目的:探讨苗药组方熏蒸疗法对家兔早期膝骨性关节炎(knee osteoarthriti,KOA)模型差异表达基因进行层次聚类分析的意义.方法:将新西兰兔40只随机分为4组,空白对照组、模型对照组、苗药熏蒸组、清水对照组,每组10只.采用木瓜蛋白酶在兔膝关节腔内注射的方法复制早期KOA模型,造模成功后用苗药熏蒸疗法治疗20天,运用基因芯片检测技术对软骨组织的基因表达谱进行检测,最后将得到的原始数据通过RMA算法进行预处理,通过相关基因分析软件进行差异基因(difference gene,DEG)分析,并对其基因表达谱进行聚类分析.结果:DEG分析显示,模型对照组与空白对照组比较,差异显著基因有827个,上调435个,下调392个;苗药熏蒸组与模型对照组比较,差异显著基因有208个,上调112个,下调96个;清水熏蒸组与模型对照组比较,差异显著基因有152个,上调93个,下调59个.聚类分析显示,每个实验组的标本基本为一类,每个标本重复性好,每个实验组与对照组比较,它们的基因表达各有特点.结论:基因芯片检测可以发现苗药熏蒸疗法治疗早期KOA的差异表达基因,而聚类分析发现其相关基因的改变及其基因表达的特殊性.

背景:前期研究显示苗药熏蒸疗法对治疗骨性关节炎有确切疗效,但其作用机制不清楚.由于滑膜组织及软骨下骨中血管过度新生是骨性关节炎发生发展的重要原因,血管内皮生长因子是体内重要的促血管新生的因子,其过度表达与基质细胞衍生因子1/CXCR4信号通路存在密切联系.目的:以苗医熏蒸疗法作为干预因素,探讨基质细胞衍生因子1/CXCR4信号通路在骨性关节炎发生发展中的作用及苗药熏蒸疗法的治疗作用机制.方法:健康新西兰大白兔50只,随机分为正常组、模型组、阳性对照组(扶他林软膏外用)、早期干预组、苗药熏蒸组5组,后4组采用膝关节腔注射碘乙酸钠方法建立兔膝骨性关节炎模型,2周后造模成功开始干预治疗,连续治疗6周后取材,苏木精-伊红染色观察滑膜、软骨病理变化;免疫组化方法检测滑膜组织白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平;Elisa法检测关节液中基质细胞衍生因子1及血清中血管内皮生长因子水平;实时荧光定量PCR检测关节软骨组织中血管内皮生长因子mRNA表达;Western blot检测软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖蛋白表达.结果 与结论:①与模型组比较:苗药熏蒸组滑膜及软骨组织的炎症表达被显著抑制,病理改变减轻;苗药熏蒸组滑膜白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α的积分吸光度值、血清中血管内皮生长因子及关节液中基质细胞衍生因子1水平均降低(P＜0.05);苗药熏蒸组软骨血管内皮生长因子mRNA表达降低(P＜0.05);软骨中Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖表达均升高(P＜0.05);②苗药熏蒸组上述指标与阳性对照组及早期干预组比较无显著差异(P＞0.05).实验结果表明:苗药熏蒸疗法可能是通过减少基质细胞衍生因子1与其受体CXCR4结合,抑制白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、血管内皮生长因子表达,延缓细胞外基质破坏,起到治疗骨性关节炎作用.

目的:观察苗药熏蒸外用联合激痛点针刺治疗风寒湿型冻结肩(FS)临床疗效.方法:将80例风寒湿型FS患者随机分为治疗组和对照组,各40例.治疗组苗药熏蒸外用联合激痛点针刺治疗,对照组采用双氯芬酸二乙胺乳胶剂外用联合痛点封闭治疗;观察两组治疗前后肩关节活动度(ROM)以评价肩关节活动范围的变化,观察视觉模拟评分(VAS)以评定患侧肩关节疼痛状况,观察临床疗效,通过电话随访考察复发率情况.结果:与治疗前比较,两组患者治疗后VAS评分和ROM评分均显著改善(P＜0.05);且治疗组内旋活动方面改善优于对照组(P＜0.05);治疗组有效率高于对照组,但差异无统计学意义;治疗组患者在治疗后4个月的复发率显著低于对照组(P＜0.05).结论:苗药熏蒸外用联合激痛点治疗FS患者,在缓解疼痛和改善肩关节功能活动等方面均有较好的临床疗效,与双氯芬酸二乙胺乳胶剂外用联合痛点封闭治疗相比,更具有不易复发、疗效更持久等优点.

目的 观察苗药验方对家兔骨关节炎模型软骨细胞的影响,并探讨其防治骨关节炎软骨退变的作用机制.方法 36只家兔随机分为正常对照组、模型组、苗药熏蒸组、苗药离子导入组,每组9只.除正常对照组外,其余3组家兔右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶制造膝骨性关节炎模型.造模成功后,苗药熏蒸组与苗药离子导入组家兔分别经苗药验方熏蒸治疗及苗药验方离子导入治疗20 d,取各组家兔软骨组织行苏木精-伊红染色,并取各组家兔血清备用.取正常家兔软骨组织培养软骨细胞,将软骨细胞也分为4组:正常对照组、模型组、苗药薰蒸组、苗药离子导入组.除正常对照组外,其余3组软骨细胞用10μg/L白细胞介素-1β(IL-1β)处理24 h制备骨关节炎软骨细胞模型,造模期间分别用相应组家兔血清对软骨细胞进行体外干预,酶联免疫吸附法(ELISA)检测软骨细胞上清液中β-连环蛋白(β-catenin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,免疫印迹(Western blot)法检测软骨细胞中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、细胞外因子-16(Wnt-16)、β-catenin蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测软骨细胞中BMP-2、MMP-3、MMP-13、Wnt-16、β-catenin mRNA表达水平.结果 与模型组比较,苗药熏蒸组、苗药离子导入组家兔关节软骨表面纤维化及其软骨细胞结构破坏均得到不同程度改善.与模型组比较,苗药薰蒸组软骨细胞上清液TNF-α、β-catenin的含量显著减少(均P<0.05),软骨细胞BMP-2、MMP-3、β-catenin蛋白表达以及BMP-2、Wnt-16 mRNA表达水平显著下调(均P<0.05);与模型组比较,苗药离子导入组软骨细胞上清液中TNF-α、β-catenin的含量显著减少(均P<0.05),软骨细胞BM P-2、M M P-3、M M P-13、β-catenin蛋白表达水平以及BM P-2、MMP-3、Wnt-16 mRNA表达水平显著下调(均P<0.05).结论 苗药验方薰蒸疗法及离子导入疗法,可能通过调节Wnt/β-catenin信号通路减轻骨性关节炎软骨细胞的损伤.