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五倍子酸通过TGF-β/Smads信号通路对人瘢痕成纤维细胞生长抑制效应的初步研究
编辑人员丨1天前
目的:研究五倍子酸对瘢痕疙瘩成纤维细胞的形态、增殖、细胞周期、胶原收缩程度及对转化生长因子β(TGF-β)/Sma和Mad相关蛋白(Smads)信号通路的影响,探讨五倍子酸治疗瘢痕疙瘩的作用及机制。方法:2022年8 - 12月在武汉市第一医院皮肤外科获取术中切除的经临床及病理确诊的瘢痕疙瘩组织标本3份,采用组织块培养法进行原代成纤维细胞培养,取第3 ~ 8代细胞进行实验。设置低、中、高剂量五倍子酸组(分别用0.025、0.05、0.1 mg/ml五倍子酸干预细胞)及对照组(仅用含10%胎牛血清的DMEM培养细胞)。培养24、48、72 h后,细胞计数(CCK8)法检测各组细胞增殖活性,三维培养观察胶原收缩情况。按上述分组培养细胞24 h后,在微分干涉倒置荧光显微镜下拍照并使用流式细胞仪分析各组细胞周期变化。使用0.1 mg/ml五倍子酸干预细胞作为实验组(高剂量五倍子酸组),与对照组细胞分别培养24 h后,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定两组TGF-β1、2、3浓度变化,实时荧光定量PCR检测TGF-β1、2、3,Smad2、3、4及α平滑肌肌动蛋白(SMA)mRNA相对表达水平。统计学分析采用 t检验、单因素方差分析及两因素方差分析,两两多重比较采用LSD- t检验。 结果:与对照组相比,随五倍子酸剂量增加,镜下瘢痕疙瘩成纤维细胞形态发生改变,逐渐出现胞体缩小、细胞间距变大、萎缩、凋亡细胞增多现象。CCK8结果显示,随五倍子酸剂量增加及作用时间延长,细胞增殖活力变化显著( F组别 = 78.31, P < 0.001; F时间 = 4.17, P = 0.037),其中高剂量五倍子酸组24、48、72 h时瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖活力均显著低于对照组(均 P < 0.05)。三维培养显示,随培养时间延长,各组胶原均发生收缩,但收缩程度不同,对照组胶原明显收缩,各浓度五倍子酸组胶原收缩程度较低;作用24、48、72 h,中、高剂量五倍子酸组胶原收缩指数均显著低于对照组(均 P < 0.05)。流式细胞仪检测显示,处理24 h后,低、中、高剂量五倍子酸组细胞凋亡率(38.68% ± 3.05%、41.82% ± 2.19%、43.56% ± 3.58%)均显著高于对照组(12.58% ± 1.56%,均 P < 0.001);与对照组相比,中、高剂量五倍子酸组G0/G1期细胞比例显著较低(均 P < 0.01),而S期和G2/M期细胞比例则显著较高(均 P < 0.05)。ELISA结果显示,高剂量五倍子酸组TGF-β1浓度[(758.58 ± 31.42)pg/ml]显著低于对照组[(1 081.30 ± 44.72)pg/ml, t = 11.81, P < 0.001],TGF-β2浓度[(71.05 ± 7.40)pg/ml]与对照组[(76.43 ± 6.51)pg/ml]相比差异无统计学意义( t = 1.09, P = 0.317),而TGF-β3浓度[(5.70 ± 3.87)pg/ml]高于对照组[(0.00 ± 0.00)pg/ml, t = 2.94, P = 0.026]。实时荧光定量PCR显示,与对照组相比,高剂量五倍子酸组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、α-SMA mRNA表达量均较低(均 P < 0.05),TGF-β3 mRNA表达量较高( t = 6.78, P = 0.002),而TGF-β2 mRNA表达量无明显变化( t = 0.05, P = 0.962)。 结论:五倍子酸可通过改变瘢痕疙瘩成纤维细胞周期,抑制其增殖,促进其凋亡,改变细胞形态,从而减少瘢痕形成及挛缩,其机制可能与抑制TGF-β/Smads信号通路有关。
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编辑人员丨1天前
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基于图像分析的五倍子没食子酸薄层色谱定量研究
编辑人员丨1天前
目的:以五倍子中没食子酸为研究对象,探讨Image J软件用于薄层色谱定量的可行性。方法:采用硅胶GF 254薄层板,以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)为展开剂,紫外光灯(254 nm)下拍照;采用聚酰胺薄膜,以75%乙醇-冰醋酸(50∶1)为展开剂,1%三氯化铁乙醇溶液为显色剂,日光下拍照。将图像导入Image J软件进行分析,以外标两点法计算五倍子中没食子酸含量。采用HPLC法,以甲醇-0.1%磷酸溶液(15∶85)为流动相,在273 nm波长下测定五倍子中没食子酸含量。 结果:硅胶GF 254薄层板没食子酸定量限为0.401 6 μg,线性范围2.855~9.515 μg( r 2=0.996 0),回收率为105.12%( RSD=3.48%);聚酰胺薄膜没食子酸定量限为0.363 4 μg,线性范围1.427~4.758 μg( r 2=0.991 5),回收率为103.75%( RSD=4.60%);HPLC法没食子酸的定量限为4.42 ng,线性范围0.122~0.977 μg( r 2=0.999 9),回收率为98.30%( RSD=1.40%),3种方法的精密度、重复性、稳定性 RSD值均<5%。使用Image J测得的没食子酸含量与HPLC测定结果比较,最大相对误差9.30%,最小相对误差1.62%。 结论:Image J软件可用于薄层色谱定量分析,可作为中药质量控制方法的补充。
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编辑人员丨1天前
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中药熏洗促进痔疮术后创面愈合用药规律研究
编辑人员丨1天前
目的:运用数据挖掘技术分析中药熏洗促进痔疮术后创面愈合用药规律。方法:检索中国知识资源总库(CNKI)、中国学术期刊数据库(万方数据)、中文科技期刊数据库(重庆维普)、中国生物医学文献数据库(CBM)和PubMed建库至2022年3月10日收录的中药熏洗促进痔疮术后创面愈合的文献。采用古今医案云平台(V2.3.5)对中药频次、属性、功效、核心药对、核心处方等进行分析。结果:共纳入处方299首,涉及中药200味,使用频次≥40次的高频用药有苦参、黄柏、芒硝、五倍子、大黄等,功效以清热燥湿为主,药性以寒、温、微寒居多,药味以苦、辛、甘、酸居多,以归肝、胃、心、大肠、脾、肺经为主;关联分析得到22条规则,聚类分析得到5组药物,复杂网络分析得到核心处方组成为苦参、黄柏、芒硝、五倍子、大黄、蒲公英、冰片、地榆、苍术、红花、黄芩、乳香、没药、金银花。结论:中药熏洗促进痔疮术后创面愈合以清热燥湿解毒为主,兼以活血化瘀、消肿止痛、敛疮生肌。
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编辑人员丨1天前
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外来药物没食子考辨
编辑人员丨1天前
没食子于北魏自波斯传入中国使用至今,其译名繁多。综合参考中外医学及历史文献,以没食子为对照,从墨食子、跋屡子以及五倍子相关的外语音译展开,从来源、含义的角度进行考辨。研究发现,墨食子之“墨”用于描述没食子不够恰当,“墨”既不符合没食子音译的语音演变,也不能准确体现没食子本身的医学含义。中医典籍中的跋屡子与没食子实为一物,但希腊-阿拉伯古籍中“Bullut”对应橡树群体及其虫瘿,而并非跋屡子。跋屡子应为“Omphacitis”。在外来医籍《西药大成》中,“没石子”对应 Quercus infectoria属的虫瘿类药物,五倍子实际列于“没石子”附注部分,作为性质类似的拓展内容出现;而在本土医籍中,没食子与五倍子是明确的两味不同药物,但二者在药性上互为替代补充。
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编辑人员丨1天前
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UPLC-Q-TOF-MSE结合UNIFI数据库技术快速分析五倍子化学成分及对大鼠血管药理作用机制
编辑人员丨3周前
目的 鉴定五倍子化学成分并探究其舒张血管的作用机制.方法 建立五倍子UNIFI数据库.采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MSE)与UNIFI数据处理平台,鉴定五倍子中的化学成分.用大鼠胸主动脉环实验探究五倍子提取物舒张血管的作用和其有效的物质成分发挥作用的机制.结果 超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术结合UNIFI数据库快速分析鉴定五倍子化学成分60种.五倍子提取物可能通过促进血管内皮一氧化氮合酶的活性;在药理通路中,它可能影响平滑肌细胞内Ca2+的释放和外钙内流,从而发挥作用.结论 本研究首次采用UPLC-Q-TOF-MSE结合UNIFI数据库对五倍子提取物进行鉴定.从五倍子提取物中鉴定出60种化合物.酚酸类占比较大,其药理作用可能是酚酸类化合物通过内皮依赖和内皮非依赖途径激活一氧化氮合酶发挥舒张血管的作用.药理通路其可能为通过促进平滑肌细胞内钙释放和外钙内流发挥作用.
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编辑人员丨3周前
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预防刺参腐皮综合征复方中药的筛选及体内药效评价
编辑人员丨2024/7/27
为开发防治刺参腐皮综合征的复方中药,从14种中药中筛选出对灿烂弧菌(Vibrio splendidus)有明显抑制作用的单味中药,并通过正交实验确定最佳抗菌复方FF-Z(诃子∶五倍子∶穿心莲∶川芎=15 g∶2 g∶10 g∶5 g).在饲料中分别添加10、20、30和40 g/kg的复方FF-Z作为试验组,不含复方FF-Z的饲料为对照组,并以含恩诺沙星粉20 g/kg的饲料为药物对照组,连续投喂刺参10d,继而用终浓度为107 CFU/mL的灿烂弧菌进行浸浴攻毒,以观察预防保护效果.结果显示,灿烂弧菌对复方FF-Z极敏感,抑菌圈直径可达(23.10±0.62)mm,最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)值分别为7.81和15.63 mg/mL;与阴性对照组相比,复方FF-Z各剂量组刺参的SOD、ACP和AKP活性显著提高,且优于药物对照组.在灿烂弧菌感染后,复方FF-Z各剂量组处理的刺参发病时间比阳性对照组推迟2d,其中复方FF-Z 20 g/kg组、FF-Z 30 g/kg组和FF-Z 40 g/kg组刺参的20d发病率分别为22.08%、22.14%和14.58%,显著低于阳性对照组的84.45%.组织病理学观察结果表明,添加30 g/kg复方FF-Z的饲料能够有效减轻灿烂弧菌入侵引起的刺参组织炎症反应,从而起到保护作用.研究证明,复方FF-Z能够显著提高刺参的免疫和抗病力,对灿烂弧菌引起的腐皮综合征具有良好的预防保护效果,能延缓该病的发病进程并降低发病率.
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编辑人员丨2024/7/27
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五倍子及其醋制品的抗氧化作用及物质基础探讨
编辑人员丨2024/7/6
目的 结合液相质谱联用技术表征五倍子醋制前后的化学成分变化,从抗氧化角度探讨五倍子的醋制炮制机制.方法 采用液相质谱联用技术比较五倍子醋制前后水提物的化学成分组成表征;并通过铁离子还原能实验(FRAP)、DPPH自由基清除能力实验、ABTS自由基清除能力测定其抗氧化能力.结果 醋制后五倍子的铁离子还原能力、DPPH自由基清除能力和ABTS清除能力均高于五倍子水提物及同浓度抗坏血酸,即醋制五倍子水提物的铁离子还原能力IC50、DPPH自由基清除能力IC50、ABTS清除能力IC50,分别优于同浓度抗坏血酸29.17%、61.47%、39.40%.液相质谱联用技术结合UNIFI分析平台鉴定出包括没食子酸、鞣花酸、单-O-没食子酸酰葡萄糖~十二-O-没食子酸酰葡萄糖、不同聚合度的二倍没食子酸~五倍没食子酸以及其同分异构体等53个化合物,对比分析发现醋制后五-O-没食子酰葡萄糖以上的高聚没食子酰葡萄糖较醋制前降低,低聚没食子酰葡萄糖有不同程度增加.醋制后,没食子酸聚合物中较高聚合度的五倍没食子酸及四倍没食子酸含量下降;二倍没食子酸、鞣花酸、没食子酸高于醋制前.结论 醋制对五倍子鞣质类成分起到了温和的水解作用,使大分子没食子酸酯类化合物部分水解,并产生游离的没食子酸单体及低聚体,使更多的活泼酚羟基暴露出来,增强了抗氧化作用.
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编辑人员丨2024/7/6
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抗寄生虫中药活性成分体外抗细粒棘球蚴作用
编辑人员丨2024/6/22
目的 评价抗寄生虫中药水提物和有机溶剂粗提物体外对细粒棘球蚴的作用效果.方法 从感染绵羊肝脏细粒棘球蚴包囊中分离原头节,体外培养24h后,取活性大于95%的原头节(100 μl,约100个)加入96孔板,分别加入终浓度为0.8 mg/ml(低浓度组)、1.6 mg/ml(中浓度组)、3.2 mg/ml(高浓度组)的鸦胆子、苦楝皮、辣蓼、石榴皮、使君子、槟榔、贯众、鱼藤、马蔺子、五倍子和仙鹤草等11种抗寄生虫中药的水提物,体外作用72 h后,伊红染色法检测原头节活性,倒置显微镜观察下观察原头节的形态,计算死亡率;同时设相同浓度的阿苯达唑组和空白对照组.从具有体外抗原头节作用的中药中提取黄酮、多糖、皂苷和生物碱等粗提物,分别以终浓度1.00 mg/ml体外作用于原头节72 h后,观察原头节形态,计算死亡率;同时设空白对照组.对体外抗原头节效果明显的粗提物进行液相色谱与串联质谱联用分析.组间比较采用单因素ANOVA分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 中药水提物作用72h后,鸦胆子、苦楝皮、辣蓼水提物高浓度组原头节边缘模糊,结构松散,基质溶解;其余8种中药水提物高浓度组原头节形态正常,各部分结构清晰;阿苯达唑组原头节生发层有轻微损伤;空白对照组原头节形态正常.体外培养72 h后,鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物高浓度组原头节的死亡率分别为(99.63±0.57)%、(90.89±1.10)%和(51.93±0.60)%,中浓度组分别为(85.97±1.50)%、(81.14±1.19)%、(42.46±0.56)%,低浓度组分别为(78.34±1.35)%、(77.27±0.92)%、(36.66±0.60)%,与空白对照组[(0.62±0.51)%]相比差异均有统计学意义(F=180 678.22、41 488.99、44 346.38,19 543.86、27 887.32、34 590.79,20 059.467、41 953.68、17 993.77,均 P<0.01),与阿苯达唑组[(30.03±2.02)%]比较差异均有统计学意义(F=6 585.72、4 210.84、646.46,2 956.80、2 849.68、210.83,2 365.92、2 712.28、58.12,均 P<0.01);其余8种中药水提物高、中、低浓度组原头节的死亡率与对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05).鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷、辣蓼皂苷和辣蓼生物碱组原头节皱缩、结构松散、基质溶解,原头节死亡率分别为(98.33±2.89)%、(96.67±5.77)%、100%、(99.33±1.15)%和(56.67±2.11)%,与空白对照组[(10.33±2.51)%]比较差异均有统计学意义(F=1 584.00、563.71、3 808.47、3 099.52、14.65,均P<0.01);其余中药粗提物组原头节的死亡率与对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05).液相色谱与串联质谱联用分析结果显示,正、负离子模式下分别鉴定出741、398种代谢产物,其中正离子模式下从鸦胆子黄酮粗提物中鉴定出差异显著的黄酮类化合物4种,分别为漆黄素、5-甲基-7-甲氧基异黄酮、儿茶素和甜橙黄酮;负离子模式下鉴定出8种,分别为原花青素B2、槲皮素-3β-D-葡萄糖苷、枸桔苷、橙皮素、槲皮素、木犀草素、芹菜素和黄豆黄素.结论 鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物,鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷和辣蓼皂苷有明显体外抗细粒棘球蚴的作用,且效果优于阿苯达唑.
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编辑人员丨2024/6/22
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基于网络药理学探讨派特灵治疗尖锐湿疣的作用机制
编辑人员丨2024/6/15
目的 基于网络药理学研究外用派特灵治疗尖锐湿疣(CA)的作用机制.方法 基于网络药理学的方法,经研究表明派特灵是主要由金银花、苦参、白花蛇舌草、鸦胆子、五倍子、蛇床子和大青叶等组成的中药复方制剂,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库获取派特灵主要组成中药的活性成分与相应靶点;通过GeneCards数据库获得与CA相关的疾病靶点,取其基因与靶点交集制作韦恩图;通过STRING数据库和Cytoscape3.7.1软件共同构建蛋白互作网络(PPI),应用R语言下载安装Bioconductor数据库中的相关R包对交集得到的核心靶点进行相应的基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.结果 在TCMSP数据库共获取109个活性化合物,主要为β谷甾醇、鸦胆甙、槲皮素等,GeneCards数据库共获取疾病靶点74个,PPI网络分析显示共涉及前列腺素内过氧化物合酶-2(PTGS-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(BCL-2)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、同期蛋白D1(CCND1)等15个核心蛋白,GO、KEGG富集分析显示派特灵可以通过各类癌症通路、人乳头状瘤病毒(HPV)感染、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、人巨细胞病毒感染信号通路等多途径、多靶点作用于CA.结论 派特灵通过抗HPV病毒、调节免疫等方面达到治疗CA的目的.
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编辑人员丨2024/6/15
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基于数据挖掘的中药洗剂治疗混合痔术后创面愈合的用药规律分析
编辑人员丨2024/3/30
目的:对中药洗剂治疗混合痔术后创面愈合的用药规律进行分析,为临床用药提供参考.方法:检索中国知网、万方数据库和维普数据库中所有中药洗剂治疗混合痔术后创面愈合的文献,建立数据库后运用Microsoft Excel 2019软件进行用药频次统计,应用古今医案云平台V1.2.4进行性味、归经及功效分析,导入IBM SPSS Modeler 18.0软件进行关联规则分析,应用IBM SPSS 25.0软件进行聚类分析.结果:共收集处方173首、中药171味,其中使用频次居前5位的中药为苦参、黄柏、芒硝、五倍子和大黄.药性多寒、温,药味以苦、辛、甘为主,主归肝、胃、心经,功效以清热燥湿、清热解毒为主.在关联规则分析中,苦参-蒲公英、黄柏-地榆为核心药对,使用频率最高,3味中药药组多为2个核心药对的加减配伍.高频药物聚类分析得到6个新的药物组合.结论:中药洗剂治疗混合痔术后创面愈合以清热燥湿、解毒消肿为主,兼有凉血止血、泻下通便类药物,其核心药物组合对混合痔术后创面愈合的理论研究及临床施治和新药的研发具有一定的参考价值.
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编辑人员丨2024/3/30
