目的:探讨脂肪酸去饱和酶2（FADS2）在银屑病皮损中的表达变化及其影响因素。方法:通过Gene Expression Omnibus（GEO）数据集GDS4602统计分析银屑病患者皮损FADS2的表达变化。取5只咪喹莫特诱导的C57BL/6小鼠银屑病模型背部皮肤，并取收集于上海市皮肤病医院的人正常对照皮肤和银屑病患者英夫利西单抗治疗前及10周后的皮损组织标本各4份以及司库奇尤单抗治疗前及12周后的皮损组织标本各3份，免疫组化染色检测表皮中FADS2的表达。体外培养的人永生化角质形成细胞HaCaT用50 ng/ml肿瘤坏死因子α（TNF-α）刺激0、6、12或24 h，用200 ng/ml白细胞介素17A（IL-17A）刺激0、6、12 h；用TNF-α单独或联合NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082（5 μmol/L）刺激6 h。处理完成后，实时荧光定量PCR（qPCR）、Western印迹法分别检测FADS2 mRNA和蛋白的相对表达量。采用单因素方差分析法和 t检验进行统计分析。 结果:GDS4602统计结果显示，与人正常皮肤对照组FADS2基因表达水平（2.035 ± 1.226）相比，银屑病皮损（0.656 ± 0.475）及非皮损（1.503 ± 1.062）组织中显著降低， F值分别为55.17、3.07， P值分别<0.001、= 0.012，并且皮损处显著低于非皮损处（ F = 26.27， P < 0.001）。Western印迹和免疫组化染色显示，与正常对照组小鼠皮肤FADS2蛋白表达（灰度值比值：1.000；荧光强度：30.720 ± 6.850）相比，咪喹莫特组小鼠皮损表达显著降低（灰度值比值：0.463 ± 0.172， t = 7.00， P = 0.002；荧光强度：21.840 ± 3.125， t = 3.15， P = 0.035）。银屑病患者使用英夫利西单抗治疗10周后，皮损中FADS2蛋白表达（43.775 ± 3.342）较未治疗时（27.950 ± 1.218）显著升高（ t = -6.95， P = 0.006）；而使用司库奇尤单抗治疗12周后的银屑病患者皮损处FADS2蛋白表达（28.667 ± 3.402）与治疗前（31.933 ± 2.987）比较没有显著升高（ t = 2.72， P = 0.113）。qPCR显示，与HaCaT细胞TNF-α 0 h组相比，TNF-α 6 h组、12 h组FADS2 mRNA相对表达量显著降低（ P值分别为0.002、0.003）；与IL-17A 0 h组相比，IL-17A 6 h组、12 h组相对表达量变化无统计学意义（ P值分别为0.849、0.961）。与HaCaT细胞对照组（正常培养基培养，1.000）相比，TNF-α 6 h组FADS2 mRNA相对表达量显著降低（0.682 ± 0.132， t = 4.82， P = 0.017）；与TNF-α 6 h组相比，TNF-α + BAY 11-7082 6 h组显著升高（1.541 ± 0.525， t = -3.58， P = 0.037）。Western印迹显示，与HaCaT细胞TNF-α 0 h组相比，TNF-α 24 h组FADS2蛋白相对表达量降低（ F = 6.24， P = 0.013）。 结论:FADS2在银屑病皮损中表达下降，其表达下调可能与TNF-α有关。

目的 探索去泛素化酶USP37和USP46在脂质代谢中的作用.方法 构建固醇调控元件(SRE)荧光素酶报告基因质粒pGL4-SRE-luc,利用去泛素化酶基因表达库筛选去泛素化酶,采用荧光素报告基因检测系统观察去泛素化酶活性对固醇调节元件结合蛋白(SREBP)-1a转录活性的调控作用,免疫共沉淀法检测去泛素化酶和SREBP-la的相互作用.结果 成功构建了 pGI4-SRE-luc,可以响应细胞内低脂应激以及SREBP介导的基因转录.经筛选发现去泛素化酶USP37和USP46能显著上调SRE报告基因荧光素酶活性.与空载体相比,在低脂浓度下USP37能显著上调SRE报告基因荧光素酶活性(P＜0.05),并显著上调硬脂酰CoA去饱和酶(SCD)基因和脂肪酸合酶(FASN)基因的表达(P＜0.05),而其酶活突变克隆USP37 C350S上调作用不显著(P＜0.05),USP37与SREBP-Ia存在相互作用.USP46及其酶活突变克隆USP46-C44S均上调SRE报告基因荧光素酶活性和SREBP下游靶基因SCD的表达(P＜0.05),而USP46与SREBP-la不存在相互作用.结论 USP37可通过去泛素化酶活性影响SREBP下游靶基因调控脂质代谢,而USP46上调部分SREBP下游靶基因的过程不依赖于其去泛素化酶活性.