目的:通过调控脉冲重复频率(PRF)探讨诊断超声的不同占空比对增强乏血供肿瘤血流灌注的影响。方法:选用SD大鼠15只，于大腿内侧皮下建立Walker-256肿瘤模型，根据PRF随机分为3组，每组5只：A组，PRF＝50 Hz；B组，PRF＝1.0 kHz；C组，PRF＝2.0 kHz。每组荷瘤大鼠经超声联合微泡治疗10 min，于治疗前、治疗后即刻、治疗后4 h分别行超声造影检查，比较各组峰值强度(PI)、曲线下面积(AUC)和肿瘤血流灌注面积。结果:治疗后即刻，A、B组的PI、AUC值较治疗前增加(均 P<0.05)；治疗后4 h，B组PI、AUC值持续增加，优于治疗后即刻(均 P<0.05)，而A、C组PI、AUC值相对于治疗后即刻减少(均 P>0.05)。治疗后即刻，A、B组肿瘤血流灌注面积较治疗前增加(均 P<0.05)；治疗后4 h，B组的肿瘤血流灌注面积持续增加，优于治疗后即刻( P<0.05)，A、C组的肿瘤血流灌注面积相对于治疗后即刻减少(均 P>0.05)。 结论:PRF＝1.0 kHz的低强度诊断超声激励微泡空化可产生较明显的肿瘤血流增强效应，且持续4 h以上。

目的:探讨低强度超声激励微泡空化(USMC)产生的血流增强效应联合PD-L1单抗对实体肿瘤免疫微环境的改善作用。方法:将MC38结肠癌荷瘤小鼠随机分为四组：对照组(26只，无任何治疗)、USMC组(27只，USMC治疗)、程序性细胞死亡蛋白配体1抗体(anti-PD-L1)组(27只，anti-PD-L1治疗)和USMC+anti-PD-L1组(27只，USMC联合anti-PD-L1治疗)。USMC治疗使用VINNO70超声诊疗一体机。采用超声造影评价肿瘤血流增强效应；通过绘制肿瘤生长曲线及记录小鼠生存期，评价抗肿瘤疗效；流式细胞术分析肿瘤内CD8 +T细胞数量及功能、CD4 +T细胞分化情况、骨髓来源的抑制性细胞(MDSC)比例及肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的极化表型分布；酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测肿瘤内趋化因子CXCL9、CXCL10及HIF-1α含量；免疫荧光分析肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。 结果:USMC治疗后超声造影分析肿瘤峰值强度(PI)、曲线下面积(AUC)较治疗前增加(均 P<0.05)。USMC联合anti-PD-L1治疗明显抑制了肿瘤进展。USMC+anti-PD-L1组治疗后肿瘤微环境中CD8 +T细胞量及其Ki67的表达、γ干扰素(IFN-γ)与颗粒酶B(Grzm-B)的分泌量高于其他3组，辅助性T细胞(Th1)比例增加，调节性T细胞(Tregs)、MDSC比例减少，TAM表型向M1型极化(均 P<0.05)。ELISA分析显示，联合治疗还提高了肿瘤中CXCL9、CXCL10的浓度，降低了HIF-1α的含量(均 P<0.05)；肿瘤组织VEGF的荧光表达量也显著低于对照组( P<0.05)。 结论:超声血流增强效应联合PD-L1单抗能改善实体肿瘤免疫微环境，USMC产生的血流增强效应可作为一种增效PD-L1抗体肿瘤免疫治疗的超声新方法。

目的:探讨超声激励全氟丁烷微球产生的空化效应能否增强秋水仙碱对大鼠急性痛风性关节炎(AGA)的治疗效果，并减少其不良反应。方法:通过注射尿酸盐(MSU)晶体构建大鼠AGA模型，根据是否进行空化辐照及是否给予不同剂量的秋水仙碱将其随机分为A～F共6组，A组为空白对照组，B组为模型对照组，C组为空化组，D组为标准浓度药物组，E组为低浓度药物空化组，F组为标准浓度药物空化组。注射MSU后第7 h与第8 h对踝关节进行超声造影(CEUS)后计算曲线下面积(AUC)，对比空化效应对大鼠踝关节血流灌注的影响。根据24 h踝关节肿胀程度和步态评分评估AGA的症状。采用HE染色法检测中性粒细胞的浸润，通过检测血浆中白细胞介素1β(IL-1β)的水平分析各组炎症反应情况；通过检测内皮一氧化氮合酶(eNOS)的浓度分析血管扩张情况；通过胃肠道反应评分分析各组不良反应程度。结果:进行空化的三组(C、E、F组)CEUS血流灌注和AUC值明显高于未空化组(A、B、D组)(均 P<0.05)。与D组相比，E组AGA大鼠的踝关节肿胀程度、步态评分、血浆IL-1β水平差异无统计学意义(均 P>0.05)，但血浆eNOS浓度高于D组( P<0.05)，胃肠道反应的情况显著减低( P<0.05)。与D组相比，F组踝关节肿胀程度、步态评分降低，HE染色显示AGA大鼠踝关节的中性粒细胞滑膜浸润程度更轻(均 P<0.05)，但两组间血浆IL-1β水平及胃肠道反应的情况差异无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:超声激励全氟丁烷微球产生的空化作用可以增强AGA大鼠踝关节血流灌注，使局部秋水仙碱的治疗效果增强，有助于减少秋水仙碱的用量，降低其不良反应。

目的 探讨诊断超声激励微泡空化对胰腺癌血流灌注的增强效应.方法 选取经病理组织学或细胞学证实的晚期胰腺癌患者21例,在每次临床化疗结束后120 min内对病灶进行诊断超声激励微泡空化治疗,空化治疗前后分别行超声造影动态观察肿瘤血流灌注情况,并根据肿瘤区域时间-强度曲线分析峰值强度(PI)、曲线下面积(AUC),比较空化治疗前后各指标的差异.结果 21例胰腺癌患者共计进行84次化疗联合诊断超声激励微泡空化治疗,治疗后胰腺癌病灶PI由(109.19±2.64)dB增加到(110.62±2.70)dB,AUC由(4752.76±149.53)dB·s增加到(4863.67±159.77)dB·s,但与治疗前比较差异均无统计学意义(P=0.16、0.33).结论 诊断超声激励微泡空化可能会增加胰腺癌的血流灌注量,有望改善胰腺癌因乏氧、乏血供导致的化疗抵抗问题.

目的:探讨不同超声治疗时间对超声激励微泡空化增强小鼠MC38肿瘤血流灌注的影响，并对机制进行初步分析。方法:选取54只大腿内侧皮下种植MC38的荷瘤小鼠，利用飞依诺超声诊疗一体机Vflash模式激励微泡空化行超声治疗（MI=0.3）。小鼠按超声治疗时间（t）随机分为6组（n=9）：A组，t=1?min；B组，t=3?min；C组，t=5?min；D组，t=7?min；E组，t=10?min；F组（对照组），不接受超声治疗。每组治疗前后分别行超声造影检查，通过治疗前后峰值强度（PI）比、曲线下面积（AUC）比及肿瘤血流灌注面积比综合评估肿瘤血流灌注情况。治疗后，每组随机取2只小鼠肿瘤组织进行HE染色，观察治疗后病理学改变；取各组余下的7只小鼠肿瘤组织进行一氧化氮含量测定。结果:超声激励微泡空化治疗后，C、D、E组治疗前后PI比、AUC比及灌注面积比均明显高于对照组（P均<0.05）；其中D组治疗前后PI比、AUC比最高，明显高于C组（P<0.05）、B组（P<0.05）、A组（P<0.01），灌注面积比高于A组（P<0.01）、B组（P<0.05）。病理结果显示C、D、E组肿瘤微血管扩张充血，其中D组扩张微血管数量最多，充血最明显。超声治疗的各组肿瘤组织内一氧化氮含量较对照组增加，其中D组一氧化氮含量最高，但各组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论:超声激励微泡空化可以增强小鼠MC38肿瘤血流灌注，超声治疗时间延长到5?min以上，肿瘤血流增强效果更加明显；超声治疗7?min时，超声肿瘤血流效应最为明显。其机制可能与超声激励微泡空化导致微血管扩张有关。

目的 利用超声激励微泡促进碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)目的 基因表达,为组织修复提供细胞水平基础.方法 构建并提取bFGF目的 基因质粒,其含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作为标记基因,制备并鉴定含bFGF-EGFP基因微泡.将细胞成功分离、培养后,在不同实验条件下(质粒质量浓度、声强、辐照时间和占空比)进行超声激励微泡参数优化,根据每组条件下最优的细胞存活率和标记基因转染效率所对应的参数作为后续实验超声辐照条件.实验分为4组:A组为对照组,B组为单纯bFGF-EGFP质粒组,C组为超声辐照+普通脂质微泡组,D组为超声辐照+bFGF-EGFP微泡组.细胞转染24h后,在倒置荧光显微镜下观察EGFP表达情况;转染48 h后,用流式细胞仪检测转染效率,CCK8法检测细胞存活率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot分别检测mRNA和蛋白的相对表达量,并比较4组间的差异来评价超声激励bFGF微泡在细胞水平的生物学效应.结果 携带bFG F-EG FP质粒微泡粒径大小约为(941.7±101.2) nm,Zeta电位大小约为(20.8±4.5) mV.实验研究中最优超声参数为质粒质量浓度20 μg/mL,声强1.50 W/cm2,辐照时间60s,占空比40％.细胞转染24h后,A组和C组未见明显EGFP表达,B组有少量EGFP表达,而D组EGFP表达量明显增多.转染48 h后,4组细胞存活率均＞80％,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).流式细胞仪测量转染效率在D组[(60.0±7.9)％]较其他各组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).转染48 h后,超声激励目的 基因bFGF转染后D组mRNA[(45.0±5.1)％]和蛋白相对表达量[(35.0±5.0)％]均明显增高,而D组Ⅰ型胶原蛋白[(9.1±3.0)％]和Ⅲ型胶原蛋白[(11.2±3.1)％]较其他组均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 超声优化参数激励bFGF微泡可提高细胞转染效率并保持较高的细胞活性,促进bFGF表达效率并抑制Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白;这种超声物理效应和bFGF生物效应相结合的方式为皮肤组织在细胞水平修复提供了新策略.

目的 机械指数(mechanical index,MI)和占空比固定时,探讨超声不同脉冲宽度(pulse length,PL)和脉冲重复频率(pulse repetition frequency,PRF)组合激励微泡空化(ultrasound stimulated microbubble,USMB)对C57BL/6小鼠肿瘤组织血流灌注和化疗药物释放的影响.方法 健康6～8周龄雌性C57BL/6荷瘤小鼠24只,体质量(17.74±0.43)g,随机分为3组(n=8):对照组(A组,超声假照),PL3.0+PRF2000+DOX 组(B 组,较高 PRF 较低 PL 超声辐照),PL34.5+PRF200+DOX(C 组,较高 PL 较低PRF超声辐照).USMB治疗前后分别进行超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS),比较各组肿瘤峰值强度(peak intensity,PI)、曲线下面积(area under curve,AUC)和肿瘤血流灌注面积百分比.治疗后缓慢推注阿霉素(doxorubicin,DOX),检测肿瘤组织中DOX药物浓度;病理切片观察小鼠肿瘤组织微结构.结果 治疗后,A组的PI、AUC值与治疗前相比无显著差别(P＞0.05);B组的PI、AUC值较治疗前分别增加19.3％、18.0％(P＜0.05);C组的PI、AUC值较治疗前分别减少16.0％、15.8％(P＜0.05).治疗后,A组的肿瘤灌注面积较治疗前无显著差别(P＞0.05);B组的肿瘤灌注面积较治疗前增加21.0％(P＜0.05);C组的肿瘤灌注面积较治疗前减少8.2％(P＜0.05).高效液相分析发现B组DOX药物浓度分别是A组的5.0倍和C组的4.8倍(P＜0.05);A组和C组DOX药物浓度无显著差别(P＞0.05).病理结果发现A组和B组肿瘤组织微血管呈轻度和中度扩张,而C组肿瘤微血管破裂出血.结论 在相同的MI和相似占空比条件下,较低脉冲宽度和较高脉冲重复频率超声组合激励微泡空化可增强肿瘤血供、促进化疗药物释放;较高脉冲宽度和较低脉冲重复频率超声组合可阻断肿瘤血供.