目的:探讨miR-1249-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期的影响。方法:采用OncoMir肿瘤数据库(OMCD)分析miR-1249-5p表达水平与前列腺癌患者总生存期的关系。将人前列腺癌细胞株PC-3分为两组：miR-1249-5p组和阴性对照组。以Lipofectamine 2000为介导，将miR-1249-5p拟似物脂质体复合物或阴性miRNA脂质体复合物转染入对数生长期的PC-3细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组PC-3细胞miR-1249-5p的表达水平，采用集落形成实验检测两组PC-3细胞增殖能力的变化，采用Transwell实验检测两组PC-3细胞侵袭变化，采用流式细胞仪检测两组PC-3细胞周期变化。通过miRNA预测软件miRGator预测miR-1249-5p的靶基因。RT-qPCR和Western blotting法分别检测miR-1249-5p的靶基因表达。计量资料以均数±标准差( ± s)表示，两组间比较采用 t检验。 结果:与miR-1249-5p低表达的前列腺癌患者相比，miR-1249-5p表达水平较高的前列腺癌患者总生存期较长，差异具有统计学意义( P<0.01)。miR-1249-5p组miR-1249-5p表达水平(10.74±1.19)明显高于阴性对照组(1.56±0.27)，差异具有统计学意义( P<0.01)。miR-1249-5p组集落形成数[(35.86±6.94)个/孔]明显少于阴性对照组[(88.94±11.66)个/孔]，差异具有统计学意义( P<0.01)。miR-1249-5p组穿膜细胞数[(25.01±6.83)个/高倍视野]明显少于阴性对照组[(82.76±8.35)个/高倍视野]，差异具有统计学意义( P<0.01)。miR-1249-5p组处于G 0~G 1期的细胞比例[(50.79±6.61)%]明显高于阴性对照组[(27.09±2.30)%]，差异具有统计学意义( P<0.01)，PC-3细胞被抑制在G 0~G 1期。神经前体细胞表达发育调控蛋白9( NEDD9)可能是miR-1249-5p的靶基因。与阴性对照组比较，miR-1249-5p组 NEDD9基因表达水平显著低于阴性对照组，差异具有统计学意义( P<0.01)。 结论:miR-1249-5p可以抑制前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期，其可能通过负调控原癌基因 NEDD9表达实现。

目的 检测长链非编码RNA(lncRNA)RP11-333E1.2在子宫内膜癌中的表达,观察下调RP11-333E1.2对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其调控机制.方法 qPCR检测45对子宫内膜癌及癌旁组织、5种子宫内膜癌细胞株(RL95-2、Ishikawa、HEC-1B、HEC-1A、AN3CA)和1种正常子宫内膜细胞株(ESC)中RP11-333E1.2的表达.以RP11-333E1.2表达最高的子宫内膜癌细胞株为转染对象,分别转染空载质粒和可干扰RP11-333E1.2表达的siRNA质粒,命名为空载体组和siRNA组.qPCR检测转染后RP11-333E1.2表达量;MTT法和Transwell侵袭实验分别检测低表达RP11-333E1.2对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭能力的影响;qPCR和Western blotting检测神经前体细胞表达发育下调基因9(neural precursor cell expressed,developmentally down-regulated 9,NEDD9)的mRNA和蛋白水平的表达.结果 RP11-333E1.2在子宫内膜癌和癌旁组织中的相对表达水平分别为5.73±0.74和1.46±0.55,子宫内膜癌组织中RP11-333E1.2明显高表达(P<0.01).与人正常子宫内膜细胞相比,子宫内膜癌细胞株中RP11-333E1.2明显高表达(P<0.01),Ishikawa细胞中的表达量最多(P<0.01).与空载体组相比,siRNA组Ishikawa细胞中RP11-333E1.2表达明显降低(P<0.01).与空载体组相比,siRNA组下调RP11-333E1.2可明显抑制Ishikawa细胞的增殖能力(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01).与空载体组相比,siRNA组Ishikawa细胞中NEDD9在mRNA和蛋白水平的表达明显降低(P<0.01).结论 RP11-333E1.2在子宫内膜癌中呈高表达,下调RP11-333E1.2可抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖能力和侵袭能力,其机制可能与NEDD9基因表达改变相关.

目的 探讨联合检测胃蛋白酶原(PGI、PGⅡ),胃泌素-17(gastrin-17,G-17)和神经前体细胞表达发育调控蛋白9(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated 9,NEDD9)诊断胃癌的价值.方法 收集2018年1月至2018年12月于郑州人民医院就诊的95例胃癌患者(胃癌组)及140例胃炎患者(胃炎组)的血清样本,另选择同期健康体检者100各作为正常对照.采用酶联免疫吸附法检测PG I、PG II、G-17和NEDD9的表达水平.采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价诊断效能,logistic回归计算联合检测预测因子.结果 胃癌组和正常对照组PG I、G-17和NEDD9的表达水平差异均有统计学意义(均P＜0.05);胃炎组和正常对照组PG II表达水平差异有统计学意义(P＜0.05).G-17和NEDD9在早期胃癌的表达水平低于进展期胃癌(均P＜0.05).PG I、PGII、G-17和NEDD9诊断胃癌ROC 曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.664、0.570、0.602、0.749,联合检测的AUC为0.827,对应的灵敏度和特异度分别为80.0％和72.9％.结论 联合检测PG I、PG II、G-17和NEDD9可提高胃癌的诊断效能.

背景与目的:类泛素化neddylation修饰在乳腺癌中的作用鲜有报道.该研究的前期研究发现,抑制neddylation修饰可诱导乳腺癌细胞发生衰老,但具体机制尚未完全阐明.研究报道核纤层蛋白lamin B1缺失可导致细胞衰老.本研究旨在探讨在乳腺癌中,neddylation修饰与lamin B1是否存在相关性及其可能的机制.方法:利用113例乳腺癌患者肿瘤组织制成的组织芯片对neddylation修饰过程中关键蛋白神经前体细胞表达发育下调蛋白8(neural precursor cell expressed developmentally downregulated protein 8,NEDD8)、NEDD8活化酶E1(NEDD8-activating enzyme 1,NAE1)及核纤层蛋白lamin B1进行免疫组织化学染色.采用Spearman rank分析NEDD8和NAE1与lamin B1表达的相关性.采用CRISPR/Cas9技术敲低NEDD8的表达以阻断neddylation修饰,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测neddylation修饰对Lamin B1表达的调控作用及其机制.结果:Lamin B1表达与NEDD8(r=0.817,P<0.0001)和NAE1(r=0.406,P<0.0001)表达呈显著正相关.敲低NEDD8以阻断neddylation修饰可显著抑制Lamin B1的表达.沉默P53表达可部分逆转阻断neddylation修饰对lamin B1表达的抑制.结论:Neddylation修饰与lamin B1表达呈正相关,靶向neddylation修饰可能通过P53依赖的方式抑制lamin B1的表达.这为乳腺癌的治疗提供了新的靶点和方向.