目的:建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,研究不同配伍的化学成分与细胞活力以及抗炎之间的关联性,明确不同配伍对细胞活力的影响以及抗炎作用的物质基础.方法:采用高效液相色谱(HPLC)建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,以 LPS 刺激 RAW 264.7建立炎症细胞模型,对不同配伍组合对炎症细胞模型肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及以细胞活力进行检测,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究苦豆子化学成分与抗炎作用的谱效关系,筛选苦豆子抗炎作用的物质基础.结果:苦豆子生物碱类成分HPLC 指纹图谱共有峰有8个,指认出5个共有峰,分别是槐果碱、槐定碱、苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱;黄酮类成分HPLC 指纹图谱共有峰有15个,指认出3个共有峰,分别为槲皮素、紫铆因和芹菜素.相关性分析结果表明,槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱与脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7)细胞释放的炎症因子TNF-α 水平呈显著负相关,槲皮素与细胞活力呈负相关,紫铆因、芹菜素与细胞活力呈正相关,槐定碱、氧化苦参碱与细胞活力呈负相关,苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱与细胞活力呈正相关.结论:槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱可能是苦豆子抗炎的物质基础,可为挖掘苦豆子的质量标志物以及药材质量控制提供参考.

目的:探讨从苦豆子(Sophora alopecuroides)中提取分离的苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的毒性作用及其作用机制.方法:苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱分别作用于PC12细胞,采用MTT法分别检测苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱对PC12细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测PC12细胞的凋亡率;蛋白免疫印迹(Western Blotting)法检测神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)及核因子E2相关因子(nuclear factor E2 related factor,Nrf)2蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,3种苦豆子生物碱均能抑制PC12细胞增殖,促使细胞发生凋亡,并呈现一定的浓度依赖性(P＜0.05或P＜0.01),其中苦豆子总碱对PC12细胞的增殖抑制作用和促凋亡作用最为显著(P＜0.01);随着苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱作用浓度的增加,PC12细胞NSE的表达显著减弱(P＜0.05或P＜0.01),而PGC-1α、Nrf 2的表达显著增强(P＜0.05或P＜0.01).结论:苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱对PC12细胞具有一定的细胞毒性,其中苦豆子总碱最为显著,其机制可能是通过细胞氧化应激损伤和线粒体功能障碍造成的.

目的:探讨苦豆子总碱(total alkaloid of Sophora alopecuroides,TASA)降低自发性高血压大鼠(SHR)动脉血压的机制.方法:①将42只16周龄的SHR随机分为SHR模型对照组、TASA组和5组拮抗剂(左旋硝基精氨酸、甲烯蓝、维拉帕米、普萘洛尔和吲哚美辛)组;另取8只同周龄Wistar大鼠作为正常对照组.TASA组:股静脉注射TASA(2、4和8 mg·kg-1);拮抗剂组:先分别注射对血压无影响的阻滞剂后,再给TASA(8 mg·kg-1);SHR组和正常组注射等量生理盐水.经颈总动脉插管记录各组给药前后的动脉血压.②颈动脉血压记录30 min以后,抽取正常组、SHR组和TASA组大鼠的血液2mL,提取血清,以酶联免疫法测定各组NO、ET-1和AngⅡ的含量.结果:①TASA能显著降低SHR的血压,并具有量效依赖性(SBP:r=0.83,t=56.52,P＜0.01;DBP:r=0.78,t=45.92,P＜0.01;MAP:r=0.83,t=54.43,P＜0.01).维拉帕米、左旋硝基精氨酸和甲烯蓝可明显抑制TASA(8mg/kg)的降压效应(P＜0.01);而吲哚美辛、普萘洛尔对TASA的作用无影响.②SHR组的ET-1和AngⅡ明显高于正常组,而NO低于正常组(P＜0.05);TASA组的ET-1和AngⅡ显著低于SHR组,而NO则高于SHR组(P＜0.05).结论:TASA降低SHR血压与其恢复血管内皮细胞功能释放NO的增多和减少细胞钙内流有关.

目的 对比观察苦豆子总碱及其苦参碱(matrine)、槐定碱(sophoridine)单用和联用对白色念珠菌的抑制作用.方法 通过对白色念珠菌的培养,观察真菌菌丝形成;并进行抑菌圈实验测定药物的敏感性;再用噻唑蓝微量稀释(MTT)法检测最低抑菌浓度;通过磷钼酸比色法测定吸光度,判断白色念珠菌细胞外液磷含量,推测药物对白念珠菌细胞膜通透性的影响;最后用薄层色谱法观察药物对白色念珠菌细胞膜成分麦角甾醇等合成有无抑制作用.结果 药物对白色念珠菌菌丝形成能力的影响由强到弱依次为:苦豆子总碱组、混合组(苦参碱∶槐定碱8∶5)、苦参碱组、槐定碱组、氟康唑组;白色念珠菌对苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱具有较强敏感性且最低抑菌浓度分别是:2.500 mg/mL、3.125 mg/mL、6.25 mg/mL;苦豆子总碱组细胞外磷含量(0.175 2μg/mL),混合组(0.147 3 μg/mL),苦参碱(0.110 1μg/mL),槐定碱(0.103 9 μg/mL),氟康唑组(0.181 4μg,/mL);由薄层色谱法可知麦角甾醇的斑点由小到大依次为苦豆子总碱组、混合组、苦参碱组、槐定碱组.结论 苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱均对白色念珠菌有明显抑菌作用;混合组对白色念珠菌细胞膜成分麦角甾醇合成有明显抑制作用;苦参碱和槐定碱单用时对麦角甾醇合成和细胞膜通透性影响效果没有两药联用效果好.

目的 观察苦豆子总生物碱对溃疡性结肠炎(UC )大鼠中 HSP70的影响.方法 选取55只大鼠平均分成5组,即空白对照组、模型组、SASP组、苦豆子碱高剂量组,苦豆子碱低剂量组,除空白对照组外,其余各组采用 TNBS复制UC大鼠模型,模型复制的同时给予SASP或苦豆子碱治疗,3周后观察粪便隐血、DAI 、HSP70等.结果 与空白对照组比较,模型组 HSP70 下降,治疗组 HSP70升高,差异有统计学意义( P＜0 .05) .结论 苦豆子碱可能通过提高保护性蛋白水平,维持促炎因子与抗炎因子处于平衡状态,从而调节肠道局部免疫应答和缓解炎症程度.

丹红注射液为传统中药丹参与红花的复方制剂,具有活血通经、散瘀止痛之功,临床广泛应用于心绞痛、心肌梗塞、肺心病、脑卒中、缺血性脑病以及糖尿病并发症、骨科疾病的治疗,具有良好疗效[1];尤其在治疗冠心病方面疗效确切,具有预防、治疗双重效果[2].氧化苦参碱是苦参、山豆根、苦豆子等中药的提取物,具有抗心肌缺血、抗心律失常、保护神经细胞、抗肿瘤、镇静、抗炎等多种药理作用[3-4],在心血管疾病防治方面应用前景广阔[5].笔者临床通过24h动态心电图检测,观察丹红注射液联合苦参碱对冠心病患者心肌缺血总负荷、心率变异性、Q-T离散度的影响,现报告如下.

目的 研究苦豆子总碱对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的毒性.方法 PC12细胞与0.5、1.0、2.0 g/L苦豆子总碱分别孵育24h后,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞膜损伤,Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡,PI染色法检测细胞周期,FCM法检测细胞内Ca2+浓度.结果 随着苦豆子总碱质量浓度增加,PC12细胞收缩、变小变圆、破裂脱落现象越明显.与对照组比较,苦豆子总碱组PC细胞存活率及Go/G1期、G2/M期细胞比例显著降低(P＜0.01),细胞LDH漏出率、早凋细胞及S期细胞比例、Ca2浓度显著增加(P＜0.01).结论 苦豆子总碱对PC12细胞有明显毒性,其机制可能是通过诱导细胞凋亡、抑制细胞内DNA合成、阻滞细胞周期、引起细胞内Ca2+超载来导致细胞死亡.

目的:应用HPLC-MS对苦豆子总碱双层包衣微丸比格犬给药后的入血成分进行定性研究.方法:以0.1％甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min-1,在电喷雾离子源(ESI)正离子模式下,采用多反应检测(MRM)模式进行检测.结果:HPLC-MS可同时检测出苦豆子总碱中7种生物碱,从苦豆子总碱双层包衣微丸的比格犬血浆中鉴定出苦豆碱、金雀花碱、槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱.结论:建立了一种快速、高效的HPLC-MS方法同时分离苦豆子总碱中的生物碱,可为苦豆子总碱双层包衣微丸的药代动力学以及入血成分的药效学等方面研究提供理论依据.

土壤种子库作为地上植被更新的潜在种源,在植被自然恢复和演替过程以及生态系统建设中起着重要作用.以宁夏盐池县荒漠草原区4种植物群落为研究对象,通过对封育16年后植物群落土壤理化性质的变化与其土壤种子库的特征之间的关系的探讨,揭示荒漠草原植物群落的土壤种子库分布特征和演替趋势,以及土壤质量的改变如何影响土壤种子库特征.研究结果表明:(1)不同植物群落土壤种子库物种组成及种子密度不同,同一物种在不同植物群落土壤种子库中出现时种子密度也存在差异;禾本科、菊科、藜科植物种在4种植物群落土壤种子库中出现比例均较高,分别占到26.19％、21.43％和19.05％,占总物种数的66.7％;灰绿藜、冰草、碱蓬在4种植物群落土壤种子库中均有出现.(2)4种植物群落土壤种子库中多年生植物和一年生植物种子居多,灌木、半灌木植物种较少.(3)4种植物群落土壤种子库中物种数和种子密度均表现为:芨芨草群落＞苦豆子群落＞油蒿群落＞盐爪爪群落;且随着土层的加深,4种植物群落土壤种子库中物种数和种子密度均呈递减趋势.(4)4种植物群落土壤种子库中Shannon-Wiener指数、Simpsin指数、Pielou指数和Patrick指数均表现为芨芨草群落＞苦豆子群落＞油蒿群落＞盐爪爪群落.此外,芨芨草群落土壤种子库与油蒿群落土壤种子库相似性最高,油蒿群落与盐爪爪群落的最低.(5)土壤种子库物种多样性特征指数与土壤pH、含水量、碱解氮呈正相关,与土壤电导率呈负相关,其中土壤pH和电导率对种子库物种多样性的影响较大.荒漠草原封育以后,土壤种子库中植物种数、种子密度和物种多样性均呈增加趋势,且以多年生植物和一年生植物种子居多;禾本科和豆科植物的物种数和种子密度大于菊科和藜科,这表明围封后牧草品质改善,植物群落正向演替.

目的 对比研究苦豆子总碱、槐果碱、苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱体外抗烟曲霉、须癣毛癣菌和新生隐球菌的敏感性,为苦豆子进一步开发利用奠定基础.方法 分别用管碟扩散法和微量液基稀释法,测定苦豆子总碱、槐果碱、苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱对烟曲霉、须癣毛癣菌和新生隐球菌的抗菌活性.结果 管碟法显示上述5种生物碱体外对烟曲霉、须癣毛癣菌和新生隐球菌均有不同程度的抗菌活性.前4种生物碱对烟曲霉的最低杀菌浓度(MFC)分别为25.0、4.25、5.0、3.125 mg·mL-1,氧化苦参碱对烟曲霉MFC>500 mg·mL-1;对须癣毛癣菌的MFC分别为3.125、2.125、5.0、1.5625、125 mg·mL-1;对新生隐球菌的MFC分别为3.125、4.25、10、6.25、1000 mg·mL-1.结论 槐果碱、苦参碱及槐定碱其抗真菌活性与苦豆子总碱相当,氧化苦参碱的作用不显著.