目的:以五倍子中没食子酸为研究对象，探讨Image J软件用于薄层色谱定量的可行性。方法:采用硅胶GF 254薄层板，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲酸（5∶5∶1）为展开剂，紫外光灯（254 nm）下拍照；采用聚酰胺薄膜，以75%乙醇-冰醋酸（50∶1）为展开剂，1%三氯化铁乙醇溶液为显色剂，日光下拍照。将图像导入Image J软件进行分析，以外标两点法计算五倍子中没食子酸含量。采用HPLC法，以甲醇-0.1%磷酸溶液（15∶85）为流动相，在273 nm波长下测定五倍子中没食子酸含量。 结果:硅胶GF 254薄层板没食子酸定量限为0.401 6 μg，线性范围2.855~9.515 μg（ r 2=0.996 0），回收率为105.12%（ RSD=3.48%）；聚酰胺薄膜没食子酸定量限为0.363 4 μg，线性范围1.427~4.758 μg（ r 2=0.991 5），回收率为103.75%（ RSD=4.60%）；HPLC法没食子酸的定量限为4.42 ng，线性范围0.122~0.977 μg（ r 2=0.999 9），回收率为98.30%（ RSD=1.40%），3种方法的精密度、重复性、稳定性 RSD值均<5%。使用Image J测得的没食子酸含量与HPLC测定结果比较，最大相对误差9.30%，最小相对误差1.62%。 结论:Image J软件可用于薄层色谱定量分析，可作为中药质量控制方法的补充。

目的:探究磷酸化聚酰胺-胺(P-PAMAM)树状大分子交联胶原蛋白支架在体内成骨效能.方法:通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)对P-PAMAM进行表征,扫描电镜对胶原蛋白支架、聚酰胺-胺(PAMAM)复合胶原蛋白支架及P-PAMAM复合胶原蛋白支架进行形态表征.将 3 种复合支架植入SD大鼠颅骨骨缺损后,使用Micro-CT三维重建分析骨愈合过程中骨质、骨量的变化,采用HE染色及Masson染色对大鼠颅骨标本进行组织学分析.结果:FTIR显示PAMAM被成功磷酸化;扫描电镜显示,复合支架均具有良好的孔隙;体内成骨实验显示,与胶原蛋白支架和PAMAM复合胶原蛋白支架相比,P-PAMAM复合胶原蛋白支架具有更好的成骨诱导作用.结论:P-PAMAM树状大分子复合胶原蛋白支架在体内具有促进成骨作用.

背景:聚多巴胺仿生法被证实可在多种不同金属表面制备羟基磷灰石涂层,但目前缺乏利用其在人工合成材料表面制备羟基磷灰石涂层的研究.目的:利用聚多巴胺仿生法在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,评价其对骨髓间质干细胞生物学的影响.方法:采用聚多巴胺仿生法在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,获得羟基磷灰石-聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(hydroxyapatite-polydopamine-nano-hydroxyapatite/polyamide66,HA-PDA-HA/P66)材料,通过X射线光电子能谱分析和扫描电镜检测羟基磷灰石涂层,并检测材料的表面粗糙度及亲水性.将骨髓间质干细胞C3H10T1/2分别与纳米羟基磷灰石/聚酰胺66、聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66、HA-PDA-HA/P66材料共培养,培养6,12 h后,采用CCK-8法检测细胞黏附情况;培养1 d,通过扫描电镜观察细胞形态;培养1,3 d,DAPI染色检测细胞增殖;成骨诱导培养7,10 d,检测细胞碱性磷酸酶活性;成骨诱导培养14 d,茜素红染色检测细胞矿化能力.结果与结论:①X射线衍射和扫描电镜证实成功制备了羟基磷灰石涂层,且羟基磷灰石涂层明显提高了材料亲水性和表面粗糙度;②培养6,12 h,HA-PDA-HA/P66材料表面黏附的细胞数明显多于其余两种材料(P<0.05);培养1 d,在HA-PDA-HA/P66及聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66材料上的细胞呈多边形,且有较多伪足;培养1,3 d,HA-PDA-HA/P66材料表面的细胞增殖能力高于其余两种材料(P<0.05);④成骨诱导7,10 d,HA-PDA-HA/P66材料表面细胞内碱性磷酸酶活性高于其余两种材料(P<0.05);成骨诱导14 d,HA-PDA-HA/P66材料周围钙结节形成多于其余两种材料;⑤结果表明,利用聚多巴胺仿生法可在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,且涂层具有良好的生物活性与生物相容性.

目的 分离和纯化两色金鸡菊中的黄诺玛苷单体,并研究其抗血小板聚集的作用.方法 先用55％乙醇回流提取两色金鸡菊干燥花序得到两色金鸡菊醇提物(ethanol extract,ETE),再用乙酸乙酯萃取得到的水层部位为乙酸乙酯萃取物(acetic ether extracted residuum,AR),AR在经大孔树脂富集,并收集75％乙醇洗脱部位得到醇提纯化物(eth-anol extract purification,ETEP),ETEP经聚酰胺柱层析分离得到一个黄酮类组分黄诺玛苷单体;静脉采集健康受试者的血液,随机分为空白对照组(0.9％氯化钠注射液)、ETE组(大900μg·mL-1、中300μg·mL-1、小100μg·mL-1剂量组)、黄诺玛苷组(大90μg·mL-1、中30μg·mL-1、小10μg·mL-1剂量组)、阿司匹林(Acetylsalicylic acidsigma,ASA)组(500μg·mL-1),建立二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、凝血酶诱导的血小板聚集模型.依据Born比浊法,通过血小板聚集的抑制率来观察黄诺玛苷的抗血小板聚集.结果 从两色金鸡菊花序中成功的分离得到纯度达到92％以上的黄诺玛苷的单体化合物;抗血小板聚集实验通过和空白对照组相比对ADP诱导的血小板聚集有抑制作用的是醇提物的中剂量组、大剂量组和黄诺玛苷大剂量组,差异具有统计学意义(P<0.01);对凝血酶诱导的血小板聚集有抑制作用的是醇提物的中剂量组和黄诺玛苷中剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05);在大剂量醇提物组和大剂量的黄诺玛苷组中,凝血酶诱导的血小板聚集受到抑制,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 从两色金鸡菊中分离得到的黄诺玛苷单体是抗血小板聚集的主要活性物质之一.

目的:探讨粘接剂负载羧基化聚酰胺-胺/无定形磷酸钙(PAMAM—COOH/ACP)纳米复合体对树脂-牙本质粘接性能的影响.方法:收集新鲜拔除的无龋无白斑人前磨牙或第三磨牙80个并制成统一牙本质粘接试样,将80个试样随机分为4组(A组、B组、C组、D组).A组采用自酸蚀粘接剂进行树脂粘接,B组、C组、D组分别采用含0.3wt％ACP、0.3wt％PAMAM—COOH和0.3wt％PAMAM—COOH/ACP的自酸蚀粘接剂进行树脂粘接.对各组粘接试样行剪切强度测试,并对测试结果行单因素方差分析.采用扫描电子显微镜(SEM)观察各组牙本质粘接界面断端,并在超景深三维显微系统(50倍)下统计断裂类型.结果:A组、B组、C组、D组剪切强度分别为(8.67±4.78)MPa、(10.11±3.53)MPa、(11.94±4.78)MPa、(12.01±2.91)MPa.C组和D组的剪切强度均高于A组(P＜0.05),B组、C组、D组组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).SEM下观察断端,A组只可见树脂残留,B组可见少量疏松矿化产物生成,C组可见矿化产物深入牙本质内,D组形成致密的矿化产物且牙本质小管管径缩小.各组的断裂模式均以黏附破坏为主,除A组外,其余各组均发生少量内聚破坏或混合破坏.结论:PAMAM—COOH/ACP纳米复合体加入自酸蚀粘接剂中可提高其树脂-牙本质粘接强度.

1,5-戊二胺又名尸胺,是一种重要的生物基聚酰胺生产原料,可以与二元羧酸缩合生成生物基聚酰胺PA5X,其性能可以与石油基聚酰胺材料媲美.生物基聚酰胺以可再生能源为底物,如淀粉、纤维素、植物油等,符合绿色可持续发展战略.1,5-戊二胺的生物合成主要包括微生物从头合成及全细胞催化两种方法,而赖氨酸脱羧酶是其生物合成中的关键酶,该酶主要包括诱导型赖氨酸脱羧酶CadA和组成型赖氨酸脱羧酶LdcC两种.赖氨酸脱羧酶是一种折叠型Ⅰ型磷酸吡哆醛(pyridoxal-5'phosphate,PLP)依赖酶,但该酶在实际反应过程中易受环境因素影响,存在活性不高、结构不稳定等问题.因此,提高赖氨酸脱羧酶催化活性及稳定性成为该领域的研究热点,主要包括分子改造以及固定化研究.文中综述了赖氨酸脱羧酶的作用机理、分子改造技术及固定化策略的研究进展,并对未来进一步提升赖氨酸脱羧酶活性及稳定性策略进行了展望,旨在实现1,5-戊二胺的高效生物制备.

目的:制备并表征羧基化聚酰胺—胺稳定的无定形磷酸钙镁纳米复合体(PAMAM-COOH/ACMP),并初步验证其诱导人牙本质胶原纤维再矿化的能力.方法:在水溶液中制备PAMAM-COOH/ACMP并分别使用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、透射电子显微镜(TEM),选区电子衍射(SAED),能谱面扫描(EDX-Mapping)进行表征,依次获得化学结构、形貌、物相及元素分布信息.在仿生条件下,利用PAMAM-COOH/ACMP诱导完全脱矿的人牙本质胶原纤维模型再矿化,对牙本质进行FTIR、X射线衍射(XRD)及扫描电子显微镜(SEM)检测以评价再矿化效果.结果:FTIR检测结果提示,PAMAM-COOH/ACMP中存在磷酸根基团,碳氮键和酰胺键.TEM、EDX-Mapping及SEAD结果显示,PAMAM-COOH/ACMP为直径60～90nm的近似圆形纳米非晶相颗粒,钙磷镁元素集中分布于颗粒中.SEM结果显示,牙本质表面未见大块沉积矿物,但高倍镜下可见5mg/mL和10mg/mL PAMAM-COOH/ACMP处理组的胶原纤维被连续矿物包裹并使纤维间隙减小.根据XRD与FTIR的检测结果,发现这些新生成的矿物为磷酸钙沉积.结论:成功制备了新型纳米材料PAMAM-COOH/ACMP纳米复合体,该纳米复合体在室温条件下尺寸稳定性佳,具有精确诱导人牙本质胶原纤维再矿化的能力.

目的 采用薄层鉴别法与高效液相色谱法对比寻找出黄连药材与黄连花薹中含量最大的差异性成分,并对其进行鉴定;同时建立一测多评法测定黄连花薹中4个化学成分的含量.方法 采用聚酰胺柱层析等分离纯化手段对黄连花薹与黄连药材差异性成分进行提取、分离、纯化,并采用液质联用以及核磁鉴定的方法对差异性成分进行确证;采用资生堂C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),检测波长为340nm,柱温为40℃,流速为1.0 mL·min-1,进样量为10μ.L,流动相为乙腈(A)-0.1％磷酸(每1000 mL加入20 μL三乙胺)(B),梯度洗脱.以盐酸小檗碱为内标物,计算其他3个成分的相对校正因子,建立用一测多评法和常规外标法测定黄连花薹中4个化学成分的含量,并对两种方法的含量测定结果进行比较.结果 分离鉴定出黄连花薹与黄连药材的差异性成分蒙花苷,同时在各自的线性范围(r＞0.9999)内,芦丁、绿原酸、蒙花苷的相对校正因子分别为2.5704、2.4532、1.7700.6批黄连花薹一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著差异,但大大提高了检测的效益,节约了检测成本.结论 分离鉴定出黄连花薹与黄连药材的差异性成分蒙花苷,同时建立的一测多评法测定结果准确,可用于黄连花薹的定量分析及质量控制.