目的:总结核苷酸切除修复(NER)障碍患儿的临床特征及基因突变位点。方法:回顾性分析2008年10月至2022年2月中国人民解放军总医院收治住院及2015年10月至2022年2月首都医科大学附属北京儿童医院门诊收治确诊的NER障碍患儿的临床资料，并对国内外已报道的中国病例进行文献复习。结果:1．在16例NER障碍患儿中男6例，女10例；起病年龄为7.5(4.0，12.0)个月；确诊年龄为42.0(21.5，77.0)个月；包括3种类型：科凯恩综合征(CS)13例、着色性干皮病(XP)2例、眼-脑-面-骨综合征(COFS)1例；涉及4个致病基因，11例 CSA、3例 CSB、1例 XPG、1例 XPD。16例患儿以光过敏及发育落后起病，各型均有神经系统症状，XP及CS患儿均有皮肤症状。CS患儿有特殊面容、视听障碍、小头畸形、神经影像学特征改变。COFS伴宫内发育迟缓。2.文献复习结果：共检索到既往报道中国病例96例，共涉及6种类型，其中45例CS，44例XP，毛发低硫营养不良4例，COFS、XP-CS、紫外线敏感综合征各1例。涉及9种突变基因，33例 CSA、15例 XPA、13例 CSB、10例 XPV、9例 XPC、7例 XPG、7例 XPD、1例 XPF、1例 MPLKIP。常见症状为生长发育障碍(62例)、皮肤光过敏(61例)、特殊面容(52例)、智力障碍(49例)、小头畸形(48例)等。33/36例(91.7%)影像学示基底核或苍白球钙化。3例在孕期有宫内发育迟缓、小头畸形等表现。 结论:妊娠期出现宫内发育迟缓、小头畸形及临床发现皮肤光过敏、特殊面容、生长发育落后、智力障碍、肌张力高、基底核钙化等异常者，应考虑NER相关疾病可能，应早期行相关基因检测进一步明确诊断。

2024年6月6日,北京大学基础医学院王嘉东课题组在 PNAS 期刊上发表文章"The ARK2N-CK2 complex initiates transcription-coupled repair through enhancing the interaction of CSB with lesion-stalled RNAP Ⅱ"(ARK2N-CK2 复合体通过增强CSB与被损伤阻滞的RNAP Ⅱ的结合启动转录偶联修复),揭示了 ARK2N-CK2复合体参与光辐射损伤修复的新机制.研究发现,在光辐射损伤后,ARK2N-CK2复合体能够介导科凯恩综合征蛋白B(Cockayne syndrome protein B,CSB)的磷酸化,增强CSB与被损伤阻滞的RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymerase Ⅱ,RNAP Ⅱ)的结合,使CSB能够持续定位于受损染色质处,进而招募后续转录偶联核苷酸切除修复(transcription-coupled nucleotide excision repair,TC-NER)的因子完成修复并恢复转录,从而帮助光辐射损伤修复,并避免早衰症的发生.

目的 探讨一例科凯恩综合征(CS)家系的致病基因突变.方法 采集先证者及其家系成员外周血并抽提基因组DNA,对先证者DNA进行全外显子组测序,通过生物信息学分析和家系分析,鉴定其致病基因突变,并利用Sanger测序技术对致病基因突变位点进行验证.结果 先证者为ERCC8基因复合杂合突变:c.400-2A>G和c.394_398delATGTA(p.L132fs),这2个突变均为新发现的突变.其中 c.400-2A >G 为剪切位点突变,来源于表型正常的父亲;c.394_398del ATGTA (p.L132fs)突变来自于表型正常的母亲,与先证者有类似表型的姐姐也为这两个位点的复合杂合突变.结论 通过全外显子组测序,鉴定了该CS家系中的ERCC8致病基因及其c.400-2A>G和c.394_398delATGTA(p.L132fs)两个杂合突变位点.

本例患儿表现为小头畸形、光敏感、生长及智能等发育迟缓、早老面容、肾病综合征、肾功能衰竭的科凯恩综合征,合并鱼鳞病.全外显子测序发现患儿CSA基因(ERCC8基因)c.394-c.398delTTACA纯合缺失突变,p.L132Nfs*6(p.leu 132Asnfs*6),父母及弟均为杂合突变;患儿及父弟均为FLG基因的杂合突变,c.7669(exon3)C＞A,p.P2557T (pro2557Thr).

生物体在正常生命过程中面临内/外因来源的DNA损伤,DNA损伤不仅影响基因正确复制,也阻碍其正常转录.为避免DNA损伤带来的灾难性后果,生物体进化出一整套修复机制,以保证复制和转录的正确性、基因组的完整性和遗传的稳定性.本文重点综述了RNA聚合酶监视(RNA polymerase-surveilled,RNAP-S)的DNA修复机制.首先从RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP)的结构出发介绍了RNAP对DNA损伤的感知机制;其次讨论了滞留RNAP的回溯、与其模板DNA的解离以及后续修复机制的启动,真核细胞科凯恩综合征B蛋白(Cockayne syndrome protein B,CSB)及其泛素化和8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶l(8-oxoguanine DNA glycosylasel,OGG1)介导的RNAP-S修复;最后探讨了RNAP-S损伤修复的生物学意义并展望其前景.

目的 探讨DNA氧化损伤修复基因ERCC6对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用不同浓度H2O2处理SRA01/04细胞,构建氧化损伤模型.取氧化损伤的SRA01/04细胞分为H2 O2组、H2 O2+空白质粒转染组和H2 O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组进行转染处理.采用实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测转染后氧化损伤的SRA01/04细胞中ERCC6 mRNA和科凯恩综合征互补B蛋白(CSB)的表达变化.采用免疫印迹实验和EdU染色实验分别检测转染后各组SRA01/04细胞凋亡相关蛋白表达变化和细胞增殖能力.结果 当H2O2处理浓度为200μmol·L-1时,SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和CSB蛋白的相对表达量最低,后续转染实验H2 O2处理浓度均采用200μmol·L-1.与H2 O2组和H2 O2+空白质粒转染组相比,H2 O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞ERCC6 mRNA和蛋白表达水平均显著增高(均为P<0.05).进一步实验发现,与另外两组相比,H2O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞中的促凋亡蛋白Bax表达均明显降低,而抑制凋亡的蛋白Bcl-2表达则均明显增加(均为P<0.05).EdU染色实验检测结果显示,与H2O2+空白质粒转染组相比,H2 O2+pcDNA3.1-ERCC6质粒转染组SRA01/04细胞内绿色荧光亮度增高,阳性细胞数量增加,表明SRA01/04细胞的增殖能力增强.结论 ERCC6基因可能通过减弱DNA的核苷酸切除修复作用抑制氧化损伤的晶状体上皮细胞增殖、促进其凋亡从而导致老年性白内障的发生.

科凯恩综合征(Cockayne syndrome,CS)是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病,于1936年由英国儿科医生Cockayne[1]首次对该疾病进行报道. 在美国及欧洲国家该病的发病率大约是2.7/1000000 [2],国内偶见散发个例报道. Coakayne综合征是一种以身材矮小、早衰外观为特征,该病特点包括体重不增、不能正常生长、头围异常小和神经系统发育受损. 患儿对光极度敏感,少量阳光照射就能引起晒伤,其他症状包括听力丧失、眼部异常、蛀虫严重、骨质异常并有脑部特征性变化[3,4]. 目前已知的主要致病基因有 ERCC6、ERCC8,ERCC8 位于人类第5号染色体 (5q12.1),ERCC6位于人类第10号染色体(10q11.13)[5],另外少见的XPB、XPD、XPG基因亦可导致Cockayne综合征[6]. 本研究中,我们对1例Cockayne综合征患儿应用芯片捕获高通量测序及其父母采用Sanger测序法对ERCC6、ERCC8进行突变测序, 明确其突变类型及突变形式, 并根据遗传学规律指导该夫妇避免再次生育Cockayne综合征患儿.