目的:探讨补肾健脾开心方对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)大鼠学习记忆能力的影响及其作用机制。方法:72只雄性SPF级SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、补肾组、健脾组、开心组、补肾健脾开心组，每组12只。采用D-半乳糖注射制备AD大鼠模型，1次/d，持续6周。补肾组(3.60 g·kg －1·d －1)、健脾组(4.05 g·kg －1·d －1)、开心组(2.34 g·kg －1·d －1)、补肾健脾开心组(9.99 g·kg －1·d －1)大鼠分别给予对应剂量的药物灌胃，空白组、模型组大鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液，1次/d，连续28 d。采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力，免疫组化法检测脑皮质组织磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)的表达，RT-PCR技术检测脑皮质组织自噬相关蛋白p62和Beclin的表达。采用SPSS 25.0统计软件进行数据处理，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。 结果:Morris水迷宫结果显示，6组大鼠的逃避潜伏期、穿越平台次数均差异有统计学意义( F＝368.10，47.43，均 P<0.01)。补肾健脾开心组逃避潜伏期比模型组低[(29.30±1.64) s，(55.58±3.23) s]、跨越平台次数比模型组高[(5.17±0.72)次，(1.50±0.52)次] (均 P<0.01)。补肾组、健脾组、开心组逃避潜伏期均比补肾健脾开心组高(均 P<0.01)，补肾组跨越平台次数比补肾健脾开心组低( P<0.01)。免疫组化结果显示，6组间的PI3K、Akt、mTOR阳性蛋白表达水平均差异有统计学意义( F＝68.52，22.22，31.52，均 P<0.01)。补肾健脾开心组PI3K阳性蛋白表达水平[(0.47±0.15)，(0.57±0.12)]、Akt阳性蛋白表达水平[(0.31±0.02)，(0.38±0.02)] 、mTOR阳性蛋白表达水平[(0.22±0.18)，(0.28±0.11)]均比模型组低(均 P<0.01)。补肾组、健脾组、开心组PI3K阳性蛋白表达水平及mTOR阳性蛋白表达水平均比补肾健脾开心组高(均 P<0.01)，补肾组、开心组Akt阳性蛋白表达水平均比补肾健脾开心组高( P<0.01)。RT-PCR结果显示，各组间的Beclin、p62 mRNA水平均差异有统计学意义( F＝8.79，21.01，均 P<0.01)。补肾健脾开心组Beclin mRNA比模型组高[(0.97±0.07)，(0.64±0.12)]、p62 mRNA比模型组低[(0.98±0.16)，(1.16±0.24)] (均 P<0.01)。补肾组、健脾组、开心组p62 mRNA均比补肾健脾开心组高(均 P<0.05)。 结论:补肾健脾开心方可以改善AD大鼠认知障碍，提高学习记忆能力，其作用机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR自噬通路有关，且组方用药优于拆方用药。

目的 观察补肾健脾开心散对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及脑皮质区Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB通路相关炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β表达的影响,探讨其作用机制.方法 60 只SD大鼠随机分为空白(Ctrl)组、模型(AD)组、补肾(BS)组(3.6 g/kg补肾方)、健脾(JP)组(4.05 g/kg健脾方)、开心(KX)组(2.34 g/kg开心方)、补肾健脾开心(BSJPKX)组(9.99 g/kg补肾健脾开心散),每组 10 只.采用D-半乳糖(D-gal)注射制备AD大鼠模型,BS组、JP组、KX组、BSJPKX组分别以相应药物灌胃,Ctrl组、AD组给予等量生理盐水,1 次/d.给药 4 w后,Morris水迷宫实验检测学习记忆能力,分别用免疫组化法、实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测脑皮质组织TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β表达.结果 与Ctrl组比较,AD组空间学习记忆能力明显下降(P<0.05,P<0.01),TLR4/NF-κB通路被激活,IL-1β、TNF-α表达显著增高(P<0.05,P<0.01);经补肾健脾开心散治疗后,与AD组比较,BSJPKX组空间学习记忆能力显著改善(P<0.05,P<0.01),TLR4/NF-κB通路被抑制,IL-1β、TNF-α表达显著降低(P<0.05,P<0.01).结论 补肾健脾开心散可以保护AD大鼠神经元,其作用机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路减轻神经炎症有关.

目的 观察补肾健脾开心方对衰老大鼠学习记忆能力、认知功能及脑皮质氧化应激的影响,并探讨其作用机制.方法 47 只SD大鼠根据随机数字表法分为空白组(n=10)和造模组(n= 37).造模组大鼠腹腔注射D-半乳糖生理盐水溶液(300 mg/kg),连续 6 周,建立衰老大鼠模型.造模成功后,任意取30 只大鼠,随机数字表法分为模型组、补肾健脾开心方组和维生素E组,每组10 只.补肾健脾开心方组大鼠给予补肾健脾开心方(9.99 g/kg)灌胃,维生素E组大鼠给予维生素E(13.5 mg/kg)灌胃,空白组、模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,每日1 次,连续 4 周.给药结束后,Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,旷场实验检测大鼠认知功能,WST-1 法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、TBA法检测丙二醛(MDA)含量、比色法检测抑制羟自由基能力,免疫组织化学法检测脑皮质半胱天冬酶-1(Caspase-1)阳性表达,实时荧光PCR法检测脑皮质Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核红细胞2 相关因子 2(Nrf2)、醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期从第 3 天开始延长(P<0.05,P<0.01)、跨越平台次数减少(P<0.01),运动距离和中心区域运动时间比例减少(P<0.01),SOD活力和抑制羟自由基能力减弱(P<0.01),MDA表达增多(P<0.01),Caspase-1 阳性表达增多(P<0.01),Keap1 mRNA 表达增多(P<0.01),Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA 表达减少(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,补肾健脾开心方组大鼠第4、5 天逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01)、跨越平台次数增多(P<0.01),运动距离和中心区域运动时间比例增多(P<0.01),SOD活力和抑制羟自由基能力增强(P<0.01),MDA表达减少(P<0.01),Caspase-1 阳性表达减少(P<0.01),Keap1 mRNA表达减少(P<0.01),Nrf2、HO-1 mRNA表达增多(P<0.05,P<0.01).结论 补肾健脾开心方可以改善衰老大鼠认知障碍、延缓衰老,其作用机制可能与调控氧化应激有关.

目的 观察补肾健脾开心方对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠学习记忆能力、认知功能及脑皮质区自噬及凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 60 只SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肾组(3.6 g/(kg·d))、健脾组(4.05 g/(kg·d))、开心组(2.34 g/(kg·d))、补肾健脾开心组(9.99 g/(kg·d)),每组 10 只.采用D-gal注射制备AD大鼠模型,补肾组、健脾组、开心组、补肾健脾开心组分别以相应药物灌胃,空白组、模型组给予等量生理盐水,每日 1 次.给药 4 周后,Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,旷场实验检测大鼠认知功能,Western blot检测脑皮质组织LC3-I、LC3-II、Beclin1 的表达,免疫组化法检测脑皮质组织Bax、Bcl-2 的表达,RT-PCR检测脑皮质组织Beclin1、P62、Bax、Bcl-2基因水平的表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力、认知功能明显下降(P<0.01),Beclin1、LC3-I/LC3-II比值显著下调(P<0.01),P62、Bax增多(P<0.01),Bcl-2 及Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01);经补肾健脾开心方治疗后,与模型组比较,补肾健脾开心组大鼠空间学习记忆能力、认知功能改善(P<0.01),Beclin1、LC3-I/LC3-II比值显著上调(P<0.01),P62、Bax减少(P<0.01),Bcl-2 及Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.01).结论 补肾健脾开心方可以改善AD大鼠认知障碍,其作用机制可能与调控自噬及凋亡有关.