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云南省江城县苏岛库蠓形态学和分子生物学鉴定
编辑人员丨2023/8/6
目的 采用形态学和分子生物学方法对在云南省江城县采集的库蠓进行鉴定,明确该库蠓的准确分类.方法 2017年9月在云南省江城县采集蠓虫样本,采用不损伤库蠓形态的方法提取基因组DNA,用CO Ⅰ基因和ITS-1基因特异引物进行PCR扩增和序列测定,采用Clustal X、DNAStar和Mega 6.1等软件进行核苷酸同源性和系统进化分析.同时将库蠓虫体压片,在体视显微镜下进行形态学鉴定,并计算AR、HR、PR、CR和TR1、TR2、TR3等数值.结果 在江城县采集15只库蠓,均具有两复眼相连接,小眼面间无柔毛,触角15节,第3、11～15节分布有嗅觉器,翅面翅基、径中、径端、径5室、中4室各有1个淡斑,中1室、中2室分别有2个和3个淡斑,其中基淡斑大,向后延伸至臀室基部翅缘;腹部有2个发达受精囊不等大,PR=3.10:±0.48,与苏岛库蠓PR值差异无统计学意义(t=1.79,P＞ 0.05).遗传进化分析显示,在ITS-1基因进化树上江城县采集的15只库蠓与苏岛库蠓位于同一分支内,核苷酸同源性在96.8％～99.3％之间,而与其他库蠓核苷酸同源性均低于94.2％;在CO Ⅰ基因进化树上15只库蠓形成一个独立进化簇,这15只库蠓核苷酸同源性在99.4％以上.结论 15只江城采集的库蠓均为苏岛库蠓,其种内变异较小.本研究增添了苏岛库蠓种类鉴定所需要ITS-1基因和CO Ⅰ基因序列,为库蠓快速鉴定和遗传进化研究提供了序列信息.
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编辑人员丨2023/8/6
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广东省中山市库蠓形态与分子鉴定
编辑人员丨2023/8/6
目的 采用形态与分子的鉴定方法对在中山市不同生境采集的库蠓进行鉴定,明确中山市库蠓的种类.方法 2018年4月至2019年3月在中山市采集库蠓样本,采用不损伤外部形态的方法提取基因组DNA,用线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因和线粒体DNA细胞色素b(Cytb)基因特异引物进行PCR扩增和序列测定,用DNAMAN V6和Mega 6.1软件进行构建N-J树.然后将库蠓虫体压片,在体视显微镜下进行形态学鉴定.结果 共采集到的104只库蠓,鉴定结果为原野库蠓Culicoides homotomus、苏岛库蠓Culicoides sumatrae、异域库蠓Culicoides peregrinus、琉球库蠓Culicoides actoni、残肢库蠓Culicoides imicola、连斑库蠓Culicoides jacobsoni、抚须库蠓Culicoides palpifer、荒川库蠓Culicoides arakawai、环斑库蠓Culicoides circumscriptus、尖喙库蠓Culicoides oxystoma、霍飞库蠓Culicoides huffi、似同库蠓Culicoides similis等12种.在构建的COⅠ和Cytb NJ树中,12个种均能各自聚为一支,且支持率均达99％,与形态学鉴定结果一致.结论 雄性库蠓可根据其尾器进行有效鉴定,分子鉴定为形态鉴定的有效补充.联合形态和分子的鉴定方法可进行库蠓种类的准确鉴定.
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编辑人员丨2023/8/6
