目的:探讨新型光遗传学工具Channelrhodopsin-XXM2.0 （XXM2.0）、Channelrhodopsin- PsCatCh2.0 （ PsCatCh2.0）的光敏感性及动力学特征，分析其是否可用于光遗传学视觉功能的恢复。 方法:通过分子生物学技术将XXM2.0和 PsCatCh2.0的基因片段连接到包含抗氨苄青霉素筛选基因和报告基因的载体pCIG （c）-msFoxn3上，形成新质粒pCIG （c）-msFoxn3-XXM2.0、pCIG （c）-msFoxn3- PsCatCh2.0。将构建的新质粒转染到HEK 293T细胞上，用HEKA膜片钳系统行全细胞模式记录对光反应。在2.7×10 16、4.7× 10 15、6.4×10 14 photons/ （cm 2·s）的光强下记录电流大小；在2.7×10 16 photons/ （cm 2·s）光强下刺激XXM2.0、 PsCatCh2.0并让其充分恢复，在Clampfit 10.6软件中分析开放和关闭时间常数；在相同光强下，设置2~ 32 Hz的光脉冲刺激，记录XXM2.0、 PsCatCh2.0的响应情况，并在重复光刺激后间隔4000 ms和200 ms来分析电流衰减情况。组间比较均采用独立样本 t检验。 结果:在XXM2.0、 PsCatCh2.0序列两端引入限制性内切酶位点EcoRⅠ和EcoRⅤ，酶切后通过T4 DNA连接酶成功构建新质粒pCIG （c）-msFoxn3-XXM2.0和pCIG (c）-msFoxn3- PsCatCh2.0，并转染表达在HEK 293T细胞上。XXM2.0和 PsCatCh2.0均表现出光强依赖性，光强越大电流越大。在视网膜安全阈值内的光强6.4×10 14 photons/ （cm 2·s）刺激下，XXM2.0和 PsCatCh2.0仍产生较大电流，分别为（92.8±142.0）、（13.9±5.6）pA；两者比较，差异无统计学意义（ t=1.24、1.24， P=0.28、0.29）。XXM2.0、 PsCatCh2.0的开放时间常数分别为（23.9±6.7）、（2.4±0.8）ms，关闭时间常数分别为（5 803.0±568.2）、（219.9±25.6）ms；两者比较，XXM2.0开放时间常数、关闭时间常数均较 PsCatCh2.0大，差异均有统计学意义（ t=7.10、31.60， P=0.00、0.00 ）。在响应频率方面，XXM2.0和 PsCatCh2.0均能很好地响应32 Hz的高频率脉冲光刺激，并在较长时间（4000 ms）和较短时间（200 ms）间隔的重复光刺激后均保持较小的电流衰减率。 结论:XXM2.0和 PsCatCh2.0均可在对视网膜安全的光强条件下被激活，并都能以较低的电流衰减来响应高频率（至少32 Hz）的脉冲光刺激，均满足利用光遗传学来恢复视觉功能所需的光敏蛋白特性。

速度阶跃试验(velocity step test,VST)是一种评估前庭功能的旋转试验,能够反映水平半规管前庭眼反射功能和速度存储机制.我们对VST的机制、检查方法、临床表现及影响因素进行了综述.在VST中,衰减时间常数(time constant,Tc)与峰值增益是两个主要参数,较短的Tc常见于单侧或双侧外周病变,而较长的Tc可能与中枢处理缺陷有关.虽然峰值增益重要性略逊于Tc,但其可以为Tc提供补充信息.Tc与正弦谐波加速试验的相位可进行换算,这两种方法可在临床上互为补充.在实际应用中,Tc会受到检查顺序、转椅速度、头部位置、适应性和警觉性、乙醇作用和视觉条件等因素的影响.目前,VST在前庭领域的研究主要限于描述前庭双温和晕动症的表现,对于其在其他领域的应用,仍需要进一步的研究.

目的 探讨基于联合动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)灌注参数、表观扩散系数(ADC)值和临床特征模型对人表皮生长因子受体-2(HER-2)过表达型乳腺癌的诊断效能.方法 回顾性分析197例行DCE-MRI及扩散加权成像(DWI)检查乳腺癌患者资料,其中HER-2过表达型乳腺癌47例,非HER-2过表达型乳腺癌150例.HER-2过表达型乳腺癌与非HER-2过表达型乳腺癌组间DCE-MRI灌注参数[容量转移常数(Ktrans)、速率常数(Kep)、血管外细胞外间隙容积分数(Ve)、流入浓度增强率(W-in)、流出浓度衰减率(W-out)、达峰时间(TTP)]、ADC值和临床病理特征比较采用t检验或卡方检验.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析模型诊断效能.结果 HER-2过表达型乳腺癌和非HER-2过表达型乳腺癌组间肿瘤最大径、短径、T分期、N分期、Kep、W-in和ADC值的差异均有统计学意义(P＜0.05).联合肿瘤最大径、短径、T分期、N分期、Kep、W-in、ADC值构建的临床-影像联合模型曲线下面积(AUC)(AUC=0.763)高于基于联合最大径、短径、T分期、N分期的临床模型(AUC=0.634)和基于联合Kep、W-in、ADC值的影像模型(AUC=0.715).结论 肿瘤最大径、短径、T分期、N分期、Kep、W-in、ADC值与HER-2过表达型乳腺癌相关,联合上述参数可以提高诊断HER-2过表达型乳腺癌的能力.

目的 基于动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)参数、表观扩散系数(ADC)与临床病理参数预测乳腺癌腋窝淋巴结转移(ALNM)风险.方法 收集 168 例女性乳腺癌患者资料,根据病理结果分为 ALNM阴性组和阳性组.采用t 检验、χ2 检验或Kruskal-Wallis H 检验比较 2 组间DCE-MRI参数[容量转移常数(Ktrans)、速率常数(Kep)、血管外细胞外间隙容积分数(Ve)、对比剂流入浓度增强率(W-in)、对比剂流出浓度衰减率(W-out)、达峰时间(TTP)]、ADC 值和临床病理特征的差异.采用多因素逻辑回归筛选 ALNM的独立危险因素并建立预测模型.应用受试者工作特征(ROC)曲线评估模型的曲线下面积(AUC).结果 ALNM阳性组和 ALNM阴性组患者间长径、短径、脉管浸润、T分期、Ki-67、Ktrans 和 Ve 差异均有统计学意义(P<0.05).多因素回归分析示脉管浸润、长径、Ve 与 ALNM独立相关.基于联合脉管浸润、长径、Ve 的模型诊断 ALNM的 AUC最高(0.690),基于脉管浸润模型诊断 ALNM的 AUC最低(0.570).结论 基于 DCE-MRI 参数 Ve、脉管浸润、长径构建的联合模型可以有效预测乳腺癌ALNM,可以作为独立危险因子.

目的:设计一种快速测量闪烁晶体阵列中每个晶条衰减时间常数的低成本检测方法,为保障正电子发射计算机断层显像(PET)探测器时间性能的一致性提供技术支持.方法:采用多通道光电倍增管(滨松H8500),结合电阻网络和4个通道的高速模拟数字转换器(ADC)采样电路及上位机算法,实现对上百根晶条的衰减时间常数信息的测量.结果:通过实验验证了测量结果的有效性和准确性,验证了用衰减时间常数间接估计闪烁晶条的符合时间分辨率(CTR)的可行性.结论:该装置可很好的应用于PET设备生产厂商探测器生产质量控制环节,保障PET探测器时间性能的一致性,也可应用于改善医学探测器时间性能的实验室研究.

目的 探讨定量DCE-MRI参数、ADC值与乳腺浸润性导管癌组织分级的相关性及诊断效能.方法 对90例不同组织分级乳腺浸润性导管癌DCE-MRI定量参数[容积转移常数(Ktrans)、速率常数(Kep)、血管外细胞外间隙容积比(Ve)]、半定量参数[对比剂流入浓度增强率(W-in)、对比剂流出浓度衰减率(W-out)、对比剂浓度达峰时间(TTP)]及ADC值进行分析.结果 Ⅲ级组的Ktrans均值高于Ⅱ级组,而Ⅲ级组的ADC均值低于Ⅱ级组,差异均有统计学意义(P<0.05),但相关性较弱(|r|<0.30).Ⅱ级及Ⅲ级组间的Kep、Ve、W-in、W-out、TTP均值的差异均无统计学意义(P>0.05).Ktrans、ADC及Ktrans联合ADC的AUC分别为0.647、0.685、0.749.结论 DCE-MRI定量参数Ktrans、ADC与乳腺浸润性导管癌分级相关,高Ktrans、低ADC值提示高级别,联合两者可以提高诊断效能.

目的 探讨岩藻聚糖硫酸酯FV对大鼠的抗凝血作用及其机制.方法 以20、10、5、2.5、1.25、0.63 mg/kg尾iv给予Wistar大鼠,给药15 min后,采血测定大鼠凝血功能—凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)、活化部分凝血活酶时间(APTT),确定量效关系;以5 mg/kg尾iv给予Wistar大鼠,给药0、7.5、15、30 min以及1、2、4、6、12、24 h后采血测定大鼠凝血功能,确定时效关系,并测定5、2.5、1.25 mg/kg剂量下FV的生物活性半衰期;以发色底物法检测在抗凝血酶III(AT-III)或肝素辅因子II(HC-II)存在下,FV对凝血酶(IIa)、活化的凝血因子X(Xa)、活化的凝血因子IX(IXa)等的作用.结果 FV 0.63 mg/kg能显著延长APTT和TT,剂量高于10 mg/kg时PT显著延长,Fib显著降低,具有明显的剂量相关性.FV 5 mg/kg能够在4 h内显著延长APTT和TT,药后60 min内显著延长PT,具有明显的时间相关性.FV 5、2.5、1.25 mg/kg的抗凝效应均以一级动力学的方式消除,药效衰减速率常数(K)分别为0.013、0.019、0.048 min-1,抗凝效应半衰期(tl/2)分别为53.3、36.5、14.4 min.FV对IIa、Xa、IXa无明显抑制作用;对Xa内源性激活复合物的形成具有明显抑制作用,IC50为7.8μg/mL,且不依赖于AT-III和HC-II;依赖于AT-III,FV对Xa外源性激活复合物的形成具有抑制作用,IC50为11.6μg/mL.结论 FV以Xa内源性激活复合物为主要作用靶点,显著抑制该复合物的激活,发挥良好的抗凝活性,量效、时效关系明确.

目的 探讨DCE-MRI定量、半定量参数联合ADC值对三阴型乳腺癌(TNBC)的诊断价值.方法 回顾性分析99例经手术病理证实的乳腺癌患者资料,所有患者术前均行DCE-MRI及DWI检查.根据免疫组化结果将患者分为TNBC组与非TNBC组.采用Mann-Whitney U检验比较DCE-MRI定量参数[容量转移常数(Ktrans)、速率常数(Kep)、血管外细胞外间隙容积比(Ve)]、半定量参数[对比剂流入浓度增强率(W-in)、对比剂流出浓度衰减率(W-out)、对比剂浓度达峰时间(TTP)]及ADC值在2组间的差异,应用ROC曲线分析各参数诊断效能.结果 TNBC组TTP、ADC值均低于非TNBC组(P＜0.01).Ktrans、Kep、Ve、W-in、W-out在TNBC和非TNBC组间的差异无统计学意义(P＞0.05).TTP联合ADC的AUC(o.810)高于TTP(AUC=0.710)和ADC(AUC=0.756)的AUC.结论 DCE-MRI参数TTP、ADC值对TNBC具有一定的诊断价值,且联合两者可以提高诊断效能.

Ba?ra?ny学会前庭疾病分类委员会制定了双侧前庭病(bilateral vestibulopathy,BVP)的诊断标准.其诊断需基于病史、床旁查体和实验室检查进行评估.BVP是一类以站立或行走时出现不稳症状、在头部运动或黑暗环境和(或)地面不平时不稳加重为特点的慢性前庭综合征.此外,患者可伴头部或身体运动诱发的视物模糊或振动幻视;在静坐或平躺时通常没有症状.双侧前庭眼反射(vestibulo-ocular reflex,VOR)功能明显下降或缺损是诊断BVP的基础.对于角前庭-眼动反射(angular VOR, aVOR)的检测,可以通过头脉冲试验(head impulse test,HIT)、视频头脉冲试验(video HIT,vHIT)和巩膜搜索线圈技术来评估高频区域的功能,温度试验检测低频区域功能,正弦谐波或阶梯模式的转椅试验评估中频区域功能.BVP诊断标准:双侧水平VOR增益均＜0.6(角速度为150°/s～300°/s)和(或)温度试验反应减弱(每一侧冷水和热水刺激诱发出的眼震高峰慢相角速度(slow-phase velocity,SPV)之和＜6°/s)和(或)正弦谐波转椅试验(0.1 Hz,Vmax为50°/s)水平VOR增益＜0.1,相位超前＞68°(时间常数＜5 s).可能的BVP诊断标准为上述典型症状和床旁HIT显示双侧水平半规管病变.以下检查可作为补充检测但目前尚未纳入在诊断标准中:①动态视敏度(dynamic visual acuity ,DVA)(视力下降≥0.2 LogMAR);②Romberg试验阳性(提示前庭或本体感觉系统障碍,因此无特异性);③颈性和眼性前庭诱发肌源性电位(vestibular evoked myogenic potentials,VEMP)提示耳石器功能异常.目前对BVP亚型进一步细分的证据尚不充分,很难提出具有临床意义的定义.将来可根据解剖结构和频率特性对BVP的亚型进行分类:如低频或高频VOR范围内单纯半规管功能受损或单纯耳石器功能受损,其中后者较为罕见.双侧前庭病是一个临床综合征,诊断时应考虑其已知的病因(例如耳毒性药物中毒、双侧梅尼埃病、双侧前庭神经鞘瘤).双侧前庭病还可被称为双侧前庭功能衰减、功能不足、反射消失、功能低下及功能丧失.

目的 探讨定量动态增强磁共振成像(DCE-MRI)参数、表观扩散系数(ADC)值与乳腺癌抑癌基因p53、角蛋白56(CK56)表达状态的相关性.方法 回顾性分析145例表现为p53、CK56不同表达状态的女性乳腺癌病人资料.病人年龄25～95岁,平均(51.2±11.6)岁.依据p53、CK56结果将病人分为阳性组和阴性组,其中p53阳性者77例,阴性者60例;CK56阳性者31例,阴性者58例.所有病人术前均行乳腺DCE-MRI和扩散加权成像检查.采用t检验比较阳性组与阴性组间病人DCE-MRI定量参数[容积转移常数(Ktrans)、速率常数(kep)、血管外细胞外间隙容积比(ve)]、半定量参数[对比剂流入浓度强化率(W-in)、对比剂流出浓度衰减率(W-out)、对比剂浓度达峰时间(TTP)]及ADC值的差异,采用Spearman相关分析上述变量与p53、CK56表达状态的相关性,采用受试者操作特征(ROC)曲线分析并计算其敏感度、特异度和相应曲线下面积(AUC).结果 p53阳性组的kep、W-in值高于阴性组,而W-out值低于阴性组(均P<0.05);CK56阳性组的ADC值低于阴性组(P<0.05).p53表达状态与kep、W-in、W-out均呈弱相关(均P<0.05),CK56表达状态与ADC值呈弱相关(P<0.05).比较kep、W-in、W-out及三参数联合的诊断效果,W-out值诊断p53阳性的敏感度最高(0.850),kep值和三参数联合诊断p53阳性的特异度最高(0.900),三参数联合诊断p53阳性的AUC最高(0.640),kep的AUC最低(0.609),三参数联合较单参数kep的诊断效能提高了3.1％;ADC值鉴别CK56阳性的敏感度、特异度和AUC分别为0.862、0.548和0.657.结论 定量DCE-MRI参数kep、W-in、W-out能够鉴别p53表达状态,ADC值能够鉴别CK56表达状态,但诊断效能均偏低.