为研究混合植物油替代鱼油对不同品种异育银鲫(Carassius gibelio)生长和脂肪代谢的影响,以鱼油(FO)和混合植物油(BVO,菜籽油:大豆油:棕榈油=55％:25％:20％,以模拟鱼油的脂肪酸组成)为饲料脂肪源,配制等氮等脂饲料配方,分别饲喂异育银鲫"中科3号"(5.01±0.05)g和"中科5号"(5.02±0.05)g,养殖周期70d.在饲料脂肪源效应上,BVO组摄食率显著高于而饲料效率显著低于FO组(P＜0.05).BVO组不同品种异育银鲫肌肉srebp-1c和acc的基因表达量显著升高,并造成体脂肪的显著积累(P＜0.05).BVO组显著改变了鱼体肌肉脂肪酸组成,分别上调和下调了肌肉Σn-6 PUFA和Σn-3 PUFA的相对含量(P＜0.05).在品种方面,不论摄食何种脂肪源,异育银鲫"中科5号"摄食率显著低于而饲料效率显著高于"中科3号"(P＜0.05)."中科5号"肌肉脂肪分解和脂肪酸β氧化基因hsl和aco3及肝脏aco3、fabp1b和fatp1的表达量均显著高于"中科3号"(P＜0.05),且鱼体脂肪含量显著低于"中科3号",表明"中科5号"可以更好地利用饲料脂肪来为机体供能.脂肪源和品种对异育银鲫特定生长率的影响存在交互作用,但"中科5号"摄食BVO组特定生长率与"中科3号"摄食FO组无显著性差异(P＞0.05),表明了植物脂肪源在"中科5号"饲料应用中的巨大潜力.综上,研究阐述了不同品种异育银鲫对饲料脂肪源的利用差异及分子机制,为异育银鲫饲料脂肪源筛选和品种选育提供了理论和实践依据.

实验以初重为(12.71±0.11)g的异育银鲫"中科5号"(Carassius gibelio var.CAS V)为研究对象,基于异育银鲫必需氨基酸需求量,探究在低蛋白饲料中补充必需氨基酸对异育银鲫生长、消化、氨基酸转运和mTOR信号通路相关基因表达的影响.实验设计3组等能饲料:CON组(35％粗蛋白)、LP组(28％粗蛋白)和LP+EAA组(28％粗蛋白+晶体氨基酸),养殖周期为50d.实验结果显示:低蛋白饲料中补充必需氨基酸显著提高异育银鲫生长性能(P＜0.05),并与CON组无显著差异(P＞0.05);LP+EAA组的肝脏谷草转氨酶活性显著高于LP组(P＜0.05),而谷丙转氨酶活性各组间无显著差异(P＞0.05);补充必需氨基酸对肠道中胰蛋白酶和淀粉酶活性有显著影响(P＜0.05),而对糜蛋白酶和脂肪酶无显著影响(P＞0.05).肠道中cat2、asct2和b0at1三种氨基酸转运蛋白显著上调(P＜0.05),LP组的b0,+at的相对表达量显著下调(P＜0.05),而pept1的表达各组间无显著差异(P＞0.05);肝脏中LP组tor相对表达量显著降低(P＜0.05),LP+EAA组的s6k1表达水平显著上调(P＜0.05),而4ebp2和eif4e的相对表达量在各组间无显著差异(P＞0.05);背肌中LP+EAA组的tor表达水平显著上调(P＜0.05),LP组的eif4e表达水平显著下调(P＜0.05),而s6k1和4ebp2的相对表达量在各组间无显著差异(P＞0.05).综上所述,向异育银鲫"中科5号"幼鱼饲料中补充必需氨基酸至需求量可以将饲料蛋白水平由35％降至28％,而不会对生长、氨基酸转运和mTOR信号通路相关基因表达等产生负面影响.

为研究不同浓度磺胺嘧啶胁迫下鱼肝脏、肾脏、鳃、肠道、肌肉等组织的病理变化,以异育银鲫为研究对象,采用室内模拟半静态法分别将其置于低(1μg/L)、中(100μg/L)、高(10 mg/L)三个不同浓度的磺胺嘧啶水环境中养殖28d.结果显示,不同磺胺嘧啶浓度胁迫下,异育银鲫的肝脏、肾脏、鳃、肠道、肌肉组织均产生了不同程度的病理变化,主要表现为肝细胞淤血,空泡化,核固缩,细胞溶解坏死;肾小管上皮细胞空泡化,肾小球细胞坏死,肾间质淤血;鳃小片上皮细胞肿大、增生,鳃丝成板状,鳃小片结构消失;肠道微绒毛脱落,黏膜下层增厚,黏膜皱襞破损;肌纤维排列疏松、紊乱、断裂.各组织中肝脏、鳃、肾脏损伤尤为严重,且随着磺胺嘧啶处理时间的延长,剂量的增加均会导致组织损伤加重.试验可为水产养殖过程中合理使用磺胺类药物提供一定的理论指导.

采用反转录PCR和cDNA末端快速扩增技术从异育银鲫Carassius auratus gibelio肝脏中克隆了过氧化物还原酶(Prx)基因的cDNA全长序列.结果显示,异育银鲫过氧化物还原酶(CaPrx)基因cDNA全长1 035 bp,开放阅读框长594 bp,编码197个氨基酸.在氨基酸序列的N端和C端各有一个保守的Cys残基,属于2-半胱氨酸类Prxs家族.多序列比对和系统进化树分析表明,异育银鲫与鲫Carassius auratus、青鱼Mylopharyngodon piceus、斑马鱼Danio rerio、犀角金线鲃Sinocyclocheilus rhinocerous和朝鲜鳑鲅Rhodeus uyekii等鱼类的Prx基因具有很高的同源性.实时荧光定量PCR结果显示,CaPrx基因在异育银鲫体内广泛表达,在血细胞和肝脏中表达量最高,在鳃和头肾的表达量较少.在感染鲤疱疹病毒Ⅱ型的个体中,肝脏和脾脏的CaPrx基因表达量显著下降,表明其抗氧化作用因病毒的感染而受到了一定的破坏.

为了揭示F系和A+系的遗传差异以及解析F系的遗传特征,研究基于前期基因组Survey分析发现一个特异于银鲫F系大小为782 bp片段的基础,首先采用混合池筛选方法从银鲫F系BAC文库中筛选出一个包含该特异片段的BAC克隆(F782-BAC).鸟枪法测序结果表明,F782-BAC序列全长大小为172625 bp,富含转座子序列,包含1个具备完整结构的Tc l-like转座子,以及不具备完整结构的transposase-like、PIF/Harbinger、target-primed reversed transcription(TPRT)和transpon X-element等6个转座子.用地高辛标记F782-BAC质粒得到的DNA探针进行了银鲫F和A+系有丝分裂中期相的染色体荧光原位杂交,结果表明不论是在F系还是A+系的有丝分裂中期相中,3个阳性荧光信号皆清晰地定位于3条大小相同的近端着丝粒染色体短臂的近着丝粒位置.进一步开展了银鲫A+系相应同源的F782-BAC序列的差异鉴定和序列分析,揭示A+系缺失了大小为3395 bp的一段序列,且特异于银鲫F系大小为782 bp的片段正好位于其中,并由此筛选出可作为区分银鲫F系和A+系的SCAR标记.研究为银鲫的多倍化起源提供了进一步的染色体定位证据,鉴定的SCAR标记可为银鲫分子标记辅助育种提供新的遗传标记.

为构建鱼类生长、饲料需求和污染排放预测模型, 提高鱼类精准投喂管理水平, 通过收集大量文献中异育银鲫(Carassius auratus gibelio)生长数据(异育银鲫体重0.25-550 g),运用特定增长率(SGR)、日增长率(DGC)、日均增重(ADG-Linear)、热积温系数(TGC)和校正后的热积温系数(Rev.TGC)等生长模型计算其生长速率, 并通过计算实际观测值和预测值最小残差和法选出最适生长模型.结果发现, 在用TGC模型计算其生长率时, 异育银鲫在其生长周期中含有3个异速生长点, 根据该点的位置, 可以将异育银鲫的生长周期分为3个阶段: 0.25-13.1 g (第一阶段)、13.1-172.8 g (第二阶段)、>172.8 g (第三阶段).在这3个阶段中调整后的TGC模型比其他模型(SGR、DGC、ADG)可以更好地预测实际养殖中异育银鲫的生长性能.鱼类在不同的生长阶段对饲料的需求量由消化能决定, 通过计算鱼体储积能、基础代谢能、热增能以及尿液和鳃的代谢能, 可以估算异育银鲫的消化能, 从而确定其饲料需求量.经估算, 对于体重为0.25-506 g的异育银鲫, 每生产1 kg鱼, 其消化能需求量约为1.94×104kJ.在模型验证时, 以粗蛋白分别为43%、37%、31%的饲料投喂不同生长阶段的异育银鲫, 并利用营养物质平衡法估计废物排放量.研究发现, 实测值与模型预测值显著相关.模型可以在异育银鲫实际养殖过程中, 有效预估某个生长阶段异育银鲫的体重、所需要的饲料量以及氮、磷污染物排放量, 有望为异育银鲫差异化上市、节省饲料成本、减少饲料浪费以及养殖场的污染评价提供有效的预判工具.

为考察鲤科鱼类易钓性种内差异的表型基础、生态结果及饥饿响应, 研究以异育银鲫(Carassius auratus gibelio)幼鱼为实验对象, 在饥饿前(对照组)测定其表型特征(能量代谢、游泳能力和个性行为)并垂钓,随后在饥饿1周后再次垂钓(饥饿组), 最后进行2周的恢复摄食生长实验(恢复组).垂钓实验具有4个重复, 每个重复的样本量为40尾, 垂钓1.5h即停止, 垂钓20尾为钓出组, 剩余20尾为未钓出组.研究发现: 除钓出组的相对代谢空间(FAS)小于未钓出组外, 钓出组的外部形态(体重、体长和肥满度)、能量代谢参数(标准代谢率SMR、最大代谢率MMR和代谢空间AS)、游泳能力(最大匀加速游泳能力Ucat和最大有氧运动能力Ugt)及个性行为(探索性、活跃性和勇敢性)与未钓出组均无明显差异(所有P＞0.05); 在经历捕食者模拟袭击后, 实验鱼勇敢性的潜伏时间比大于探索性, 导致勇敢性的运动时间比和穿门频率小于探索性.SMR与Ucat及Ugt不相关(P＞0.05), 但MMR和AS与Ucat及Ugt均呈正相关(P＜0.05); 能量代谢参数与个性行为存在部分相关.饥饿增加异育银鲫的垂钓总时间、单尾平均垂钓时间和单尾垂钓时间的变异系数.钓出组在饥饿期的特定生长率(SGR)小于未钓出组,而恢复期钓出组的SGR与未钓出组无显著差异;除MMR和AS外, SMR与饥饿期及恢复期的SGR均呈负相关( P＜0.05),即SMR越高个体在饥饿期间的体重下降更快,在恢复摄食后生长却较慢.研究表明: 异育银鲫幼鱼的易钓性可能不具备表型基础, 并且因环境食物匮乏而降低; 虽然饥饿期间两种易钓性表型个体的生态结果存在差异, 但该生长差异在营养恢复后消失, 表明异育银鲫的易钓性具有一定的环境依赖性.

自然界鱼类不断遭受人类垂钓压力的影响,鱼类易钓性存在明显的种内个体差异,并且不同种鱼类的易钓性不尽相同.为考察不同种鲤科鱼类的易钓性差异及其是否与外部形态存在关联,本研究以中国广泛养殖的鲤科鱼类异育银鲫(Carassius auratus gibelio)和鲤(Cyprinus carpio)幼鱼为实验对象,在实验室(25±0.5)℃条件下对大小相当、体重相近的3个处理组[异育银鲫、鲤及混合组(异育银鲫+鲤)]进行垂钓;每个处理组均设3个重复,每个重复包括40尾实验鱼,每个重复垂钓20尾鱼则停止该组的垂钓活动,记录垂钓成功每尾鱼的时间和序号,计算垂钓总时间及单尾被钓平均时间.结果表明:混合组鲤的体长大于其他组;鲤幼鱼组的肥满度显著高于其他组,混合组鲤和异育银鲫高易钓性个体的肥满度均大于低易钓性个体;在实验过程中,3个实验组的垂钓总时间无明显差异,但单尾被钓平均时间存在明显差异,其中混合组鲤单尾被钓平均时间显著长于异育银鲫组;混合组中异育银鲫幼鱼被钓的数量比例明显高于该组的鲤幼鱼,而钓出鲤幼鱼的平均被钓次序号大于异育银鲫幼鱼.研究表明:相比较于鲤幼鱼,异育银鲫幼鱼更易被钓;两种鲤科鱼类易钓性差异可能与二者生态习性及形态密切有关.

[目的]了解水环境中磺胺嘧啶对异育银鲫肠道微生物组成及多样性的影响.[方法]异育银鲫分别暴露于0、1、100、10000 μg/L的磺胺嘧啶水溶液中28 d,根据细菌16S rRNA的保守性设计引物,构建文库,进行高通量测序,最后进行数据分析.[结果]厚壁菌门、变形菌门和拟杆菌门是异育银鲫肠道中主要的细菌类群,经不同浓度磺胺嘧啶胁迫处理后,不仅弧菌、假单胞菌属和幽门螺杆菌属的数量显著减少,双歧杆菌、乳酸菌和芽孢杆菌的含量也下降.Venn图、稀释性曲线以及多样性指数分析结果表明,磺胺嘧啶胁迫处理后异育银鲫肠道微生物的多样性显著降低.[结论]磺胺嘧啶会使异育银鲫肠道微生物多样性显著降低,并且在抑制一些病原菌生长的同时对一些有益菌也产生了不良的影响.此结果为磺胺类药物的合理使用以及其对异育银鲫的健康生长和病害防控提供一定的理论支持.

实验以异育银鲫“中科3号”[Carassis gibelio var.CAS Ⅲ,平均体重(116.46±2.09) g)]为研究对象,通过模拟汽车运输振动台模拟4h运输,研究模拟运输对异育银鲫血液生理生化指标、体色和肉质及水质的影响.研究结果表明:经过模拟运输后,运鱼袋内水体氨氮显著升高(P＜0.01),pH显著下降(P＜0.05),溶解氧含量升高(P＜0.05).模拟运输后异育银鲫血浆中皮质醇、葡萄糖和丙二醛浓度显著升高(P＜0.01);乳酸浓度显著降低(P＜0.01);谷胱甘肽过氧化物酶活力显著降低(P＜0.05);超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力降低但差异不显著(P＞0.05).在模拟运输4h后,异育银鲫背部亮度值(L*)显著降低(P＜0.01),黄色值(b*)在背部和侧线部较模拟运输前显著降低(P＜0.01),在腹部较模拟运输前显著降低(P＜0.05),侧线部和腹部的亮度值(L*),以及背部、侧线部和腹部的红色值(a*)下降但差异不显著(P＞0.05).在模拟运输后,异育银鲫背肌内聚性、咀嚼性和回复性显著降低(P＜0.05),硬度、胶黏性、弹性和黏性变化但差异不显著(P＞0.05).实验结果表明,4h模拟运输能够引起运鱼袋水体水质情况改变,诱导异育银鲫鱼体的应激反应,导致实验鱼体色和鱼肉品质相关指标的变化,降低了鱼肉品质部分指标.