急性和慢性创面感染发病率和致死率居高不下，给全球医疗卫生系统带来巨大负担。科学家们已对感染的潜在机制进行了广泛研究，标准化创面治疗已经成为常规操作。但是，生物膜形成、延迟愈合以及药物抵抗的出现，导致创面感染的诊断和治疗仍然面临巨大的挑战。南京中医药大学王裔惟教授、陈军教授团队在《Burns & Trauma》发表题为《Challenges and innovations in treating chronic and acute wound infections: from basic science to clinical practice》的综述，系统讨论了急性和慢性创面感染的病理学和相关菌群特征，以及临床诊断、非手术及手术治疗等面临的挑战。该团队详细分析了目前主要应用的创面抗菌剂、抗菌敷料以及抗生素等在临床治疗创面感染中的效果，指出随着新型抗菌肽、噬菌体、药物控释系统、智能水凝胶敷料、光电生物干预和中药的不断开发应用，创面感染问题将有望得以解决；同时优化早期诊断方法敏感性，重视联合治疗和关注皮肤菌群微生态调节在创面愈合中的有益作用，将为创面感染治疗提供新方向。

创面愈合是一个涉及血管生成和抗感染的过程，它仍然是世界范围内实验和临床研究中的挑战。据报道，锌离子可广泛参与血管生成并发挥抗菌作用，因此适合用于促进创面愈合。近日，上海市第六人民医院骨科、上海市四肢显微外科研究所的陈仕艳教授团队，上海东华大学材料科学与工程学院的王华平教授团队与上海交通大学医学院附属第一人民医院创伤中心的黄寅骏教授团队联合，在《Burns & Trauma》杂志发表了题为《Zn2+-Loaded adhesive bacterial cellulose hydrogel with angiogenic andantibacterial abilities for accelerating wound healing》的实验研究，观察负载锌离子的黏性细菌纤维素水凝胶在创面愈合过程中的血管生成和抗菌能力，以探讨其在促进创面愈合中的重要意义。该研究制备的细菌纤维素/聚多巴胺/沸石咪唑酸酯骨架-8（bacterial cellulose/polydopamine/zeolitic imidazolate framework-8，BC/PDA/ZIF8）水凝胶具有合适的机械强度、优异的溶胀性能、良好的组织黏附性、有效的血管生成和抗菌作用以及良好的物理屏障性能。体内实验表明，BC/PDA/ZIF8水凝胶通过刺激血管生成，加速大鼠全层缺损创面愈合。该研究证明，BC/PDA/ZIF8水凝胶具有抗菌和改善细胞增殖、上皮再形成和组织重塑作用，在促进大鼠全层缺损皮肤创面愈合方面具有巨大潜力。

目的 建立体外小肠类器官培养体系,探讨脂多糖(LPS)对小肠类器官生长和炎性因子分泌的影响.方法 体外无菌分离并收集C57BL/6小鼠小肠隐窝细胞团,使用类器官基质胶进行包埋,并在完全培养基的支撑下,培养形成具有小肠上皮样结构的立体多叶结构的小肠类器官.小肠类器官培养5～7 d或类器官中央区域变黑时传代,传代后3d将小肠类器官随机分为不同质量浓度LPS组(0、150、175、200、225、250、275、300 mg/L).在LPS诱导24h和48h后观察小肠类器官生长和形态特征变化;用CCK-8法检测不同时间和质量浓度LPS对小肠类器官诱导炎症后增殖活力的影响;采用酶联免疫吸附试验检测4种不同质量浓度LPS(0、175、200、225 mg/L)在不同时间对类器官培养上清液中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素(IL)-1α、IL-6、IL-10水平的影响.结果 初步构建了小鼠小肠类器官培养体系.不同时间和质量浓度LPS作用小肠类器官诱导炎症后,通过形态学观察到小肠类器官会有不同程度的膨胀和内腔凋亡现象的发生,受损的肠上皮中隐窝或肠干细胞的增殖分化和出芽数量也受到不同程度的抑制.小肠类器官在175～225 mg/L的LPS诱导24h和48h后,其增殖活力呈现不同程度的降低(P＜0.05),但细胞活力仍大于50%.200 mg/L和225 mg/L的LPS诱导24h和48h后,IL-1α、IL-6和GM-CSF水平部分升高(P＜0.05);200 mg/L的LPS诱导24h和48h后,IL-10水平降低(P＜0.05).结论 本研究初步构建了不同质量浓度和时间的LPS诱导小肠类器官体外肠道炎症损伤模型,为今后肠道疾病的机制研究和有效药物的筛选提供了更为可靠的研究平台.

目的 探索成年大鼠心房成纤维细胞体外分离及纯化培养的方法 .方法 无菌条件下将大鼠心房组织剪成1 mm3大小组织块,经心肌消化液(溶液终浓度为0.8 g/L胰蛋白酶和0.4 g/LⅡ型胶原酶混合液)多次消化,收集分离的大鼠心房成纤维细胞,通过差速贴壁分离方法纯化原代成纤维细胞,细胞生长接近于次融合状态下进行传代.倒置显微镜下观察细胞生长及形态学特点,免疫荧光法进行细胞鉴定.结果 刚消化分离下来的细胞呈亮球形,轮廓清晰,单个散在或聚集成团分布,差速贴壁70 min后即有大量细胞贴壁,其中细胞部分已开始伸展,轮廓逐渐模糊.4～5 d可形成单层细胞,传代后的细胞呈长纺锤形或多边形.免疫荧光染色发现其抗波形蛋白(Vimentin)与抗胶原受体-2(DDR2)染色阳性,抗vWF及抗α-SMA染色阴性,鉴定为成纤维细胞.结论 混合酶消化法是成年大鼠心房成纤维细胞分离培养的简便有效的方法.

患者男,53岁,以"反复中上腹闷痛7个月"行胃镜检查,见胃体大弯上段一火山样隆起型病变,中央凹陷,表面见少许白苔,大小约1. 0 cm,边界尚清(图1). 多次活检病理均提示:急慢性炎症细胞浸润,幽门螺杆菌(+). 既往史:发现乙肝病毒携带十余年. EUS:病灶源于黏膜下层,呈不均匀偏低回声,呈分叶状,边界尚清,紧临肌层,肌层尚完整,考虑黏膜下肿物可能(图2). 上腹部CT增强:胃底体交界处稍不规则增厚,最厚约0. 8 cm,略呈结节样;邻近肝胃间隙小淋巴结;考虑:炎症(?),间质瘤(?),异位胰腺(?)(图3).为进一步明确病灶性质,行诊断性ESD,标本大小约1. 5 cm× 1. 5 cm(图4). 术后病理诊断:胃淋巴上皮瘤样癌( lympho-epithelioma-like gastriccarcinoma,LELC) ,侵及黏膜下层,标本周切缘及底切缘均未见癌残留,无神经及脉管侵犯. 术后病理学及免疫特点:肿瘤呈圆盘状,中央凹陷,最大直径1. 5 cm,灰褐色,质地稍硬,无包膜. 镜检可见在大量淋巴细胞的背景下,瘤细胞呈团状、巢状、条索状分布(图5A). 癌细胞呈圆形、椭圆形或梭形,呈丰富嗜酸性,核膜厚,分裂像少见,染色质呈空泡状,部分可见明显核仁,浸润性淋巴样细胞(包括小淋巴细胞、少量转化样淋巴细胞及浆细胞,图5B)明显多于瘤样细胞,部分可见淋巴滤泡形成,异形淋巴细胞少见,间质胶原纤维蛋白成分较少. 免疫组化:Ki-67 (60％+),CK18(+++),CD56(-),P63(-),CgA(-),SY(-), ck(pan)(+++),EBER(+). 肿瘤细胞CK18、ck(pan)阳性,提示来源于上皮来源,并采用原位杂交的方法检测出EB病毒编码的小RNA( EBER+) (图6A) ,阳性定位在肿瘤细胞核中(图6B) ,而周围胃黏膜及淋巴样细胞阴性. 手术治疗及随访:考虑到特殊类型的胃癌及侵犯黏膜下层,患者及其家属考虑行根治性全胃切除术( D2) ,术后病理:部分区域黏膜缺失,间质纤维、肌纤维母细胞增生,找到周围25枚淋巴结,未见转移灶. 2个月后复查全身PET-CT未见肿瘤复发及转移征象. 目前仍在随访中.

目的 以苯甲酸为原料,经4步反应合成一系列N-取代苯基-5-取代苯基-3H-1,2,4-三氮唑-3-硫酮化合物并研究其抗菌活性.方法 基于课题组前期对新型潜在三唑类抗菌化合物6h的作用机制研究,筛选多个侧链基团,使用乙醇和碳酸钠作溶剂改善最后一步反应条件,通过硅胶柱色谱分离纯化目标化合物,合成一系列1,2,4-三唑类化合物并采用质谱(MS)和1H NMR、13CNMR进行结构表征.通过琼脂扩散法初步筛选所有化合物对肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌3种常见菌株的抗菌活性,并通过微量稀释法进一步测定它们的最小抑菌浓度(MIC值).结果 合成17个含有卤代苯基和其他侧链基团的目标化合物,其MS以及核磁共振谱图数据表明所有化合物结构正确.抗菌活性初步筛选可知化合物6a、6b、6d、6f、6g、6h、6k、6m和6p等9个化合物具有不错的抑菌能力,其MIC测试结果表明,大部分化合物对所测菌株的MIC值在25～100μg/mL范围内.尤其是化合物6h和6k对肺炎克雷伯菌的MIC值达到25μg/mL,抑菌活性与对照药物氨苄西林相当.结论 在前期作用机制研究基础上,通过对构效关系的阐述,发现一些侧链片段如间位卤代苯基或对位卤代苯基、三氟甲基苯基等具有吸电子基团的苯基、吡啶基等对1,2,4-三唑类衍生物的抗菌活性有明显增强作用,证实侧链基团与受体蛋白形成特异性协调作用和氢键作用从而发挥衍生物的抗菌活性.

目的 了解中山市中央空调冷却塔水血清1型(LP1)及血清7型(LP7)嗜肺军团菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型情况.方法 对2012-2014年从中山市部分酒店、娱乐场所、商场、医院等公共场所中央空调冷却塔水样本中分离出的41株LP1型嗜肺军团菌和12株LP7型嗜肺军团菌进行脉冲场凝胶电泳,运用Bio Numerics6.6软件进行聚类分析.结果 按照100％的相似程度,41株LP1型嗜肺军团菌分为26种PFGE型别,每个带型包括1～6株菌,菌株之间的相似系数为16.6％～100％;12株LR7型嗜肺军团菌分为10种PFGE型别,每个带型包括1～2株菌,菌株之间的相似系数为19.3％～100％.不同地区和不同年份分离的菌株存在相同的PFGE型别;同一场所可存在相同的PFGE型别,也可跨月份或年份存在不同的型别.按照90％以上的相似程度,LP1型嗜肺军团菌有4个克隆群,包含的菌株数和PFGE带型占其血清型别分离株总数以及PFGE型别总数的51.2％(21/41)和30.8％(8/26);LP7型嗜肺军团菌有2个克隆群,包含的菌株数和PFGE带型占其血清型别分离株总数以及PFGE型别总数的50.0％(6/12)和40.0％(4/10).克隆群在空间和时间分布上无明显差异.结论 中山市中央空调冷却塔水中LP1型及IP7型嗜肺军团菌分离株存在广泛的PFGE基因型别,未形成某一优势基因群的地区优势及时间趋势.

[背景]活性污泥法已广泛应用于城市污水和工业废水的处理,微生物菌胶团的形成在污泥通过重力沉淀实现泥水分离和污泥回用的过程中起着重要作用.从西安北石桥污水处理厂活性污泥中分离到一株菌胶团形成菌XHY-A6,经鉴定为解壳聚糖松江菌(Mitsuaria chitosanitabida).[目的]旨在揭示该株解壳聚糖松江菌菌胶团形成相关的基因及其菌胶团形成机制.[方法]结合分子遗传学,包括转座子插入突变技术和遗传互补分析以及基因组学方法分析与菌胶团形成相关的基因和基因簇.[结果]通过转座子插入突变技术获得了两株菌胶团形成缺陷的突变株,转座子插入位点在糖基转移酶(称为gt3)和多糖链长决定蛋白(wzz)基因内,且这两个基因位于一个与菌胶团形成相关的大型基因簇内,该基因簇内还包括与胞外多糖生物合成和分泌相关的基因、epsB2-prsK-psrR-prsT基因以及一个编码PEP-CTERM蛋白A的基因,遗传互补分析证明gt3基因、WZZ基因及其下游WZC基因在菌胶团形成过程中是必需的.[结论]松江菌中菌胶团形成和调控机制极可能与活性污泥优势菌动胶菌(Zoogloea)非常相似,即由胞外多糖和PEP-CTERM家族胞外蛋白质共同介导.从武汉二郎庙、汤逊湖和深圳南山污水处理厂活性污泥中分离纯化出松江菌,这些松江菌属细菌可以用于富含几丁质和壳聚糖的市政污水和虾蟹类食品加工废水的净化和资源化利用.

活性污泥法是借助活性污泥微生物菌胶团形成来实现泥水重力分离和部分污泥回用,辅以曝气供氧,在曝气池中高密度的微生物细胞可将溶解性有机污染物迅速降解、转化后为己所用,外排的剩余污泥带走大量有机质和氮磷,水质得以净化.活性污泥微生物所合成的胶质状胞外多聚物(Extracellular polymeric substances,EPS)是污泥菌胶团形成必不可少的“黏合剂”,吸水性极高,这也造成剩余污泥难以处置和利用.我们初步总结了活性污泥微生物宏基因组研究概况,利用分子遗传学和基因组学手段,对活性污泥优势种动胶菌(Zoogloea)和其他菌胶团形成菌的EPS生物合成途径和菌胶团形成与调控机制加以研究,鉴定出一个约40 kb的胞外多糖生物合成大型基因簇和一个由7个基因组成的小型基因簇,该基因簇中除胞外多糖合成相关基因外,还编码组氨酸激酶PrsK和反应调节蛋白PrsR双组分系统,可激活RpoN σ因子共同调控一类称之为PEP-CTERM的新型胞外蛋白质的表达,参与菌胶团的形成.PEP-CTERM富含天冬酰胺(缩写为Asn或者N)残基,可能与胞外多糖通过N-连锁的糖基化形成复合物,包裹微生物细胞群体来介导菌胶团的形成.类似的PEP-CTERM基因和胞外多糖合成基因簇在许多重要的活性污泥细菌如聚磷菌和全程氨氧化菌中存在,说明这些细菌也是菌胶团形成菌,可通过污泥沉淀和回用在活性污泥中得以富集.这些研究结果可供活性污泥膨胀控制、污泥减量和剩余污泥资源和能源回收利用参考.

兰科植物菌根真菌(Orchid mycorrhizal fungi,OrMF)在兰科植物种子萌发和后续生长发育过程中具有重要作用.该研究采用培养(菌丝团分离)和非培养(克隆文库)2种方法获得同一栖息地3种不同杓兰属植物根中菌根真菌ITS序列并划分可操作分类单元(Operational taxonomic units,OTUs),分析其系统发育关系和多样性.结果表明:(1)所有根段中都有菌丝团定植,共分离出菌根真菌64株,其中63株为胶膜菌科(Tulasnellaceae)真菌,1株为角担菌科(Ceratobasidiaceae)真菌;可划分为7个OUT,每个OTU代表菌株的菌丝都能形成OrMF典型的近球形或椭球形链状排列的念珠状细胞;分离出来的菌根真菌均为无性型菌丝且不产生无性孢子.(2)非培养法得到的3种杓兰属植物的根中OrMF分别隶属于胶膜菌科(Tulasnellaceae),腊壳菌科(Sebacinaceae)、角担菌科(Cer-atobasidiaceae)和革菌科(Thelephoraceae),其中胶膜菌科OTU在种类和数量上占有绝对优势,培养和非培养2种方法得到的OrMF OTU类型和数量均为西藏杓兰(Cypripedium tibeticum)>无苞杓兰(C.flavum)>黄花杓兰(C.bardolphianum),但培养法少于非培养法.(3)对胶膜菌进行系统发育分析显示,优势和非优势OTU均分布在系统发育树的3个不同分支上,这种与多种亲缘关系较远的O rM F共生的现象可能与杓兰属植物对环境的适应性有关,且不同杓兰的O rM F物种丰富度没有显著差异,但群落结构存在差异.