目的 探讨维生素D(vitamin D,VD)调控脂肪酸诱导的巨噬细胞M1-M2 极化表型转变对肝细胞脂质代谢的直接作用及机制.方法 体外饱和脂肪酸孵育培养小鼠巨噬细胞RAW264.7并予活性VD-1,25(OH)2D3补充干预,制备相应的条件培养液体外培养小鼠肝细胞AML12.Real-time PCR检测巨噬细胞M1/M2 极化基因表达水平,Real-time PCR、Western blot 分别检测巨噬细胞 VD 受体(VD receptor,VDR)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)基因、蛋白表达水平;油红O染色观察肝细胞内脂质沉积表现,Real-time PCR、Western blot分别检测肝细胞脂质合成和分解代谢相关酶类基因、蛋白表达水平.结果 体外饱和脂肪酸作用下,与VD对照组相较,VD补充组巨噬细胞M1 极化基因诱生型一氧化氮合酶 2(inducible nitric oxide synthase 2,iNOS2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及M2 极化基因白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)mRNA表达水平均明显降低,巨噬细胞VDR/PPARγ mRNA和蛋白表达水平均明显降低.体外饱和脂肪酸作用的巨噬细胞条件培养液孵育肝细胞,与 VD 对照组相较,VD 补充组肝细胞脂肪变性明显减少,肝细胞脂质合成代谢酶[固醇调节元件结合蛋白 1C(sterol-regulatory element binding protein 1C,SREBP1C)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)]mRNA 和蛋白表达水平均明显降低,脂质分解代谢酶肉碱棕榈酰转移酶 1A(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)mRNA和蛋白表达水平明显降低.结论 补充VD介导VDR/PPARγ 通路逆转脂肪酸诱导的巨噬细胞极化表型直接影响肝细胞脂质代谢水平并改善肝细胞脂肪变性.[营养学报,2024,46(2):139-145]

目的 探讨肉碱-酰基肉碱移位酶缺乏症临床、生化以及基因变异特点.方法 对2014—2017年在广西壮族自治区妇幼保健院遗传代谢中心实验室确诊的4例肉碱-酰基肉碱移位酶缺乏症患儿的临床表现、生化检查、基因检测结果进行回顾性分析.4例患儿均通过干血滤纸片提取基因组DNA进行基因分析,其中1例患儿进行SLC25A20基因分析,3例患儿进行全外显子组测序分析.结果 4例无亲缘关系的患儿发病年龄1～28 d,死亡年龄1.5～30 d,临床表现为新生儿低血糖(4例)、心律失常(2例)、猝死(2例),生化检查:血糖1.2～2.0 mmol/L、肌酸激酶955～8 361 U/L,肌酸激酶同工酶199～360 U/L,游离肉碱3.70～27.07 μmol/L,棕榈酰肉碱1.85～14.84 μmol/L.4例患儿均携带SLC25A20基因c.199-10T＞G纯合变异,父母为杂合变异携带者.通过构建单体型发现, c.199-10T＞G变异位点均处于同一单体型.结论 肉碱-酰基肉碱移位酶缺乏症临床表现急重,预后不佳.表现有低血糖、心肌酶升高,长链酰基肉碱升高.c.199-10T＞G变异是肉碱-酰基肉碱移位酶缺乏症的重要分子病因,单体型分析提示该变异与奠基者效应有关.

目的 探讨肉碱-酰基肉碱转位酶缺乏症(carnitine-acylcarnitine translocase deficiency,CACTD)患儿的临床特征、生化结果 及基因突变特点.方法 选择2017年广州市妇女儿童医疗中心新生儿科诊治的3例CACTD患儿,对其临床特征、生化结果及基因突变特点进行回顾性分析.以“新生儿”、“婴儿”、“肉碱-酰基肉碱转位酶缺乏症”、“肉碱-酰基肉碱转位酶”和“carnitine-acylcarnitinetranslocase deficiency”、“SLC25A20”为检索词,分别对中国知网、万方数据库、生物医学文献数据库(PubMed)、美国国家生物技术中心及Embase生物医学全文数据库自建库至2018年4月收录的文献进行检索,总结CACTD患儿的临床资料、生化代谢指标、基因突变特点、治疗方法 和预后.结果 3例患儿中男2例,女1例,均为足月儿,生后无窒息.母亲孕期无异常,父母非近亲婚配.生后15～20 h均以反应差、严重低血糖起病;血氨、肝酶、肌酸激酶及其同工酶明显升高,二羧基酸尿阳性,血游离肉碱水平降低,长链酰基肉碱水平增高;2例血酮体水平明显降低;3例患儿心电图均显示房室传导阻滞、室性心动过速,给予反复电复律、利多卡因、胺碘酮治疗;2例给予精氨酸降血氨、补充左卡尼汀、低脂+中链脂肪酸配方奶喂养.2例分别于生后3d和8d死于心肺衰竭;1例治疗后病情明显改善家长签字出院.基因测序回报:病例2为SLC25A20基因c.199-10T＞G和IVS7-9 16ins复合杂合突变,其中IVS7-9_16ins杂合突变可能是一种新发致病突变;病例3为SLC25A20基因c.199-10T＞G纯合突变,父母为该突变携带者.共纳入17篇文献,包括50例CACTD患儿,其中男31例,女19例.患儿均以低血糖,尤其是低酮性低血糖、高氨血症,肝酶及肌酸激酶升高,血游离肉碱水平明显降低,长链酰基肉碱水平明显升高,二羧基酸尿,伴心律失常、心肌病为临床特征.Sanger直接测序检测等位基因100条,突变种类为40种;纯合突变23例,复合杂合突变27例;c.199-10T＞G位点突变频次最高,为22次;其他突变类型均不超过6次.生后1周内起病44例(88.0％,44/50);死亡30例,存货13例,未知7例,病死率69.8％ (30/43),其中生后1周内死亡14例.结论 CACTD的早期识别、早期诊断、快速治疗是关键.基因分析是目前明确诊断最可靠的方法.c.199-10T＞G突变是存在于亚洲人群中最常见的致病突变类型,低酮性低血糖是早期线索;有先证者的家庭再次妊娠时需做产前诊断.

目的 探讨具有c.199-10T＞G纯合突变的肉碱-酰基肉碱转位酶缺乏症(carnitine-acylcarnitine translocase deficiency,CACTD)的临床特征及SLC25A20基因突变特点. 方法 (1)病例回顾:回顾性分析201 7年9月广州市妇女儿童医疗中心收治的1例具有c.199-10T＞G纯合突变的CACTD患儿的临床资料、基因突变特点、诊治经过和结局.(2)文献检索:以“CACT”“SLC25A20”或“肉碱-酰基肉碱转位酶”为检索词,分别在中国知网、万方数据库、美国国家生物技术中心和PubMed数据库检索建库至2018年4月的相关文献.分析所获文献,以总结分析CACTD患儿的临床资料、生化代谢指标、基因突变特点、治疗方法和预后. 结果 (1)病例回顾:本例患儿为男性,外院足月阴道分娩出生,因生后15h出现呻吟、青紫,微量血糖0.8 mmol/L,于生后2d5h转入本院新生儿重症监护病房.该患儿有一兄,生后50d因类似症状死亡,病因未明确.患儿血氨、肝酶、肌酸激酶均明显升高;血氨基酸分析提示肝损伤;尿气相层析-质谱技术分析结果提示大量二羧基酸尿;血游离肉碱含量极低;长链酰基肉碱含量明显增高、血酮体水平极低;心电图显示房室传导阻滞、室性心动过速.给予反复电复律、利多卡因、胺碘酮等治疗心律失常;精氨酸降血氨;以及补充左卡尼汀、中链脂肪酸配方奶喂养等措施后,患儿病情明显改善,生后29 d家长要求出院.出院后2周,又因“小儿腹泻病”再次住院,给予对症支持治疗后,腹泻好转,于生后45 d,家长再次要求出院.出院后失访.(2) SLC25A20基因分析:分析显示该患儿为c.199-10T＞G纯合突变,父母为该突变的携带者.(3)文献检索:共获得32篇相关英文文献,共报道CACTD 50例,共测序检测等位基因100条;突变共40种,具有c.199-10T＞G突变的患儿13例(包括纯合突变9例和复合杂合突变4例),突变频率为22/100.13例患儿均在生后72 h内(25 min～52 h)起病,均有低血糖,尤其是低酮性低血糖、高氨血症、肝酶及肌酸激酶升高、血游离肉碱含量明显降低、长链酰基肉碱含量明显升高、二羧基酸尿、心律失常、心肌病为常见的临床表现,12例中的11例死亡(另1例未交代结局). 结论c.199-10T＞G是存在于亚洲人群中的常见致病突变类型,临床表现严重,结局不良.对于婴儿猝死及新生儿早期出现的无法解释的突发的临床状况恶化均需排查“遗传代谢病”(包括CACTD)的可能.