目的:在原核系统中表达流感病毒血凝素(hemagglutinin，HA)头部蛋白并进行血清学分析。方法:将H1N1和H3N2型流感病毒的HA头部蛋白编码基因克隆到pET-22b(+)原核表达质粒中，通过IPTG诱导，在大肠埃希菌BL21中获得含有HA头部与His-Tag的融合蛋白rH1N1-HA和rH3N2-HA。SDS-PAGE分析IPTG诱导前后的融合蛋白，验证表达的准确性，Western blot验证重组蛋白的表达。纯化重组蛋白，多剂次免疫家兔，获得针对H1N1-HA和H3N2-HA头部的多克隆抗体。同时，重组蛋白免疫BALB/c小鼠，评价其免疫原性。结果:rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白在小鼠体内诱导了滴度高于40的血凝抑制抗体，可作为一种保护性抗原。rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白制备的多克隆抗体，可作为Western blot、ELISA等免疫学应用的重要材料。结论:本研究制备的HA头部蛋白可作为一种保护性抗原，在小鼠体内诱导保护性抗体。HA头部制备的多克隆抗体，可用于甲型流感病毒的免疫学和血清学研究。

目的:探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后发生移植物抗宿主病（GVHD）并出现新的T细胞受体（TCR）基因克隆性重排的临床意义。方法:回顾性分析2018年12月及2020年3月河南大学人民医院收治的2例行allo-HSCT后发生GVHD，随后出现新的TCR基因克隆性重排患者的临床资料，并进行相关文献复习。结果:例1诊断为外周T细胞淋巴瘤-非特指型（PTCL-NOS），行同胞全相合allo-HSCT后发生重度急性移植物抗宿主病（aGVHD），后逐渐出现肝脏慢性移植物抗宿主病（cGVHD）、皮肤cGVHD，并检测出新的TCR基因克隆性重排。例2诊断为急性髓系白血病（AML）-M 4，行同胞全相合allo-HSCT后发生重度aGVHD、肝脏cGVHD，并检测出TCR基因克隆性重排。 结论:allo-HSCT后出现TCR基因克隆性重排现象并非一定提示肿瘤，可能与GVHD导致的淋巴细胞发育紊乱有关，应进行综合评判。

目的:分析1例A w37B亚型患者及其家系的血清学和分子特征，探讨其分子生物学机制及在疑难血型鉴定和临床输血中的意义。 方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-sequence specific primer，PCR-SSP)进行 ABO基因分型，并对 ABO基因的全部外显子进行扩增产物直接测序。进一步对第6、7外显子进行克隆测序。 结果:先证者红细胞为A弱B表型，其血清样本中含有弱反应性抗-A抗体，依据血清学特征可定义为A wB血型。血型基因分型检测到 A和 B等位基因。基因克隆测序显示在 A等位基因第7外显子存在 ABO* AW.37的特征性变异c.940A>G，导致多肽链第314位的赖氨酸(Lys)被谷氨酸(Glu)替换。同时测序发现先证者的女儿遗传了 ABO* AW.37等位基因。 结论:ABO血型基因第7外显子c.940A>G变异导致α-1，3-N-乙酰半乳糖基转移酶活性降低，产生A w37表型。

目的:探讨原发于输尿管的滤泡性淋巴瘤（FL）的病理诊断及鉴别诊断要点。方法:回顾性分析中国医学科学院肿瘤医院2023年6月收治的1例输尿管原发FL患者的临床病理资料，并复习相关文献。结果:患者为老年男性，因体检发现左侧输尿管中上段占位半个月就诊。既往有尿路结石病史。因术前影像资料难以明确诊断而行左肾及输尿管全长膀胱部分切除术。镜下形态学与结内滤泡淋巴瘤相同，表现为排列紧密的淋巴滤泡，生发中心极向消失，肿瘤细胞以中心细胞为主，可见散在分布的中心母细胞，未见星空现象；免疫表型示B细胞标志阳性，表达CD10、bcl-6及bcl-2，CD21和CD23显示滤泡树突细胞网存在；抗原受体基因克隆性重排聚合酶链反应显示有B细胞受体克隆性重排；荧光原位杂交显示存在bcl-2基因易位。术后PET-CT检查未发现其他病灶，支持输尿管原发FL诊断。术后行膀胱灌注治疗、局部放疗。结论:输尿管原发FL临床表现无特异性，与输尿管癌在影像学上不能鉴别。肿瘤的形态学观察辅以免疫表型、抗原受体基因克隆性重排及荧光原位杂交检测可明确诊断。需行全身检查除外系统性FL累及输尿管可能。

目的:探讨血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL）伴单克隆性浆细胞增生的临床病理学特征。方法:收集福建医科大学附属龙岩第一医院2019和2021年期间诊断的2例AITL伴单克隆性浆细胞增生病例，采用HE、免疫组织化学染色，观察组织学形态、免疫表型特征，原位杂交的方法检测EB病毒编码RNA，聚合酶链反应（PCR）检测免疫球蛋白（Ig）基因和T细胞受体（TCR）基因克隆性重排，并结合文献进行复习。结果:2例AITL伴单克隆性浆细胞增生的病例均为女性，例1和例2患者年龄分别为72岁和48岁；例1为腹股沟淋巴结，例2为颈部淋巴结。主要临床症状为全身淋巴结无痛性肿大，例1伴低热和胸腹腔积液，例2伴卵巢受累。光镜下，淋巴结结构完全或部分破坏，瘤细胞中等到大，胞质丰富、淡染，核不规则、扭曲或圆形，背景见多种炎性细胞浸润，其中浆细胞数量突出，例2伴有较多B免疫母细胞增生。在免疫表型上，CD21示紊乱增生的滤泡树突细胞网，肿瘤细胞表达多个T细胞标志物CD4（2/2）、CD3（2/2）、CD2（2/2）、CD7（2/2）和CD5（1/2）；大部分肿瘤细胞表达滤泡辅助T细胞标志物CXCL13、bcl-6、PD1和ICOS，局灶表达CD10。背景中的浆细胞例1呈Lambda轻链限制性、例2为Kappa轻链限制性。分子检测显示例1 IgH基因克隆性重排检测阳性，例2为TCR基因克隆性重排检测阳性。结论:AITL伴单克隆性浆细胞增生罕见，病变淋巴结内可伴有明显B免疫母细胞增生，IgH基因可呈克隆性重排，易误诊为浆细胞病变或B细胞淋巴瘤，充分认识AITL多样的形态学及基因重排特征有助于避免误诊。

目的:探讨进行性转化生发中心样滤泡T细胞淋巴瘤（PTGC样FTCL）的临床病理学特征。方法:收集首都医科大学附属北京友谊医院病理科2017年1月至2022年1月14例PTGC样FTCL，分析其临床特征、病理形态、免疫表型及EB病毒感染状态。对10例行T细胞受体基因检测，对8例行免疫球蛋白（Ig）基因克隆性检测。结果:（1）患者男性10例，女性4例，男女比为5∶2，发病年龄32~70岁，中位年龄61岁，起病时均有淋巴结肿大，按Ann Arbor系统分期，Ⅰ~Ⅱ期7例，Ⅲ~Ⅳ期7例，有B症状者7例，脾肿大者4例，伴皮疹及皮肤瘙痒者2例。10例获得原单位病理报告，3例诊断为小B细胞淋巴瘤，3例诊断为经典霍奇金淋巴瘤，2例诊断为不除外血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL），1例诊断为EB病毒相关淋巴组织增生性病变，1例诊断为外周T细胞淋巴瘤（PTCL）伴多量B细胞反应。（2）形态学显示由形态成熟的小淋巴细胞构成的深染大结节，结节内可见散在及灶状分布的异型瘤细胞，胞质淡染或透明。2例在深染结节内见增生的生发中心。5例在结节内还见到散在霍奇金（HRS）样大细胞。（3）免疫组织化学染色结果显示构成深染大结节的小淋巴细胞表达CD20、PAX5和IgD，胞质淡染或透明的异型细胞表达CD3（14/14）、CD4（14/14）、PD1（14/14）、ICOS（14/14）、CD10（9/14）、bcl-6（12/14）和CXCL13（10/14）；10例（10/14）瘤细胞表达CD30。5例有HRS样大细胞的病例，HRS样大细胞不表达CD3和白细胞共同抗原（LCA），表达CD20（2/5）、PAX5（5/5）、CD30（5/5）、CD15（2/5）、OCT2（5/5）及BOB1（2/5），并见肿瘤性滤泡辅助T细胞包绕HRS样细胞形成花环结构。（4）EB病毒编码的RNA（EBER）原位杂交显示14例中8例见散在较小的B细胞阳性，包括3/5例具有HRS样大细胞的病例，同时显示HRS样细胞阳性。（5）10例病例（包括5例有HRS样大细胞的病例）行T细胞受体基因重排检测均呈单克隆性，8例（包括5例有HRS样大细胞的病例）行Ig基因重排检测均呈多克隆性重排。结论:PTGC样FTCL是少见的起源于滤泡辅助T细胞的肿瘤，和AITL的鉴别在于前者形成滤泡结构，缺乏滤泡外的滤泡树突细胞网增生和多形性浸润。该病还需和淋巴细胞丰富的经典霍奇金淋巴瘤及低级别B细胞淋巴瘤鉴别。

目的:研究FcγRIIb基因修饰树突状细胞对大鼠原位肝移植术后肝功能及病理排斥反应的影响。方法:利用基因克隆技术构建含Lewis大鼠FcγRIIb基因的重组慢病毒表达载体TRE-FcγRIIb。分别包装TRE-FcγRIIb表达病毒与TET-on可诱导病毒，用其共感染DA大鼠骨髓来源未成熟树突状细胞并检测FcγRIIb的表达。将供体DA大鼠与受体Lewis大鼠按照体重进行配对后随机分为三组，三组均行DA-Lewis的大鼠原位肝移植术。对照组(A组)不给予任何预处理。环孢素A组(B组)术后第2天开始给予环孢素A处理。FcγRIIb基因修饰未成熟树突状细胞组(C组)术前1 d供体大鼠静脉注射FcγRIIb修饰的DA大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(1×10 6细胞)。术后第7天分别取血和肝脏检测肝功能和肝脏病理变化。 结果:C组术后第7天肝功能异常明显低于对照组( P<0.05); C组术后第7天肝脏病理排斥反应明显低于对照组( P<0.05)。对照组中的大鼠平均存活天数为12.8 d；B组的大鼠平均存活天数为65.3 d；C组的大鼠平均存活天数为58.5 d。 结论:FcγRIIb基因修饰未成熟树突状细胞可以降低大鼠原位肝移植术后肝功能异常，减轻术后大鼠肝脏急性排斥反应。

淋巴瘤是我国常见的恶性肿瘤之一，诊断难度较大。目前淋巴瘤的诊断主要基于细胞形态学（cell morphology）、细胞免疫学（cellular immunology）、细胞遗传学（cytogenetics）和分子生物学（molecular biology）4大类检查。其中，分子检测是诊断淋巴瘤尤其是疑难病例的重要手段。基于肿瘤组织的所有细胞均来源于同一个癌变细胞这一理论基础，我们可以利用细胞克隆性分析来辅助进行淋巴细胞恶性肿瘤的诊断。由于99%B细胞淋巴瘤和94%T细胞淋巴瘤分别伴有免疫球蛋白基因和T细胞受体基因的克隆性重排，因此免疫球蛋白基因或T细胞受体基因克隆性重排的分子检测可作为克隆性分析的方法之一。淋巴瘤基因重排检测技术及解读中国专家共识（2023版）编写组结合临床实践经验，主要基于临床常用的聚合酶链反应技术对淋巴瘤基因重排相关工作原理、方法及手段进行了相关阐述，以进一步指导与规范我国淋巴瘤基因重排检测工作的进行。

目的:探讨细胞毒性T细胞淋巴瘤（cytotoxic T-cell lymphoma，CTL）临床病理学特点及预后。方法:回顾性收集2008至2020年首都医科大学附属北京友谊医院、解放军联勤保障部队第九八九医院（原第一五二中心医院）和河北医科大学第四医院共计134例CTL患者的临床病理资料，检测肿瘤细胞的免疫表型、EB病毒感染状态和T细胞受体（TCR）克隆性，分析患者的临床病理特征和预后。结果:134例CTL患者中，男女比例1.7∶1.0，中位年龄为49.5岁（范围3~83岁），60岁以下者100例（74.6%）。有B症状者占46.9%（53/113）。多数患者表现为全身浅表淋巴结肿大。按Ann Arbor系统分期，Ⅰ~Ⅱ期占36.8%（39/106），Ⅲ~Ⅳ期占63.2%（67/106）。伴有结外侵犯者占51.6%（66/128）。脾脏受累占24.2%（31/128）。形态学上表现为异型淋巴细胞弥漫性生长，浸润破坏正常组织结构。免疫组织化学染色显示肿瘤细胞阳性表达T细胞抗原（CD2、CD3、CD5、CD7），表达减弱或表达缺失其中一个或多个抗原者占72.0%（77/107）。根据肿瘤细胞CD4和CD8的表达量分组，其中CD8 +>CD4 +组70例（52.2%）。T细胞胞质内抗原1（TIA1）和颗粒酶B表达率分别为99.2%（119/120）和79.8%（95/119）。CD20异常表达率27.6%（37/134），CD56阴性。Ki-67阳性指数中位值为45.0%（范围5%~80%）。EB病毒编码的小RNA原位杂交检测均为阴性。TCR基因克隆性检测，所检的49例样本TCR基因重排结果均为阳性，其余病例未检测。91例患者获得随访，中位随访36个月（范围1~240个月），死亡40例（44.0%）。疗效达完全缓解者23例（含13例局限性单一结外肿块患者）。患者3年和5年总生存率分别为53.5%和49.4%。单因素分析结果显示B症状、脾脏受累、结外侵犯、临床分期、CD8 +>CD4 +表型、CD20异常表达和Ki-67阳性指数（>60%）对患者总生存率的影响差异具有统计学意义（ P<0.05）。将单因素分析有统计学意义的指标纳入多因素Cox回归模型，结果显示脾脏受累和CD8 +>CD4 +表型是影响CTL患者总生存率的独立预后因素。 结论:CTL以60岁以下成年男性多见，常伴有B症状，结外侵犯比例高，CD8阳性表型更多见；脾脏受累和CD8 +>CD4 +表型是CTL预后风险评估的独立预测因子；部分局限性单一结外CTL患者预后良好。