分析8例假性软骨发育不良(pseudoachondroplasia,PSACH)患者的临床特征及软骨低聚物基质蛋白(cartilage oligomer matrix protein,COMP)基因突变情况.收集5例男性和3例女性患者的临床病历资料,并采集8例先证者、17名家系成员及250名无血缘关系志愿者的外周血,进行COMP基因位点突变检测.8例患者均为散发病例,检测到COMP基因存在突变.PSACH主要表现为身材短小,韧带松弛,早发性关节炎,就诊时8例患者身高低于同龄人平均身高3个标准差,伴有四肢粗短、下肢畸形.X线摄片特征为儿童期椎体扁平,前缘舌状突出,长骨粗短;成年人可有骨性关节炎表现.对于短肢侏儒、指趾粗短及X线摄片异常的患者应怀疑PSACH,进行COMP基因突变检测可明确诊断.

目的 通过对一个5代疑似多发性骨骺发育不良(multiple epiphyseal dysplasia,MED)的大家系(患者17例)进行临床特征分析和致病基因的筛查,为遗传咨询和产前分子诊断提供实验依据.方法 采集家系成员病史,一般体检、关节、髋部X线片资料;收集该家系外周血样,提取样本DNA,靶向基因高通量测序方法对先证者DNA临床全外显子进行测序,使用Next Gene软件对测序序列进行比对分析,并进一步利用Ingenuity软件对存在的突变进行功能注释,寻找先证者致病突变.针对可疑突变,PCR和Sanger测序对家系其他成员DNA样本进行验证.结果 该家系共5代,现存家系成员38人,系谱分析符合常染色体显性遗传特征.家系共有患者17例,其临床表现为:幼时出现走路姿势异常,后出现髋关节及膝关节疼痛,X线有典型骨骺发育不良病理改变.高通量测序及数据分析后,筛选出先证者(Ⅳ-3)软骨低聚物基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)基因c.1153G＞A(p.Asp385Asn)错义杂合突变,该突变导致其编码蛋白的第385位天冬氨酸被天冬酰胺替代.先证者家系其他成员符合基因型与表型共分离.结论 COMP基因c.1153G＞A错义杂合突变是导致该MED家系患者发病的分子机制,该突变首次在大家系中被报道,进一步明确了COMP基因c.1153G＞A突变的致病性,有利于家系患者的进一步的诊治,也为产前诊断提供了实验依据.

目的 建立大鼠血浆中低聚仿刺参糖胺聚糖(DAHG-1W)的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)测定万法,研究大鼠单次静脉注射DAHG-1W后的血浆药物动力学.方法 大鼠血浆样品经灰色链霉菌蛋白酶预处理、温和酸水解脱除岩藻糖支链、硫酸软骨素ABC 酶降解成主链二糖并用2-氨基吖啶酮(AMAC)衍生后,进行LC-MS/MS 分析.色谱分离采用Cortecs UPLC T3 色谱柱(2.1 mm x 150 mm,1.6 μm),流动相为10 mmol·L-1 乙酸铵水溶液-甲醇,梯度洗脱.质谱检测采用加热电喷雾离子源(H-ESI),以负离子方式检测,AMAC标记的CS-4S6S 和CS-2S4S(内标)的多反应监测(MRM)离子对均为m/z 732.0→652.4,保留时间分别为9.0 和7.4 min.应用上述LC-MS/MS 方法测定大鼠尾静脉注射DAHG-1W(5 mg·kg-1)后的血浆药物浓度,采用WinNonLin 6.0版软件计算药代动力学参数.结果 大鼠血浆中DAHG-1W在3.91～125.00 μg·mL-1 浓度范围内线性关系良好;日内和日间精密度均小于15％,准确度为102.60％～111.17％;回收率为89.16％～103.35％;无明显基质效应且血浆样品稳定性好.大鼠静脉注射给药后DAHG-1W的血药峰浓度(Cmax)为(36.73±2.10)μg·mL-1,半衰期(t1/2)为(277.31±56.22)min,清除率(Cl)为(0.82±0.09)mL·min-1·kg-1,0～300 min 药时曲线下面积(AUC0-t)为(3638.30±45.84)min·μg·mL-1.结论 本研究建立了大鼠血浆中DAHG-1W 的LC-MS/MS 分析方法,可应用于DAHG-1W在大鼠体内的药物动力学研究.