侧脊椎的椎间孔中的脊髓可见分明的灰质与白质结构.结论 稀有鮈鲫的消化系统符合鲤科鱼类无胃特点,但其肠道前后段有明显差异.该物种神经系统发育较为完全.