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长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1靶向微小核糖核酸-375/Yes相关蛋白1通路调控胃癌细胞株多药耐药的机制
编辑人员丨1秒前
目的:探讨长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1(lncRNA ZNRD1-AS1)在胃癌多药耐药(MDR)中的作用及机制。方法:采用24孔板体外培养胃癌MGC-803细胞株,设空白对照组、MDR组、空载质粒组、lncRNA ZNRD1-AS1过表达组、微小核糖核酸-375模拟物(miR-375 mimic)组及联合干预组。除空白对照组以外,均采用阿霉素梯度浓度法建立MDR株。建立成功以后,lncRNA ZNRD1-AS1过表达组和miR-375 mimic组分别采用慢病毒转染法转染lncRNA ZNRD1-AS1过表达质粒和miR-375 mimic,空载质粒组转染空载质粒与模拟物对照(mimic NC)。共培养48 h,采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA ZNRD1-AS1和miR-375表达,采用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测Yes相关蛋白1(YAP1)、哺乳动物不育系20样激酶1(Mst1)、大肿瘤抑制基因-1(Lats1)的蛋白表达,采用噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞实验检测细胞的增殖活力与凋亡率,Transwell实验检测MGC-803细胞侵袭能力。结果:各组之间的lncRNA ZNRD1-AS1、miR-375、YAP1表达水平差异均有统计学意义( F=60.465、75.695、63.441,均 P<0.05);细胞增殖活力、凋亡率与侵袭数目差异也有统计学意义( F= 26.818、63.854、16.323,均 P<0.05)。MDR组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为1.736±0.084和0.825±0.135,高于对照组(1.025±0.036和0.155±0.02),miR-375表达为0.054±0.018,低于对照组(0.128±0.028);细胞增殖活力和迁移数目分别为0.855±0.026和152.5±20.5,高于对照组(0.652±0.015和85.0±15.5),凋亡率为(3.85±1.02)%,低于对照组[(6.55±1.05)%, P<0.05]。lncRNA ZNRD1-AS1过表达组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为6.582±1.035和1.256±0.185,均高于MDR组,miR-375表达水平为0.015±0.011,低于MDR组;细胞增殖活力和迁移数目分别为0.987±0.030和(202.5±32.5)个,高于MDR组,凋亡率为(2.03±0.62)%,低于MDRMDR组( P<0.05)。miR-375 mimic组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为0.225±0.086和0.056±0.035,均低于MDR组,miR-375表达水平为32.524±5.254,高于MDR组;细胞增殖活力和迁移能力为0.562±0.085和(80.5±14.6)个,低于MDR组,凋亡率为(18.25±2.10)%,高于MDR组( P<0.05)。共干预组各个指标的变化水平介于lncRNA ZNRD1-AS1过表达组与miR-375 mimic组之间,与两组比较差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:lncRNA ZNRD1-AS1能够通过miR-375调节胃癌细胞的行为学特征,从而促进MDR,其机制可能与YAP1介导的Hippo信号通路有关。
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编辑人员丨1秒前
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长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1在胃癌组织的表达及其临床意义
编辑人员丨1秒前
目的:探讨长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1(lncRNA ZNRD1-AS1)在胃癌组织中的表达特点及其诊断学价值。方法:选取嘉兴学院附属第二医院胃肠外科收治的96例经手术治疗、且留有手术样本的胃癌患者作为研究对象,根据是否发生转移分为转移癌41例和原位癌55例。详细统计患者的临床病理和预后资料,并采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测癌组织及癌旁健康组织的lncRNA ZNRD1-AS1和微小核糖核酸-375模拟物(miR-375 mimic)表达水平。两组之间的比较行配对设计或独立样本 t检验,多组间的比较行单因素方差分析。 结果:癌组织的lncRNA ZNRD1-AS1表达水平高于癌旁健康组织(1.051±0.205比0.645±0.145, t=15.845, P<0.001);癌组织的miR-375表达水平低于癌旁健康组织(1.014±0.197比1.365±0.245, t=10.965, P<0.001)。转移癌组织的lncRNA ZNRD1-AS1表达水平高于原位癌组织(1.201±0.165比0.953±0.148, t=3.604, P<0.01);转移癌组织的miR-375表达水平低于原位癌组织(0.995±0.164比1.193±0.176, t=5.612, P<0.001)。不同TNM分期癌组织的lncRNA ZNRD1-AS1表达水平也不同( F=14.437, P<0.001),Ⅰ期低于Ⅱ期(0.937±0.157比1.095±0.187, P<0.001);Ⅱ期低于Ⅲ期(1.095±0.187比1.185±0.154, P<0.001)。根据lncRNA ZNRD1-AS1表达水平的中位数把患者分为高表达组48例和低表达组48例,高表达组的总生存率低于低表达组[52.1%(25/48)比72.9%(35/48), χ2=4.444, P<0.05],无进展生存率也低于低表达组[41.7%(20/48)比64.5%(31/48), χ2=5.061, P<0.05]。 结论:lncRNA ZNRD1-AS1与胃癌的发生与发展密切相关。
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编辑人员丨1秒前
