目的:比较腹膜透析滤出液（PDE）外泌体微RNA（microRNA，miR）-503在不同腹膜转运特性患者中的表达差异，并预测miR-503的靶基因及其可能的生物学作用，为其在腹膜转运特性方面的研究提供生物信息学数据。方法:选取24例稳定维持性腹膜透析（PD）患者，根据腹膜平衡试验（PET）结果分为高转运（高/高平均转运组， n=12）和低转运（低/低平均转运组， n=12）两组。收集患者留腹过夜的PDE 500 ml，利用超滤杯进行浓缩后，超速离心法提取外泌体，重悬于磷酸盐缓冲液（PBS），通过透射电镜（TEM）、纳米粒子跟踪分析（NTA）、Western印迹和荧光染色鉴定外泌体的形态结构和功能。提取PDE外泌体miR，实时荧光定量PCR法检测两组PDE外泌体miR-503的表达水平，并分析miR-503的相对表达量与PET值和24 h超滤量的相关性。使用Targetscan和miRDB数据库预测miR-503的靶基因，运用富集分析工具DAVID（https://david.ncifcrf.gov/）进行基因本体（gene ontology，GO）功能富集和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）信号通路分析。 结果:PDE中提取到的外泌体透射电镜下呈杯状，直径100 nm左右，表达特异性表面标志CD63、CD81和热休克蛋白-70（HSP-70），可被间皮细胞内化吞噬。与低转运组相比，高转运组PDE外泌体miR-503的相对表达量较高（ P=0.002），且PDE外泌体miR-503的相对表达量与PET值呈正相关（ r=0.547， P=0.006），但与24 h超滤量无相关性（ r=-0.297， P=0.159）。miR-503共有156个靶基因可通过2个不同数据库同时预测出，156个靶基因的GO分析显示主要富集在与蛋白激酶结合、调节蛋白修饰和代谢过程以及调控上皮细胞增殖方面。KEGG通路则富集了许多肿瘤相关和经典的信号传导通路，包括转化生长因子-β（TGF-β）通路和血管内皮生长因子（VEGF）信号通路，同时血管内皮生长因子A（VEGFA）也是miR-503的直接靶基因，与许多纤维化机制中的蛋白相关。 结论:PDE外泌体miR-503在高转运组中明显升高，并与PET值呈正相关。生物信息学分析提示其可能通过靶向VEGFA调控腹膜血管新生。

目的 探讨腹膜透析滤出液中游离线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)与腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者腹膜及腹腔微炎症的相关性.方法 收集行PD治疗的患者85例,分为A组(1.5％葡萄糖腹膜透析液治疗组)和B组[高浓度(2袋以上2.5％或4.25％)葡萄糖腹膜透析液治疗组].检测血生化指标,腹膜透析滤出液中白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tu-mor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素 1β(interleukin 1β,IL-1β)及白细胞介素(inter-leukin 18,IL-18)及mtDNA.比较2组患者上述指标的差异;将mtDNA分别与临床参数做相关性分析;通过多元回归分析明确影响腹膜透析滤出液中mtDNA浓度的危险因素.结果 B组患者透析龄长于A组(t=-2.206,P=0.030),血白蛋白(Alb)低于A组(t=2.635,P=0.010),腹膜透析滤出液中IL-6(t=-4.835,P＜0.001)、TNF-α(t=-6.557,P＜0.001)、IL-1β(t=-2.395,P=0.019)、IL-18(t=-2.318,P=0.023)及游离mtDNA(t=-3.920,P＜0.001)均高于A组.腹膜透析滤出液中mtDNA与IL-6(r=0.721,P＜0.001)、TNF-α(r=0.418,P＜0.001)、IL-1β(r=0.771,P＜0.001)、IL-18(r=0.634,P＜0.001)及透析龄(r=0.240,P=0.030)均呈正相关,与Alb呈负相关(r=-0.319,P=0.003).多元回归分析显示腹膜透析液中葡萄糖浓度升高(β=0.358,P=0.005)、长透析龄(β=0.292,P＜0.001)及Alb降低(β=-0.272,P=0.027)是腹膜透析滤出液中mtDNA水平升高的危险因素.结论 腹膜透析滤出液中mtDNA与PD患者腹膜及腹腔慢性微炎症状态相关.高浓度葡萄糖腹膜透析液、长透析龄及低蛋白血症是导致其水平升高的危险因素.

目的 总结应用卷曲导管(俗称猪尾巴管)行微创腹膜透析在婴幼儿先心病术后急性肾功能不全治疗的临床护理经验.方法 回顾性分析我科2018年8月-2019年12月应用卷曲导管行腹膜透析治疗婴幼儿先心病术后急性肾功能不全20例患儿的临床资料.腹膜透析期间动态检测电解质、血清肌酐、尿素氮等变化,对患儿术后恢复结果进行多因素预后分析.结果 术后8～52 h开始腹膜透析,几乎所有病例都能超滤出多余的水分,腹膜透析3～18 d后尿量恢复正常,超滤出液体每天(51.31±18.87)mL/kg,透析期间血流动力学及呼吸功能等指标均有明显改善,血清肌酐(Cr)明显下降,酸中毒、高血钾、低氧血症和低心排血量综合征得以纠正.全组死亡3例,无死于腹膜透析并发症者.结论 应用卷曲导管(俗称猪尾巴管)行腹膜透析简便、安全,效果好,患儿一旦确诊为急性肾功能不全宜尽早开始腹膜透析的同时,应实施全程、全面、专业、有效的监护,这有助于患儿顺利渡过术后危险期,提高生存率,降低死亡率.

目的·提取和鉴定腹膜透析滤出液(peritoneal dialysis effluent,PDE)外泌体,比较不同腹膜转运特性患者PDE外泌体miR-200a的表达水平,预测其潜在靶基因及参与的生物学过程.方法·将20例腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者按照腹膜平衡实验(peritoneal equilibrium test,PET)值分为H组(高转运/高平均转运)和L组(低转运/低平均转运).每位患者收集500 mL留腹过夜PDE,浓缩后超速离心,透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、纳米粒子跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)和Western blotting鉴定外泌体.提取外泌体miRNA,实时荧光定量PCR检测2组患者PDE外泌体miR-200a的表达水平,分析其与PET值和超滤量的相关性.利用Targetscan、miRmap和miRWalk数据库预测miR-200a的靶基因,用DAVID数据库进行基因功能(gene ontology,GO)富集分析.结果·浓缩的PDE超速离心后提取到的外泌体,TEM下呈双层膜包裹的圆形囊泡,NTA显示其直径大多在50～150 nm,表面具有外泌体标志蛋白CD9和CD63.L组中PDE外泌体miR-200a的相对表达量显著高于H组,并且与PET值呈负相关(r=-0.871,P=0.000),与4 h超滤量呈正相关(r=0.448,P=0.048),但与24 h超滤量无相关性(r=0.355,P=0.125).生物信息学分析发现共有679种基因可由3个数据库共同预测到;GO分析显示这些靶基因不仅参与正向调控间充质细胞增殖,也在金属离子结合方面有一定富集.结论·PDE中存在外泌体,腹膜转运特性较低的患者PDE外泌体miR-200a相对表达量较高,其与PET值呈负相关,与4 h超滤量呈正相关.miR-200a的潜在靶基因众多,可能通过不同生物学过程影响腹膜转运特性.