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益脉降脂汤含药血清对THP-1源性泡沫细胞模型miRNA差异表达分析
编辑人员丨2024/3/16
目的:探讨益脉降脂汤含药血清干预THP-1源性泡沫细胞模型后差异表达miRNA及相关生物功能、信号通路.方法:实验分为巨噬细胞组、泡沫细胞模型组、益脉降脂含药血清组,以佛波酯对THP-1细胞诱导为巨噬细胞,经诱导分化的巨噬细胞给予ox-LDL建立泡沫细胞模型,以益脉降脂汤大鼠血清干预泡沫细胞.提取各组细胞Total RNA进行miRNA测序,筛选差异表达miRNA,预测相关靶基因后进行GO分析、KEGG分析,建立蛋白互作网络、miRNA-靶基因互作网络,RT-qPCR验证改善动脉粥样硬化可能信号通路.结果:空白组与模型组差异 miRNA 为 hsa-miR-302c-3p、hsa-miR-302d-3p、hsa-miR-30d-3p、hsa-miR-3189-3p、hsa-miR-374b-5p、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-4781-3p、hsa-miR-663a;模型组和益脉降脂含药血清组差异miRNA为hsa-miR-3150a-3p、hsa-miR-7704、hsa-miR-877-3p、hsa-miR-150-5p、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-374c-3p、hsa-miR-374b-5p;模型组与益脉降脂含药血清组差异miRNA预测靶基因显示主要富集于MAPK信号通路、ErbB信号通路、Hippo信号通路、Wnt信号通路等信号通路;SCN1A、PRKACA、MECP2、EIF4E、SRSF1、MBNL1、PRKCA、PPARGC1A可能是益脉降脂汤含药血清向THP-1源性泡沫细胞发挥作用潜在关键靶标.结论:hsa-miR-374c-3p、hsa-miR-423-5p、hsa-miR-374b-5p是益脉降脂汤含药血清作用于泡沫细胞重要的miRNAs,差异表达显著的miRNA以及显著富集的相关信号通路可为诊断和治疗动脉粥样硬化提供新的思路.
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编辑人员丨2024/3/16
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益脉降脂汤含药血清对THP-1源性泡沫细胞增殖活性和胆固醇含量的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨益脉降脂汤大鼠含药血清对THP-1源性泡沫细胞增殖活性和细胞内胆固醇含量的影响.方法 采用THP-1细胞为泡沫细胞建模来源,使用佛波酯(PMA)诱导分化成巨噬细胞,采用80 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导建立泡沫细胞模型;将细胞分为巨噬细胞组、模型组、阿托伐他汀(西药)组及益脉降脂汤(中药)低、中、高剂量组,其中巨噬细胞组和模型组使用10％大鼠正常空白血清干预,其余各组使用相应含药血清干预,干预12、24、48 h后用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,同时检测各组含药血清干预泡沫细胞后细胞内总胆固醇(TC)含量;油红O染色观察各组细胞脂质蓄积情况.结果 巨噬细胞诱导及泡沫细胞模型建立成功;MTT法检测细胞增殖活性结果显示,益脉降脂汤含药血清干预12、24、48 h后,与巨噬细胞组相比,模型组OD值显著减少(P<0.05);与模型组相比,西药组与中药各剂量组的OD值均显著升高(P<0.05).与巨噬细胞组相比,模型组干预不同时间点细胞内TC含量显著增高(P<0.05);与模型组相比,西药组与中药各剂量组细胞内TC含量明显降低(P<0.05);与模型组相比,西药组及中药各剂量组泡沫细胞的脂质蓄积明显减少(P<0.05).结论 益脉降脂汤含药血清可能有提高泡沫细胞生存活性,减少泡沫细胞凋亡、改善泡沫细胞胆固醇蓄积的作用.
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编辑人员丨2023/8/5
